据有关文献报道: Allard等检测了99例肺癌患者(主要是NSCLC)的168个样品,发现肺癌患者外周血中CTCs数目≥2、≥5、≥10和≥50的患者分别占总患者的20%、14%、10%和6%。 Krebs 等检测101 例Ⅲ~Ⅳ期的NSCLC 患者的CTCs,发现Ⅳ期的数目为0 ~ 146,Ⅲb 期为0 ~ 3,而Ⅲa 期则没有CTCs。 一个样本量为430例的多中心前瞻性研究发现 CTCs > 3个/7.5mL的结直肠癌患者较差的治疗反应以及较低的5年生存率,但假若治疗后CTCs水平可下降(< 3个)则疾病转归较好。 ………... 癌症患者外周血中的循环肿瘤细胞(CTCs)数量真的这么少吗?根据我们专业的CTC检测,通过使用我公司CytoSorter循环稀有细胞分选系统,针对非小细胞肺癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌和甲状腺癌等多种肿瘤的各阶段CTC进行分离富集和鉴定,我们富集到的CTCs数量比文献报到的数量多。 那为什么文献报道中的检测CTC数量这么少,我们仔细研究发现,事实竟是如此: (1) 确实很少:健康人或治疗康复的患者CTCs数量非常少(个位数,甚至没有) 理论上来说,健康人或者治疗康复的患者血液循环中是不含有CTCs的,但也不排除某个良性肠炎症患者血液中出现几个CTCs。一般患者10mL血液中CTC含量也只有1-10个。 (2) 数值小,而不是数量少:预后、疗效等的临界值(阴阳性判读标准)CTCs数值非常小(个位数) 目前主要是以CTCs数量临界值为依据,判断患者的无进展生存期和总生存期,然后评估预后和疗效。因为健康人和治疗康复患者血液循环中CTCs数量应该是0,所以这个临界值自然很少,一般都是个位数,比如胃癌CTCs ≥1个即为阳性,晚期乳腺癌CTCs≥5,即判为无进展生存期和总生存期较差,预后较差。 (3) 所采用的CTCs检测方法学存在缺陷:
表1 CTCs各种富集方法的优缺点
目前大多数CTCs分离富集技术是两种或两种以上CTCs分离富集技术的结合,这样叠加就加大了外周血中CTCs丢失的程度。CTC分离富集方法学的固有缺陷,导至不能完全捕获CTCs,最后的结果是让一部分CTCs成为漏网之鱼、逃之夭夭。CytoSorter循环稀有细胞分选系统巧妙结合纳米技术和微流控技术,采用级联放大优质的高灵敏捕获抗体,结成天罗地网,高效捕获外周血中的CTCs。
Cho等运用免疫荧光法比较多种肿瘤患者血液中CTCs 的水平,发现只有50%的非小细胞肺癌患者CTCs 为阳性,可见检测肺癌CTCs仍有一定难度。这可能是由于肺癌患者CTCs中某些基因表达的差异,导至一部分CTCs表达丰度比较低、难以检测到。这可能是由于那个时代检测方法学和捕获抗体的质量的限制。华得森生物的CytoSorter循环上皮细胞检测试剂盒,采用不断改良的优质的高灵敏捕获抗体,高效捕获靶标表达丰度较低的CTCs,使CTCs得捕获更加全面,数量更接近真实。
无论哪种方法对CTCs富集后,对CTCs进行计数,一般都是采用特异性抗体免疫荧光染色结合荧光显微镜观察的方法。这就涉及到免疫荧光染色的效率和荧光显微镜观察的效率问题。选择高质量的CTCs检测试剂,选择合适的荧光滤光片,对CTCs准确计数至关重要。 CytoSorter循环稀有细胞分选系统 ——助力CTCs高效富集,让您的CTCs数量不再“贫瘠”! 杭州华得森生物技术有限公司与美国、台湾公司合作,开发出一套循环稀有细胞检测系统,与目前市面上常见的同类产品相比: ①使用最先进的微流控纳米芯片技术,是最新的第三代CTCs富集系统; ②CTCs捕获试剂改良和优化,能够捕获低表达丰度的CTCs,最大效率的富集外周血中的CTCs; ③配套专用的循环肿瘤细胞检测试剂,对CTCs的捕获率和回收率达到85%以上; ④富集CTCs结合在纳米芯片上,便于保存计数,可灵活的进行FISH、QPCR、NGS等分子检测分析,同时可细胞培养及药物模型构建。 更多关于CytoSorter循环稀有细胞分选系统及CTCs检测产品和技术服务信息,请关注和浏览本公司网站(www.watsonbiotech.com)及微信公众号(watsonbiotech)。 来源:华得森生物 |