结核分枝杆菌耐药基因突变检测技术介绍

耐多药结核病（MDR-TB）和广泛耐药结核病（XDR-TB）是目前临床亟待解决的难题之一。因此，快速、准确地检测标本中耐药结核分枝杆菌（MTB）至关重要。采用多色探针熔解曲线法可快速检测MTB对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮类药品常见耐药决定区域，简便、快速，闭管检测，不会交叉污染或造成实验室污染，只需1台通用的荧光定量PCR仪，无需繁琐的杂交、显色过程，整个检测过程只需2～3 h，可较全面地了解耐药基因突变信息（《中国防痨杂志》编辑委员会, 中国医疗保健国际交流促进会结核病防治分会基础学组和临床学组. 结核分枝杆菌耐药性检测专家共识. 中国防痨杂志, 2019, 41(2): 129-137）。

多色探针熔解曲线法快速检测MTB耐药基因突变情况在临床上得到广泛应用，适用于多种临床样本。

临床分离株：荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素和氟喹诺酮类药品的耐药性具有良好的效能，可为临床医生制定用药方案提供重要依据（曹志华, 赵悦竹, 胡双双. 荧光PCR探针熔解曲线技术检测结核分枝杆菌对五种抗结核药物耐药性的研究. 中国防痨杂志, 2019, 41(2):156-161）。

痰标本：以MGIT 960药敏试验结果为参照，对2057份涂片阳性痰标本进行研究，多色熔解曲线法检测显示出对MDR-TB和XDR-TB的良好检测性能，敏感度分别为86.7%和71.4%（Pang Y, Dong H, Tan Y, et al. Rapid diagnosis of MDR and XDR tuberculosis with the MeltPro TB assay in China. Sci Rep, 2016, 6:25330）。

脓液标本（骨结核）：166例疑似骨结核患者的脓液标本，以临床综合诊断为参照标准，荧光PCR熔解曲线法的检测敏感度高于MGIT 960培养法（孙秀华,李莹,孙娇,等. 不同检测方法在骨结核诊断中的应用效果比较.中国民康医学,2020,32(2):90-92）。

组织标本：多色熔解曲线分析技术能够应用于组织标本中的MTB检测，有较高的敏感度，且能够筛查更多的耐药项目，对于临床有更大的应用价值（Che NY, Huang SJ, MA Y, et al. Comparison of Histological, Microbiological, and Molecular Methods in Diagnosis of Patients with TBLN Having Different Anti-TB Treatment Background. Biomedical and Environmental Sciences, 2017, 30(6): 418-425）。

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