猴痘（mpox）近年来已经从一种相对局限于中西非部分地区的动物源性病毒病，逐渐发展成为重要的公共卫生问题，尤其是在中非和西非的流行地区。对于非洲多国而言，mpox已不再只是输入性或散发性疾病，而是正在形成持续社区传播和跨境传播的现实威胁。在mpox诊断中，皮损拭子PCR一直是首选方法。因为mpox是一种以皮肤或黏膜疱疹、脓疱、结痂为特征的疾病，活动性皮损部位病毒载量通常较高，往往能获得较高检测阳性率。但皮损采样在真实疫情现场并不总是可行。部分患者尚未出现典型皮疹，或者皮损位于生殖器等不易采集或隐私部位，降低患者采样意愿。 近日，乌干达的卫生系统相关机构在杂志Nature Communications上发表了一篇题为“Saliva, urine, and anorectal swabs as viable alternatives to lesion swabs for molecular diagnosis of mpox”的文章。研究团队在乌干达mpox疫情期间，比较了 唾液、肛直肠拭子和尿液相对于皮损拭子的PCR诊断表现。结果显示，唾液PCR阳性率达到81.7%，接近皮损拭子的83.3%，与皮损拭子的诊断等效。肛直肠拭子灵敏度较高，尿液特异性高但漏检风险更大，不适合作为单独诊断样本。这说明，当皮损不可及时，唾液和肛直肠拭子可以显著扩展mpox分子诊断的可及性。
图片来源：Nature Communications 主要内容 研究概述 这项研究是一项横断面配对诊断研究，在乌干达共纳入120名参与者，其中女性63人、男性57人，包括92例PCR确诊病例和28例临床警报病例。每名参与者均采集皮损拭子、肛直肠拭子、尿液和唾液四类样本，总计480份样本。 皮损拭子由医务人员采集，肛直肠拭子可由医务人员采集或受试者在指导下自采，插入肛管约3–4 cm并旋转，唾液通过被动流涎或主动吐入管中采集，尿液则收集于无菌容器。所有样本冷链运输到实验室，48小时内检测。检测方法采用Qiagen QIAamp viral DNA Mini Kit提取核酸，并使用Bioperfectus Monkeypox Virus Fast Real-Time PCR Kit检测MPXV F3L基因区域，Cq≤40判为阳性。
参与者特征与mpox病例状态。图片来源：Nature Communications 不同样本类型的PCR阳性率 病例类别包括92例确诊阳性（76.7%）和28例预警病例（23.3%）。研究首先比较了不同样本类型的PCR阳性率。其中，病灶拭子的PCR阳性率为83.3% （100/120），肛门直肠拭子78.3% （94/120），尿液75.8% （91/120）和唾液81.7% （98/120）。 此结果说明了，唾液的总体阳性率非常接近皮损拭子，而肛直肠拭子和尿液略低。在92例确诊病例中，唾液PCR阳性率达到97%，皮损拭子为98%，这些结果支持了唾液在急性感染阶段具有较高诊断价值。 不同样本阳性时，病毒载量并没有系统性差异 作者进一步分析了不同样本类型的病毒载量是否有差异，以此来评估不同样本类型在低载量阶段的漏检风险。 结果显示，在PCR阳性样本中，不同样本类型的Cq值分布高度重叠。中位Cq值范围从尿液的26.8到唾液的28.3，各样本类型IQR（四分位距）明显重叠。配对Wilcoxon检验未发现皮损拭子与任一替代样本之间存在显著Cq差异。
不同样本类型PCR阳性样本的Cq值分布。图片来源：Nature Communications 不同样本类型拭子的诊断性能 以皮损拭子作为参考标准，作者计算了三类替代样本的诊断性能。唾液样本的灵敏度为0.93，特异性0.75，肛直肠拭子的灵敏度0.89，特异性0.75，尿液的灵敏度0.90，特异性0.95。进一步分析结果显示 ，尿液有10例皮损阳性/尿液阴性，而只有1例皮损阴性/尿液阳性。这说明尿液阳性时很可信，但尿液阴性并不能可靠排除感染，尤其在皮损或黏膜部位仍有病毒脱落时有漏检风险。
不同样本类型拭子的诊断性能。图片来源：Nature Communications 诊断等效性研究 作者进行了诊断等效性检验。等效界值设为±10%，如果替代样本与皮损拭子的PCR阳性比例差异落在这个范围内，就可认为在临床分诊意义上具有可替代性。结果显示，只有唾液样本达到诊断等效标准：差异Δ为−0.017，90%置信区间完全落在±0.10范围内。肛直肠拭子和尿液均未达到等效标准。 根据以上研究结果，作者认为，更灵活的多点采样策略比单一样本更合理。有典型可及皮损时，仍优先采集皮损拭子；当皮损不可及、患者拒绝或需要社区筛查时，可采集唾液；存在肛周、直肠或相关暴露史时，加入肛直肠拭子；而尿液可作为补充，不建议单独用于排除诊断。皮损+唾液 或 皮损+肛直肠拭子的组合策略可最大化灵敏度，适用于非典型表现或资源受限情境。唾液和自采肛直肠拭子可能让筛查进入更广泛人群，从而提高病例发现率。 作者提供了来自乌干达疫情现场的配对诊断证据，证明唾液、肛直肠拭子和尿液 均可检测到MPXV DNA。唾液表现最接近皮损拭子，达到预设诊断等效标准。肛直肠拭子灵敏度高，适合黏膜暴露和肛周症状场景。尿液特异性高但漏检风险较大，不适合作为单独诊断样本。因此，当皮损不可及时，唾液样本值得纳入诊断。其非侵入性、患者友好性和较高检出率，使它在资源有限场景中具有很强的实际价值。 这项研究也有一定的局限性。首先，研究来自单一中心，病例多为中重度或住院患者，替代样本灵敏度可能高于社区早期或轻症病例。其次，缺乏连续采样，无法判断不同样本类型在病程不同阶段的阳性窗口。尿液采样未标准化，可能影响其表现。最后，所有样本使用同一提取流程和同一PCR平台，其他试剂盒和平台下结果仍需验证。总之，这篇文章指出，mpox分子诊断需要更灵活的样本策略。在皮损采样受限或需要扩大筛查时，唾液是目前最有潜力的非侵入性替代样本，肛直肠拭子则适合黏膜暴露场景，而尿液更适合作为辅助而非独立样本。这为未来mpox诊断指南、社区筛查和疫情应急检测提供了重要证据。 注：本文内容仅供行业动态参考，不构成任何投资建议或临床医疗决策依据。 |
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