【冯仁丰】临床检验的互换性评估应该怎么做？1 先说说互换性的问题 ...

为了使开发的参考物质，真正可以让各个检测系统使用了该参考物质校准后，实现这些检测系统对新鲜病人样品检测结果间的可比性。关键是，这样的参考物质是否与检验科检测的新鲜病人样品间，使用两个或以上的常规检测系统检测，它们的检测结果在各个检测系统间均具有满意的一致性。这是该参考物质是否可作为参考物资用于校准各个检测系统的关键。这样的要求，现在被称为互换性。

要求参考物质的互换性，在检验发展中已经说了有40年历史了。

回想起来，美国临床化学杂志专门为互换性写过“互换性是问题”的社论。以后又写了社论“互换性依然是问题”。这两篇著名的社论，都是为了参考物质没有互换性。为了诊断病人急性心肌梗死，现在有了肌钙蛋白手段。但是在过去的很长时间里，各个诊断厂商的肌钙蛋白I（cTnI）产品在临床实验室检测病人肌钙蛋白I上差异很大。美国国家标准和测量研究院（NIST）研究和制备了cTnI的参考物质。在没有进行互换性评估情况下，将该物质SRM 2921推向市场。很快就发现，各个cTnI产品厂商对病人的cTnI检测结果的离散更严重。当时就被指出，这是没有对该参考物质是否与病人样品具有互换性进行严格的评估。为此，AACC专家发表社论“互换性是问题”。

在临床检验中检测各类蛋白一直没有公认的参考物质。经过研究和协商，终于在上世纪的90年代初，美国和欧洲的专家一起推出了著名的CRM 470参考物质，这是非常了不起的成就！当时该物质确定了14种血清蛋白的参考定值。为全世界血清蛋白的一致性，起着重要的作用。可是，第一批该物质即将用完之际，参考物质的制备者，着手制备新一批该参考物质。很快发现，该新的一批参考物质，从收集原料、加工制备、乃至确定定值等，完全与上一批物质一样，但发现了新制备的物质中的铜蓝蛋白

在ERM-DA470k制品中，铜蓝蛋白（CER）未被定值。原因是什么？在候选的参考物质和它们对参考物质互换性中，因在候选参考物质中的铜蓝蛋白存在了非典型异构体导至了阴性影响。在为ERM-DA470k/IFCC确定特性时，相对于ERM-DA470/IFCC校准时,有两组常规方法，它们的结果差异约10%。在这两组常规方法间有着相同大小和方向的差异，在EQAS计划中也观察到该差异。但是，在研究中包括的所有常规方法，均相对于ERM-DA470/IFCC校准的。这个非典型异构体可被两组最佳常规方法检出有显著差异。CRM 470中的铜蓝蛋白看来更多地像天然的血清样品。非典型异构体组分的多少会影响检测结果。在CRM 470中，没有被充分地予以确定特性，导至至少有一组常规方法引入了未被控制的校准偏倚。

为此，CRM 470不适合作为校准品为ERM-DA470k/IFCC定值，在ERM-DA470k/IFCC中，至今未对该蛋白予以确认。正在进行的研究期望解决这个问题。

2013年，还是Miller和Myers两位，在杂志刊登铜蓝蛋白不再列入ERM470可使用的蛋白名录文章时，他们发表了社论：“互换性依然是问题”。

社论指出，互换性是参考物质的性质，参考物质被检测的值，与具有代表性的临床样品被检测的值，在相同被测量的检测程序的2个或更多个之间，具有相同的关系。当某个参考物质将被用于临床实验室检测程序的通用校准品，或将被用于质量评估（能力验证）计划去评价检测程序间检测患者样品结果的一致性时，要求互换性。当参考物质被用于某个体外诊断厂商，作为他们内部溯源性程序的一部分，为他们的产品校准品定值时，也被要求互换性。

本期杂志上，Zegers等报告了新参考物质对铜蓝蛋白互换性的研究和确认，ERM-DA472/IFCC是被制备替代ERM-DA470的。早期的参考物质以血清为基础，是15个蛋白包括铜蓝蛋白的参考物质，没有被确认互换性，但有报告改善了常规临床实验室检测程序间对数种蛋白的一致性。但是ERM-DA470没有使得病人样品中的铜蓝蛋白结果实现一致性（harmonization），因它缺少互换性。

随着检验事业的发展，我们也越来越认识到参考物质必须具有互换性的重要。但是究竟应该怎样进行互换性实验？

在过去的十年里，美国临床和标准研究院（CLSI）于2010年5月完成了“检验医学可互换参考物质的特性和鉴定”的文件编写。文件对如何进行参考物质可靠性评估的实验，通过了详细方案。2018年美国临床化学杂志，发表了Miller等代表IFCC的3篇文章。内容为“IFCC工作组评估互换性建议系列”。第一篇为：互换性评估的通用实验设计；第二篇为：使用参考物质和临床样品间偏移差异的互换性评估；第三篇为：使用参考物质校准有效性的互换性评估。

但是，一直没有看到按照这些互换性评估方案，进行的实验报告。我惊讶地发现，就在2018年8月，在欧盟联合研究中心（JRC）为建立的胰淀粉酶参考物质，使用上述两个互换性实验方案，进行了实验，最后作出参考物质是否具有互换性的结论。为此，我特将这个报告介绍给同道。

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