全网都在问的"单基因阳性"到底啥意思？解读来了

11月1日17点，北京朝阳区接昌平疾控部门通报，2名人员核酸检测结果分别呈阳性和单基因阳性。其中，这个核酸检测呈现单基因阳性的情况引发广泛关注。

如何理解核酸检测单阳性结果，以及怎样才算是确诊病例？听检验君给大家介绍一下。

核酸检测是目前确诊新冠肺炎的“金标准”，但是你肯定看到过这样的新闻：核酸检测了几次甚至十几次才确诊阳性，还有刚开始检测为阳性，复检为阴性的，为什么所谓的“金标准”还那么不靠谱？

所谓“金标准”是指当前医学界公认的诊断疾病的最可靠方法，可以正确的区分“感染”或“未感染”。但不是100%，其结果也会受到各种主观和客观因素的影响，比如标本采样质量差、标本保存运输或处理不当、病毒载量低等。

早在疫情暴发之初，中国科学家就已经通过测序向全世界公布了新冠病毒的完整的基因组序列。

新冠病毒基因组结构

目前我国新冠病毒检测采用最多的是实时荧光定量PCR法，根据最新的《新冠病毒样本采样和检测技术指南 》，RT-PCR方法检测新冠病毒核酸，主要针对新型冠状病毒基因组中开放读码框1ab（ORF1ab ) 和核壳蛋白 （N）。N 基因和ORF1ab基因都是特异性基因，不会跟其他病原体重叠。

由于两个基因的基因序列特点，N基因的灵敏度比ORF1ab基因高，但是特异性不如ORF1ab基因。

虽然大多数情况下ORF1ab和N基因会检出同时阳性或同时阴性，但也会出现ORF1ab或N基因其中一个阳性，称为单阳性。

根据最新的《新冠病毒样本采样和检测技术指南 》，实验室确认阳性病例需满足以下两个条件中的一个：  

1：同一份标本中新冠病毒2个靶标（ORF1ab、N）实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性。如果出现单个靶标阳性的检测结果，则需要重新采样，重新检测。

2：两种标本实时荧光RT-PCR同时出现单靶标阳性，或同种类型标本2次采样检测中均出现单个靶标阳性的检测结果，可判定为阳性。

也就是说北京的单阳性案例大概率是受限于仅采集了单一的标本，因此实验室不能完全确诊，但也不能完全排除，仍然需要再次取样进行实时荧光RT-PCR检测来判断是否为阳性病例。这其实也是为什么现在都提倡双采、双检的原因。

近期这波疫情，一些人需要做核酸检测，当被告知结果可疑时，自己应该怎么做？

首先，按照通知，等待工作人员进行复检，配合重新采样；

其次，在等待复检及复检结果期间应按照相关防控要求，配合隔离管控，直致上级部门复检结果反馈阴性方可解除隔离；千万不要擅自乱跑，也不要接触家人朋友，以免造成疫情传播。

关于造成实验室检测单基因阳性的原因，以下为德安实验诊断微信公众号 郭小兵老师总结的6点：

1）非磁珠法提取核酸模板，核酸纯度不够，体系中成分对扩增反应有干扰，导至ORF1ab或N基因扩增异常，结果为单基因阳性。

2）磁珠法提取核酸模板，提取过程磁珠有残留，体系中成分对扩增反应有干扰，导至ORF1ab或N基因扩增异常，结果为单基因阳性。

3）扩增晚期酶活性改变引起其它核酸位点非特异性扩增而导至结果单基因阳性。

4）ORF1ab或N基因序列中扩增位点发生突变，造成扩增阴性，整个实验结果为单基因阳性。

5）核酸模板提取过程中条件剧烈，导至ORF1ab或N基因序列断裂损坏，造成扩增阴性，整个实验结果为单基因阳性。

6）因ORF1ab、N基因扩增效率不同，扩增产物中基因载量不同，故发生扩增产物痕量污染时，原始载量高的，可能出现阳性结果，反之，则为阴性结果。整结果为单基因阳性。