【冯仁丰】学习EP05-A3体会 7 如何进行再现性精密度的评估

3个实验室（地点）共同进行相同精密度实验的方差分析

在EP05-A3文件中，为了适应大型医院或大型实验室，在3个地点使用了相同的检测系统、相同的试剂和校准品、开展相同的分析物检测。精密度实验方案估计的是这样规模实验室的再现性精密度水平。

在上述示例的情况下，扩展到3个实验室一起的精密度估计方案。这就是EP05-A3的3×5×5的模式。其实，在每个实验室，都进行相同的精密度实验。这样，所有的实验数据就有了3×5×5的75个数据。但是还须分为批内、批间、和实验室间的变异。

数据的分析

如上述，每个实验室进行了5天实验。每天检测样品1批，重复检测5次。5天有25个检测结果。3个实验室的15批内数据共有75个数据（每批检测5次）。为计算每批的批内变异，每批各取一个均值，共15个均值。所有批内数据的自由度为15 ×（5-1）=60。

3个实验室各有5批数据。每个实验室对5批数据均值求一个总均值。各批均值对于各总均值的离散，即为批间差异。因此，总的批间结果自由度为3 ×（5-1）=12。

3个实验室各有自己的总批间均值。3个总均值再算一个3个实验室的总均值。它与各实验室总均值间的离散为3个实验室的总离散程度。所有实验室间变异的自由度为3-1 =2。

设实验室个数为g。不同实验室内连续5天每一批检测结果相对于该批均值的离均差平方和相加后；再合并为3个实验室批内离均差平方和（SS_批内）；其均方差MS_批内计算如下：

不同实验室连续5天每一批检测结果相对于该批均值的离均差平方和合并后；3个实验室批内离均差平方和（SS_批内）为：

3个实验室批内离均差平方和的均方差为：

3个实验室批间（天间）离均差平方和：

3个实验室每天检测1批，每批间的差异估计，可以在每个实验室将每批检测结果的所有均值，求每个实验室的天间或批间总均值为：

然后求该实验室天间总均值与该实验室各天均值间的离均差平方和（SS_{天间（地点）}）。将3个实验室的天间离均差平方和相加，成为3个实验室的总天间离均差平方和。

以及批间均方差（MS_{天间（地点）}）：

三个实验室的总均值与总均值的差异：

求3个实验室各自总均值，与3个实验室所有检测结果的总均值间的离均差平方和：

三个地点的方差（离均差平方和）总结在一起，如下表：

使用上述得到的各个离均差平方和（方差），要求出各个类型的精密度标准差。

ANOVA（方差，即离均差平方和）常规提供有关模式的方差组分V_地点、V_天间、和V_{误差（批内）}。可以从上述ANOVA表值按下计算：V_误差 = MS_{误差（批内）}；（以V表示了方差的组分。）

（注：n批内即每批重复次数5。n天为5）

各个精密度的标准差：

该医院实验室的再现性标准差（以往被称为总不精密度，s_REP）：

（注：这里的s_REP，这个右下标是英语REPRODUCIBILITY，再现性。是目前在精密度估计上可客观地放映某个医院的整个水平的不精密度。这里，即三个实验室再现性标准差。）

我的学习体会

无论是EP05-A2文件，还是EP05-A3文件，它们在实验设计模式上不同；但是，都是重复性实验的设计。都希望在一个实验设计模式中，可分出实验室需要了解的批内、批间、天间、以及实验室内、更新的实验室再现性精密度状态。

40年前的人们在考虑一个精密度实验设计时，限于当时的水平，能够制定出EP05-P文件，非常了不起！这个文件在EP05-P、-A、-A2多个版本中，依然沿袭了一样的实验设计。充分说明EP05-A2版本的价值！

2014年前夕，2013年美国在休斯顿的AACC年会上，Durham做了精密度实验的功效报告。不要忘记，在AACC会议上进行大会报告的内容，说明得到了广大美国和国际临床实验室的专家和有识人士的关注！这个报告内容的深度和涉及面之广，也在告诉我们，现有的EP文件需要更新和改写！因为临床实验室在发展和进步！因此，出现EP05-A3文件是一个必然！我们的水平与美国有相当大的差距，因此需要认真学习和认识。

今天，我从不懂不理解“方差”，开始懂了一些。希望我的学习体会逐渐被我们国内临床实验室同道理解。这是我今天的本意。我知道我的这个内容对你们也是一个挑战！我们要认真学习！只有互相交流，才能使大家提高！

我需要继续努力。我已经不在第一线工作，没有现实给我更大的压力，非要我使用方差解决具体实验的数据计算和解释。上面讲的都只是纸上谈兵。期望得到大家更多的帮助！恳切得到大家的批评帮助！谢谢！