ctDNA与肿瘤的那些事儿

最近“ctDNA”，“液体活检”等各种资料漫天飞，为了搞清楚来龙去脉，于是乎，草帽小子花了几天时间搜集网上的各类资料，整理出来跟大家一起分享。

血液是流动在人的血管和心脏中的一种红色不透明的粘稠液体。主要成分为血浆、血细胞、遗传物质（染色体和基因)。cfDNA（cell free DNA）就是在血浆中发现的游离的DNA片段； ctDNA即循环肿瘤DNA片段（ci rculating tumor DNA），是指cfDNA中来自肿瘤释放的DNA片段。CTC即循环肿瘤细胞 (Circulating tumor cell, CTC) ，是指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞，存在于血细胞中。

几乎每个人的血液中都含有游离的DNA片段，它们可能来源于细胞的凋亡、坏死，也可能是通过主动释放的方式（剧烈运动）进入血液；其片段范围100 bp ~10 kb 。

cfDNA含量很低，大部分是1-100ng/ml 血浆； ct  DNA仅占cfDNA的0.1%~5%；其主要片段范围在166bp左右。

正常人cfDNA大小分布                  癌症病人cfDNA大小分布

由于cfDNA反应的是体内释放和清除的动态平衡后的情况，草帽小子认为是体内优先清理ctDNA的结果导至片段范围较小，等于一个或者几个核小体的片段长度 。

CTC在肿瘤患者外周血中含量极低，在癌前病变或肿瘤早期数目更加稀少。一般患者10ml血中只有1-10个 CTC，而 10ml血液里面有500亿个红细胞和上亿白细胞 。

在含量都如此低的情况下，提取和检测变异该怎么做呢？

有研究已经证实，肿瘤患者外周血中的cfDNA总量 ，要高于健康人。通过这一点，虽然不能武断的说cf DNA能成为肿瘤标志物，但是cfDNA的含量增多，能起到一个较好的提示作用，作为一个初筛的手段。cf DNA作为液态活检，不只是局限于肿瘤学。例如，有研究报道对于接受器官移植手术的病人，可以通过监测术后外周血中具有捐献者基因特征，片段化的cfDNA含量变化 ，来评估移植器官的排斥情况。

一般而言，ctDNA含量在癌症晚期或转移性肿瘤中较高，而在早期或非转移性肿瘤中含量较低。因此，原发癌检出率较低，转移癌、复发癌检出率较高，癌症分期越高，检出率也越高。除了辅助早期诊断、高危人群体检筛查外，ctDNA还可以应用于在实时监测临床效果等方面。

2014年，欧盟批准将ctDNA检测用于易瑞沙的伴随诊断；2015年，《ASCO年度报告：2015临床肿瘤学进展 》，液体活检技术被列为肿瘤治疗领域下一个十年趋势之一；2016年，美国医疗保险机构Palmetto宣布将体细胞变异ctDNA分析测试纳入其保险范围。未来期望ctDN A检测早日在中国纳入临床检测，同时希望早日纳入医保。