寡核苷酸偶联试剂盒可高效的生成寡核苷酸偶联抗体，本试剂盒使用的生物偶联试剂含有具有反应活性的末端，可与含有氨基的抗体、蛋白、多肽或氨基修饰的寡核苷酸进行偶联反应。该试剂盒包括阳性对照允许用户确认偶联反应是否正常工作，可用于抗体与 20-120 的单链寡核苷酸或双链寡核苷酸偶联，偶联使用的寡核苷酸应包含氨基修饰的末端。 实验流程 寡核苷酸与抗体的活化与偶联 将寡核苷酸活化剂和抗体活化剂按照说明书要求溶解配置后，分别按照一定比例加入到寡核苷酸和抗体中，孵育。孵育结束后分别使用纯化柱和脱盐柱进行纯化和脱盐，得到功能基团活化标记的寡核苷酸和抗体。进一步将活化的寡核苷酸和抗体按照一定的摩尔比混合孵育过夜，即可得到抗体-寡核苷酸偶联物。
偶联效果验证 通过SDS-PAGE还原性或者是非还原性电泳检测偶联效果。考马斯亮蓝染色显示蛋白条带位置，此外通过溴化乙锭染色寡核苷酸可以更为显著的观察抗体-寡核苷酸是否偶联成功，如下图。偶联剂不同的稀释比例、不同的稀释缓冲液、以及孵育时间等对偶联效果均具有一定的影响，因此，本试剂盒提供活化剂配套的缓冲液、及建议的稀释比例等条件，充分保证您实验的顺利开展。
游离寡核苷酸的去除及偶联产物保存 通过超滤方式去除游离未结合的寡核苷酸。为保证偶联反应中的抗体能够完全与寡核苷酸结合，在偶联反应中会投入过量的寡核苷酸，而在偶联反应结束后，将通过超滤的方式去除未结合的游离寡核苷酸，降低对下游检测实验的干扰，通过超滤方式去除游离寡核苷酸，高效、简便，并且对偶联产物的损失和功能几乎无影响。 寡核苷酸去除效果与超滤次数有相关性，可根据试剂盒说明书的建议进行，首次实验建议进行条件本摸索。本试剂盒提供超滤所需要用到的材料，方便您的使用。
寡核苷酸偶联抗体的长期稳定性取决于多个因素，包括抗体和寡核苷酸本身、保存温度和保存条件。若短期使用建议在超滤缓冲液中-20摄氏度保存，如果长期使用及后续实验不受干扰，可在50%甘油条件下保存。偶联反应剩余的活化寡核苷酸和活化抗体可-20℃保存一个月。 案例分享 本试剂盒的性能已通过多种类型下游检测分析实验进行验证。 案例1： 基于PLA原理设计寡核苷酸序列，寡核苷酸序列与特定抗体对偶联后，通过qPCR检测缓冲液及血清中靶分子的浓度，实现超低浓度蛋白分子的检测，靶分子的浓度与qPCR的Ct值呈负相关。
案例2： 基于PICO原理设计寡核苷酸序列和选择抗体对，检测样本中互作蛋白对的浓度，通过dPCR检测蛋白分子的浓度与阳性液滴数直接的关系，结果相关阳性液滴数与投入靶标呈正相关。
案例3： 基于免疫PCR原理，将RCA模板与引物退火后与二抗偶联，通过RCA扩增时加入荧光探针，实现信号放大，检测细胞中超低浓度蛋白的表达。该方法可根据寡核苷酸序列的不同及样品类型扩展多种应用模式。
杭州乐为生医科技有限公司根据客户需求提供抗体寡核苷酸偶联试剂盒及抗体寡核苷酸偶联技术服务，提供专业的售前技术指导及售后技术支持，为您的科研报价护航。 全国销售联系方式：19957893538 全国技术支持电话：18611591243
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