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巧夺天工的设计!免疫层析技术的突破与创新!(其一)

2025-8-6 15:33| 编辑: 归去来兮| 查看: 176| 评论: 0|来源: IVD研发宝

摘要: 那么每个零部件到底有什么作用,整个系统是如何运行起来的?

Hello啊,宝子们。为何说免疫层析技术是一个巧夺天工的设计,免疫层析试纸条好比一款精密设计的仪器,这个仪器表面看起来非常简单,从外部看所用的部件屈指可数,真正达到了大道至简的境地。没有一个部件是多余的。本文为何如此推崇免疫层析,因为其优点是其他平台都无法比拟的。其包含的缺陷一旦被创新打破,这对于整个行业都将是影响巨大。本期内容将详细介绍免疫层析系统的结构,以及每个结构的作用。相对比其他平台最大的弊病以及目前可尝试的创新技术,本期内容很干,建议收藏+关注!

那么每个零部件到底有什么作用,整个系统是如何运行起来的?
1)首先是底板的设计
底板就是将所有零部件进行粘连的胶板,胶板一般有青色,白色,黑色几种颜色。虽然颜色不同但是作用都是连接零部件,类似于台式机电脑的机箱用来将风扇,显卡,CPU和主板等部件连接到一起形成一个完整的系统。底板是支持定制的可以根据自己项目的要求进行定制。

底板有什么讲究?看似简单的底板其实定制乾坤大!
<1>底板的颜色会影响什么?
NC膜其实是透光的,底板相当于NC膜上C,T线的显色的背景色。如果有宝子们学过PS就应该知道,C,T线的显色就类似于使用PS中的正片叠底。实际的能看到的C,T线的颜色是其本身颜色和底板背景色的叠加色。所以有时候可以通过替换不同颜色的底板来加深颜色,但是这个效果大家不要期望有什么巨大的变化,因为改变是比较轻微的。
<2>底板的划线位置会影响什么?
上图关于底板上的划线是有很大讲究的,一般情况下分为a,b,c,d四个区域,也有只分a,b,c三个区域的。划线的目的是规定各个组件的宽度和位置的。通常b区域的NC膜的宽度都是固定的是按照NC膜本身的宽度进行设定的,比如有20mm的有25mm的也有30mm的。

底板的宽度一般是60到80mm之间,也有低于60的具体按照项目要求去设定。定好底板的宽度后就需要去确定划线位置。划线位置就相当于省去了磨具,直接按照线的位置进行贴板组装即可非常方便。当然这是最直接的作用。另一个作用就是根据整个层析系统的适配性来决定的。多宽的样品垫合适多宽的结合垫合适,样品垫与结合垫的重叠区域多少合适,这些都需要事先经过试验验证才能确定。因此划线位置并不是简单简单的定个位置。
当然有时候也不必那麽麻烦,一般厂商制作的都有通用的模板。如果这个模板对你的项目影响不大,正好可以用,也就不用做一系列试验验证了。
<3>一定要将底板分割为a,b,c,d四个区域吗?
当然不是,如果项目用的是一体垫就不需要。那什么是一体垫?一体垫就是样品垫和结合垫是同一个,一般喷金工艺会这样去处理。好处就是只需要处理一种垫子省事,省时,省钱。
2)样品垫的作用
样品垫是干嘛的,样品垫是样本进入整个层析系统的入口,是样品首先需要经过的地方。一般经过样品点后就要经过结合垫。那么样品点的作用会有以下几种:
<1>样本前处理
比如针对样本中的HAMA,RF等干扰,以及测试全血时的血红蛋白的处理。这些都可以在样品垫中进行调试。让样本在接触到结合垫的反应微球之前就已经被前处理,避免影响实验结果的可靠性。


<2>缓冲作用
真实样本的成分复杂,有的物质对反应体系的pH影响较大,所以可以通过在样品中引入缓冲对及一些蛋白类物质来解决这个问题。
<3>过滤作用
这个理解起来,就是过滤样本中较大的杂质。比如可能存在的絮状物或者蛋白复合物。
<4>其他

3)结合垫——层析系统的关键物料
这个部位的重要性绝对是T0级别。没有这个部位产品无法起作用。结合垫一般由三个组成,玻璃纤维膜+标记微球+处理液。此部分是承载标记微球的载体,既然是载体就要满足以下条件:

<1>材质本身具有良好的均一性,亲水性或者疏水性,爬速也有一定要求。
这个主要是从肉眼观察以及测试时微球的释放状况进行评估。

<2>经得住高温烘烤,不宜与其他蛋白类物质发生共价结合。
如果经过37℃或者45℃烘烤后,结合垫中的标记微球很难释放,可能是材质或者处理液不合适引起的 。

<3>能维持标记微球的功能稳定性。
这个是重中之重。微球的功能稳定性也就是微球上标记抗体的稳定性。这对结合垫材质以及处理液都有很高的要求。

4) 硝酸纤维素膜,NC膜
在整个层析系统中,硝酸纤维素膜就相当于电视的荧屏,主要作用是信号的显示。同样这作为整个层析系统的关键环节所占的分量可想而知。该部分的功能及作用如下:

<1>承载包被抗体
作为承载包被抗体的重要部件,其部件本身的质量也要过硬,一般NC膜
的普遍上除了默克就是赛多利斯。膜表面的平整,孔径的均一,爬速的稳定以及本身的批内和批间差都需要着重考量。

<2>提供标记微球,待测物,包被抗体的反应场所
因为层析系统最大的影响因素就是没有太多的时间,让所有的物质充分反应。这本身是受限于层析系统的毛细作用导至液体从加样孔到吸水纸的时间非常短暂。一般不到一分钟液体就能层析上去,后面的过程就是液体类似于一个微型的南水北调工程。在10-15分钟的时间段内不断有肉眼不可见的微小细流从样品垫被输送到结合垫,中间途径NC膜上的T,C线最后被吸水纸吸收。动力截至到液体不足以流动到吸水纸段结束。

<3>信号的显示区域

那些参与反应的复合物部分被NC膜上的T,C线的包被抗体捕捉。从而显示出信号,这个信号可以是肉眼直观看得见的彩色,也可以是由激发光激发后才能显出的荧光。

4) 抽水泵之不起眼的吸水纸

吸水纸就像是一个抽水泵,不断地将吸收液体,直至本身所达到的液量饱和量才会停止。所以一般吸水纸比较厚,就是为了能有更大的液体载量。假设吸水纸的液体载量比较低,或者吸水能力不足。就会出现层析过程中的液体回流。对检测结果造成影响。

好了宝子们,以上是免疫层析的基础入门知识。本次又啰嗦的简单讲了一遍,基础知识对于研发人员非常重要,这些非常有利于帮助在一些复杂问题中找到突破口。
下次的内容将会对整个层析系统进行研究,以及开始本次的真正话题《免疫层析技术的突破与创新!》相信你定会有所收获,敬请期待!

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