刘博谈准确度｜举例说明定量产品精密度验证

现计划更换HBsAg检测的试剂盒和设备，故对其精密度进行验证。

采用5×5实验设计：5天，每批次重复测量5次，每天单批次检测所有样品。

HBsAg浓度的范围比较大，从0.05 IU/mL到250 IU/mL均有，由于精密度与样品测量浓度有关，当从血液中，测出HBsAg时，就说明该患者可能患有乙肝，而HBsAg浓度降低，则说明该患者的乙肝治疗是有效的。

因此，实验室选择3个浓度样品。收集足够量的临床血清，除了计划的5批次检测，还应多2批次检测的量（如有需要）。

用计划更换的试剂盒和设备检测临界值、中值和高值共3个浓度样品。

为使数据更具代表性，每批次的检测时间可交替安排在早上和下午，每个批次都要检测质控品。

由于PI表上的精密度描述的是进行多次测量系统校准，即使PI要求每个月只校准1次，但实验室在检测每个批次前都应校准。

数据分析之前，每天每批检测完成后，应该观察各样品和质控结果，完成实验后，再次观察。

保证结果没有错误，也没有遗漏结果。

表8是得到的25个原始数据。图3是数据的散点图，显示了批与批之间及各样品每个结果与整个数据之间的一致性分布，初步观察没有离群值。

表 8 HBsAg精密度验证原始数据 （单位：IU/mL）

图3|不同浓度样品按顺序生成的散点图

表9汇总了所有样品数据分析中用到的统计学结果，并用Grubbs法判断各结果是否为离群值。

表 9 HBsAg精密度验证统计分析数据

由于所有结果都在Grubbs低限至高限范围内，所以样品1、2、3数据中没有离群值。

样品精密度的计算结果详见表10。

表 10 HBsAg精密度验证结果和不精密度估计

PI声明：表11是厂家的不精密度数据，本实验中的PI声明数据来自HBsAg检测试剂旧方案的精密度实验检测报告。

表 11 厂家HBsAg不精密度数据

在这个例子中，大多数用户可以直接观察到自己与厂家声明的一致性是通过还是失败的状态，无须再计算多余的UVL。然而，为了举例说明如何应用UVL，下文将提供所有PI声明的UVL。

表12是这个例子的UVL计算。重复性的自由度dfR，根据用户的实验设计，取决于实验实际的批次数量，k = 5，每批次的重复次数，n = 5。

但是，对于实验室内不精密度来说，它的自由度dfWL，不仅仅取决于实验设计还取决于声明的比率

计算得到ρ，从表6得到dfWL。无论使用标准差还是CV表示的这两种类型的精密度，其UVL都是通过乘以相应的UVL的F因子来计算，F因子可从表7获得。

表 12 HBsAg厂家精密度声明的UVL计算

拇指规则的作用：一般来说，UVL至少比相应的精密度声明高30%左右。拇指规则的作用就让接下来严格计算的必要性降到最低。

各样品的评价结果：表13和表14的前5列提供了一个直观的结果，该结果是关于用户如何评价与PI声明和UVL相关的重复性与实验室内不精密度。

表 13 HBsAg精密度重复性的用户样品估计

表 14 HBsAg实验室内不精密度的用户样品估计

该阶段的目标是要判断用户做完实验后，精密度验证是通过还是失败的状态。

本例中估算、声明和UVL都是用CV表示，也可以用标准差表示。

从表10和表11得到平均值，估计值和声明（第2，3，4列）从表12可得到UVL（第5列）。本例中实际上不需要计算UVL，因为通过与声明比较，另外再加上调用拇指规则，可以判断实验是通过还是失败的状态。

样品1、样品2和样品3都明显通过验证，因为它们的重复性估计值比任何一个声明的精密度都要低。

样品1、样品2和样品3都明显通过验证，因为它们的实验室内不精密度估计值比任何一个声明的精密度都要低。

结论：用户的三个样品的重复性和实验室内不精密度的估计值都通过验证，精密度验证实验整体通过。也就是说，用户做实验得到的估计值和厂家PI的声明是一致的。