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直击卡脖子问题!旷博生物荧光素研发平台迎势而上!

2023-7-13 09:39| 编辑: 归去来兮| 查看: 1121| 评论: 0|来源: 小桔灯网

摘要: 在流式细胞术实验中,各种荧光素标记的抗体是必不可少的。

在流式细胞术实验中,各种荧光素标记的抗体是必不可少的。好的荧光素标记抗体可以让实验事半功倍。流式抗体的荧光素该如何选择?选择不当会有哪些问题?大家是不是经常碰到以下的问题:染料的亮度与抗原表达量难匹配、荧光染料光谱宽,干扰大、荧光素重叠严重导至荧光溢漏、亮度不够,SI指数低、多色方案可选的荧光素种类太少,特别是紫激光种类少,被国外企业卡脖子影响实验进度、复合染料共价键断裂导至结果假阳、染料批次间有明显的差异,重现性不好......

旷博生物作为国内流式龙头企业,集原料、试剂和仪器研发、生产质造和销售为一体,深耕流式领域40余年,打破国外技术垄断,致力于开发更多新型荧光素种类和抗体以满足临床和科研需求。随着多激光多色及光谱流式细胞仪等更高通量仪器的出现,旷博生物随之开发出应用于多色实验的小分子QB系列荧光素,目前已拥有20余种荧光素供客户选择(表1)

表1. 旷博生物自有荧光素及通用荧光染料列表


QB染料的前世今生

旷博生物拥有著名的HI和HIQB系列单克隆抗体,身份正宗(HI和HIQB系列有70%以上是经过国际HLDA正式以CD命名,有国际编号),且QB染料(图1)具有独特优势:

1. 作为新一代的小分子染料,分子量小能够通过细胞膜渗透到细胞内部,可用于标记和检测细胞内部的生物分子;2. 光稳定性好,能耐受激光光源的激发,可以保持长时间的荧光信号(图2);3. 具有一致的发射光谱且光谱窄,可尽量避免与其他染料的光谱重叠,提高检测的特异性和灵敏度。当QB荧光染料与HI/HIQB系列优质抗体偶联后、支支优秀的单抗隆抗体试剂即成功出炉,为流式多色方案提供更多更好的试剂选择。

图1. QB染料的典型结构特征和标记原理


图2. 经过优化的小分子荧光染料稳定且与抗体结合更加稳固,QB染料可以减少光漂白效应,从而增加QB染料的光稳定性。如图,CD45 QBB520和FITC同时经过不同的处理(未受光照射、于透明瓶内受光照射48小时、于棕色瓶内受光照射48小时)。随后,新鲜外周血分别取上述处理的抗体进行孵育染色、裂红后上机检测。可以看到CD45 QBB520 的光稳定性明显优于传统小分子染料。


QB染料目前主要分为紫光激发、蓝光激发和红光激发三大类。QB染料均以QB+激发波长+发射波长命名,如QBV500指紫光405nm激光器激发且发射峰值在500nm附近的染料,即QB(系列染料命名) + V (405nm紫激光)+ 500(发射峰值在500nm)。与市面上其他染料(Alexa Fluor®系列、DyLight™系列和ifluor™系列荧光素)相比,QB染料的发射谱图更窄,可避免与其他染料的光谱重叠(图3&4&5)

图3. QB染料家族之紫光系列:QBV425、QBV450、QBV500和QBV540


图4. QB染料家族之蓝光系列:QBB520和QBB560


图5. QB染料家族之红光系列:QBR670和QBR710


QB系列染料助力多色细胞亚群分析

在精准医疗时代,个体化的诊疗方案愈发离不开对患者免疫状态评估,并对评估的精度和深度提出了更高的要求。关注更广范围的细胞群和细胞亚群,以及对更深层次的细胞功能评定才能满足临床一线工作对更精准诊断和治疗的需求。随着多激光多色以及光谱流式细胞仪的出现,实验室可检测更多靶标、做更大的Panel,但如何为多靶标做配色不仅要考虑抗体的克隆号、也需要考虑到荧光染料的性能指数。QB染料在多色实验的应用优势(以光谱流式为例):1. 激发波长相对单一,解决传统荧光染料为多激光激发,改善荧光光谱重叠的痛点(图6&图7);2. 无需特殊缓冲液,使用灵活,轻松兼容多种染料(图8);3. QB系列染料配色组合在光谱上应用,细胞分群良好(图9)

图6. 传统染料PerCP(上图)和FITC(下图)单染样本在光谱流式上的光谱图,上图可看到多个激发峰:488nm主要激发峰、紫光和红光均有信号峰,下图可看到多个激发峰:488nm主要激发峰、紫光也有信号峰。


图7. QBV425单染样本在光谱流式上的光谱图,可以看到紫光为主要激发峰,而别的激光均无传统染料类似的次要激发峰。


图8. 多色实验中QB染料相互兼容且可以和其他类别染料进行灵活兼容。外周血加指示的抗体CD45 FITC/CD3 QBV450/CD19 QBR670/CD4 APC进行孵育,裂红后在光谱流式NL-CLC上进行检测。可以看到QB染料无需特殊缓冲液、使用灵活,适用于光谱流式。


图9. CD45-QB540/CD3-QB500/CD4-QB450/CD8-QB425亚群配色组合在光谱流式NL-CLC上使用,细胞分群良好。


旷博生物荧光素研发平台早在多色实验及光谱流式细胞仪出现时就着力开发更多荧光染料,除了现已有的近20种荧光素,目前在规划且开发中的新品包括QBB620、QBB660、QBR780和APC-QB750等,未来2~3年将推出更多新型荧光素供临床及科研使用。



旷博生物整体解决方案

旷博生物荧光素研发平台经过40余年的深耕细作,独具特色和优势的QB系列荧光素,直击国际企业卡脖子问题,迎合现代流式技术发展和市场需求,显著提高了流式检测结果的灵敏度和成功率。旷博生物作为国内流式龙头企业,流式平台提供流式细胞仪+淋巴细胞亚群前处理仪+TBNK及精细淋巴细胞亚群+细胞因子检测+血液科流式精准检测应用+感染检测等整体解决方案。配备国内大规模的专业工程师、技术及医学团队支持,24小时服务热线一触即连,多类型学术支持,协助流式项目顺利开展。

旷博生物提供更全面的流式平台解决方案


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