动物体外诊断技术市场

2、地区趋势

北美在兽医诊断市场占有最大的份额，其次是欧洲。

预计在预测期内，亚太地区将以最高的复合年增长率增长。

3、疾病分类

1）非传染病：

市场上使用创新技术检测动物疾病的诊断技术的数量有所增加，例如，可以分析体液中电解失衡的芯片实验室技术，例如尿液，血液和牛奶。

2）遗传性疾病：

先天性和后天性疾病分布在预测期内有望实现可观的增长。目前，这些疾病非常普遍。遗传病在早期阶段不清晰可见，因此不容易诊断。在这种情况下，建议进行分子筛查。

3）动物传染病：

人的传染病60%来源于动物,50%的动物传染病可以传染给人。动物的传染病是对全世界人类和动物种群及其福祉的重大威胁。流行的动物疾病有布鲁氏菌病，流行性感冒，手足口病，呼吸道和生殖疾病，疱疹和肺结核。

二、诊断技术

免疫学诊断技术在市场中占领主要份额

分子诊断技术将以最快的速度增长，它有助于在24小时内或动物初始检查期间提供结果 分子诊断是用于农场动物和宠物的非常强大的诊断工具，可以保护动物免受传染病（例如流感）的侵害。

PCR被广泛用于动物的分子诊断 以鉴定和检测各种病原体。传统的PCR技术正被实时PCR迅速取代。它可以快速识别病原体并提供更高的准确性。

纳米技术在市场上具有很高的增长潜力 可以在一次测定中筛选多种病原体。这些先进技术可以提高动物疾病诊断能力，同时减少与传统技术相关的时间和成本。由于用于诊断目的的分子诊断领域的增加，分子诊断领域也有望以显著lia速度增长。

当前动物疫病诊断市场，越来越多地使用体外诊断测试和最新技术，例如纳米技术，荧光诊断，生物传感器，可穿戴设备和生物标记物，已帮助该市场增长。研究中心和实验室也显示出对内部诊断工具和技术的需求激增。

PCR、ELISA方法是当前的主流诊断方法：

PCR 和 ELISA 是当前批量检测或病原鉴定中较为通用的病原学和血清学检测方法。这两项技术具有较高的检测敏感性和特异性，对疫病早期诊断、监测及动物产品中 病原检测具有较高的实用价值，也是当前国内外标准中大量采用的标准化方法。

统计发现，OIE手册的111种动物疫病中，只有 4种疫病既无 PCR方法，也无ELISA方法，ELISA和PCR方法的覆盖率高达96.4%

1、胶体金免疫层析技术

将胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合一起的固相标记免疫检测技术，具有简便、省时便捷、采样随意、用量少、结果易于判读等优点。

优点：

检测面广，操作方便，反应快速（5-10 min）

经济实用，安全环保

缺点：

易出现交叉反应，受外界环境影响大

应用：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)

猪乙型脑炎抗体，BVDV，BTb等。

2、聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction，PCR)

又称体外基因扩增技术，它的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成。

常规聚合酶链反应：是根据所设计的引物对样品DNA进行PCR扩增

逆转录聚合酶链反应RT-PCR：对于RNA病毒，需要采用逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription PCR，RT-PCR) 来进行检测。应用 RT-PCR 检测动物病毒的技术已经非常成熟。

多重聚合酶链反应(Multi-PCR)：在同一个反应管中多对特异性引物同时完成多个不同基因扩增PCR反应。张应国等建立了多重 PCR 检测技术能够鉴定禽流感的各种亚型，具有快速、敏感、特异等优点。

套氏聚合酶链式反应(Nest-PCR)：指利用两套PCR引物对进行两轮PCR扩增反应。

实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)：利用荧光信号的变化实时检测 PCR 扩增反应中每一个循环产物量的变化，通过Ct值和标准曲线实现对起始模板定量分析的一种PCR技术。

3、酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）

将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

夹心法：夹心法常用于检测大分子抗原

间接法：间接法常用于检测抗体

竞争法：竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原

4、环介导等温扩增基因诊断技术LAMP

主要是利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域，在具有链置换活性的DNA聚合酶( Bst DNA聚合酶)的催化下，不需要高温变性即可快速、特异、灵敏地扩增靶序列。

优点：

灵敏度高（比传统的PCR方法高2～5个数量级）；

反应时间短（30～60min就能完成反应）；

临床使用不需要特殊的仪器（试剂盒研发阶段推荐用实时浑浊仪）；

操作简单（不论是DNA还是RNA，检测步骤都是需将反应液、酶和模板混合于PCR管中，置于水浴锅或恒温箱中63℃左右保温30～60min，肉眼观察结果）。

缺点：

灵敏度高，一旦开盖容易形成气溶胶污染，加上大多数实验室不能严格分区，假阳性问题比较严重，因此我们强烈推荐在进行试剂盒的研发过程中采用实时浑浊仪，不要把反应后的PCR管打开；

引物设计要求比较高，有些疾病的基因可能不适合LAMP方法。

应用：SARS、禽流感、HIV。

对虾白班综合症病毒(WSSV)，FMDV的RT-LAMP方法，草鱼呼肠孤病毒，禽流感 H5 亚型（对其他 HA 亚型无交叉扩增反应，并灵敏度达常规 RT-PCR 的10倍）

5、纳米技术

纳米生物传感器：利用纳米材料与生物感应元件结合，实现了传感器结构的超微化。纳米传感器具有高灵敏度、高选择性、无标记等多种重要的特征，相比传统方法，具有无可比拟的优越性。利用纳米材料制成极为灵敏的生物和化学传感器，可以对各种高致病性疫病进行早期诊断。

纳米标记物：纳米材料制成的发光物具有光谱范围广，稳定性好的优点。金、银纳米粒子标记物，在加入了荧光染料后，可以更方便的看到特定受体和蛋白发生反应。由于纳米标志物在同一光谱下可以多种荧光，所以可以同时标记多个探针，对样品同时进行多种核酸检测，大大提高了检测的效率。在诊断中，可利用这些感应器去寻找细胞产生的畸形蛋白质。

纳米基因芯片：纳米金微粒 (Gold NanoParticles，GNP) 具有操作简便、肉眼可见、检测设备廉价等特点，正越来越多应用于基因芯片的研究及开发。

微流控芯片技术：随着基于微流控芯片技术的免疫检测、蛋白质组分离、聚合酶链式反应扩增、细胞分选和单细胞分析等研究的不断发展，微流控芯片在疾病诊断方面表现出巨大的应用潜力。

量子点技术：量子点作为一种新兴的量子材料，具有独特的光学特性。将它作为一种新型生物标记试剂，与传统荧光染料相比，因其具有半衰期长、使用单色光源可同时激发多种不同材质及粒径的量子点产生各色荧光，正逐步在生物科学各个领域发挥作用。

6、聚合酶链式反应与分子杂交联用技术

聚合酶链反应与斑点杂交联用：PCR-斑点杂交法是将PCR与核酸探针方法结合起来，先对样品DNA进行PCR扩增，再用探针进行斑点杂交以提高其灵敏度和特异性的一种方法。

聚合酶链反应与原位杂交联用：原位 PCR 是指在细胞或细胞切片上对待测的低拷贝数基因进行扩增，并通过原位杂交进行检测。这种方法不仅能够检测出病原微生物的存在，且能够将其在组织细胞中定位，因而具有其他 PCR 方法所不能比拟的优越性。

7、聚合酶链式反应与免疫学联用技术

聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR-ELISA) ：用 ELISA 法代替常规电泳检测PCR产物的方法。其原理是用地高辛(或生物素)标记PCR产物，在酶标板上加入抗碱性磷酸酶(AP)-DIG 抗体 ( 或酶标记亲和素)进行ELISA 检测。这种方法快速简便，且可以进行定量分析。

免疫聚合酶链反应 (Immune-PCR)：是利用一个对DNA和特异性抗体具有双重结合特性的连接分子，作为标记物的DNA特异性地结合到抗原抗体复合物上，从而形成抗原-抗体-DNA复合物，再以PCR技术对标记DNA进行扩增，根据产物存在与否及量的多少对待测抗原进行定性或定量分析。

三、未来趋势

动物病害是现代动物养殖业飞速发展的最大障碍，而将环介导等温扩增基因诊断技术，免疫层析快速诊断技术，纳米技术以及核酸检测技术应用于动物疫病的检测中，是发展的趋势，因此它有着广阔的发展空间。

近几年来，应用环介导等温扩增基因诊断技术、免疫层析快速诊断技术、纳米技术以及核酸检测技术对动物病原微生物进行检测的方法发展非常迅速，使得检测各种病原微生物更为方便、安全、快捷。

市场根据产品、技术、动物类型、最终用户和地区进行细分。基于该技术，免疫诊断部分有望在2018年占据最大的市场份额。这主要归功于免疫诊断测试的高准确性、兽医从业人员对这些测试的高度偏好以及它在兽医诊断中的广泛应用。