体外诊断产品立项与研发的过程管理之二：产品的设计开发（三）

      技术路线是对要达到研究目标准备采取的技术手段、具体步骤及解决关键性问题的方法等在内的研究途径。技术路线在叙述研究过程的基础上，采用流程图的方法来说明，具有一目了然的效果。技术路线强调以研发项目为主线，完成项目研究内容的流程、顺序及各项研究内容间的内在联系和步骤。合理的技术路线可保证顺利实现既定目标。技术路线是进行研究的具体操作步骤，应尽可能详尽，每一步骤的关键点要阐述清楚并具有可操作性。

     化学发光免疫分析系统按照分离技术可分为磁珠分离和塑料孔板两种;按的核心发光方法可分为酶促发光、化学发光和电化学发光三种。

      酶促发光免疫分析：是以化学发光剂作为酶反应底物的酶标记免疫测定。经过酶和发光两级放大，具有很高的灵敏度。以过氧化物酶为标记酶，以鲁米诺为发光底物，并加入发光增强剂以提高敏感度和发光稳定性。应用的标记酶也可以为碱性磷酸酶，发光底物为磷酸酯，固相载体为磁性微粒。

      化学发光免疫分析：是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。吖啶脂是较为理想的发光底物，在碱性环境中即可被过氧化氢氧化而发光。鲁米诺类和吖啶脂类发光剂等均是常用的标记发光剂。

      电化学发光免疫分析：是一种在电极表面由电化学引发的特异性发光反应，包括电化学和化学发光两个部分。分析中应用的标记物为电化学发光的底物三联吡啶钌或其衍生物N-羟基琥珀酰胺酯，可通过化学反应与抗体或不同化学结构的抗原分子结合，制成标记的抗体或抗原。

      根据以上分类情况，在研发初期，不同企业可根据实际情况选择不同的技术路线。

      以目前临床普遍使用的血清、血浆作为检测标本，以目前临床常用的荧光PCR仪为主要适用机型，以临床长期使用、性能优良的同类产品作为对照试剂，通过设计引物探针，建立内外对照，实施防污染措施，开发出比市面主流产品更加优良的高灵敏、高特异性诊断试剂盒。研发流程如下：

*  核酸提取试剂的开发：开发出适合提取HBV核酸的磁珠法提取试剂。

*  引物探针的设计：根据美国国家生物技术信息中心（NCBI）网站GenBank数据库中已有的HBV基因序列，应用SegMan等软件分析比对序列，找出各基因型都保守的区段，应用Primer Express，Primer5.0等软件辅助设计覆盖所有基因亚型的HBV特异性引物探针。

*   内对照（内标）的设计：根据目标序列设计合适的内标，在保证内标监测作用的同时不影响HBV目标基因的扩增。

     产品技术要求及指标制定直接影响产品的安全性和有效性，是整个产业发展的核心问题。因此，要使整个行业健康、稳定有序地向前发展，就必须适应市场需求，加强产品质量管理，从战略层面关注产品技术要求，制定产品指标。进一步加快产品技术指标标准化进程，使整个行业走上标准化规范的道路，赶上世界先进水平，为发展我国医疗保健事业做出贡献。

     在起草、制定产品技术要求时，要以市场为导向，以用户需要为主导，把握同类产品发展的动向，结合产品技术要求制定的前期市场调查与法规标准收集工作，来确定产品功能和技术要求。技术要求要客观地反映产品的特点，直接表达用户、消费者对产品性能的需求。

     产品技术要求的制定过程应尽量与产品的设计研发过程结合在一起，在产品研发设计过程中，需要同时或提前开始产品技术要求制定的工作。对相应的国内外相关技术资料进行收集，对市场需求进行分析，对现行的国际标准、国家标准法规进行整理，为产品技术要求制定做好初步准备，并以此作为产品设计的指导内容。

     医疗器械产品技术要求的依据主要来源于以下几个方面：

*  产品设计研发过程中确定的技术参数和功能。

*  相应的法规、国际标准、国家标准及行业标准中适用的内容。

*  强制性安全标准中适用的要求。

*  行业共识、团体标准或已上市同类产品的技术要求等文件中的部分适用内容。

     产品的技术参数与性能部分技术指标的确定应该与产品的研发过程结合在一起，依据市场的导向及定位，依据研发过程中的技术与科研水平来制定，确实做到科学合理，不能片面追求高指标，否则会加大生产成本，降低企业所得利润。

     产品技术要求是企业科技创新的结晶，技术要求的性能指标必须以大量的成熟实验技术、生产实践经验、检测手段和大量的调查研究数据为基础和依据。各项指标的确立应源于长期、全面、准确的检测数据和科学的检测方法，以及对产品技术发展方向的准确预测。科学合理的技术指标才能使标准符合市场需要及产生利润最大化。

     鉴于体外诊断试剂在产品管理类别、检测原理等方面的不同，对于定性产品的性能指标应包括但不限于：测量正确度、检出限、阴性符合率和阳性符合率精密度、稳定性等指标;定量产品的性能指标应包括但不限于：测量精密度、检出限、线性、干扰、分析特异性和稳定性等指标。体外诊断仪器性能指标应包括但不限于：温度的稳定性和均匀性、吸光度的稳定性和重复性、携带污染率、加样的准确性和重复性、检验项目的精密度等。

     另外，还要包括环境试验、电气安全性和电磁兼容性等指标。

     具体的体外诊断试剂和仪器产品的性能指标参见后文内容。

     请参阅2014年公布的《医疗器械说明书和标签管理规定》（国家食品药品监督管理总局令第6号）编制产品的说明书和标签。

     医疗器械说明书是指由医疗器械注册者或者备案者制作，随产品提供给用户，涵盖该产品安全有效的基本信息，用以指导正确安装、调试、操作、使用、维护和保养的技术文件。

     医疗器械标签是指在医疗器械或者其包装上附有的用于识别产品特征和标明安全警示等信息的文字说明及图形、符号。

     体外诊断产品应按照《医疗器械说明书和标签管理规定》严格执行。在管理规定中第十条规定医疗器械说明书应当包括生产日期、使用期限或者失效日期。

     请参阅《医疗器械生产企业供应商审核指南》（国家食品药品监督管理总局2015年第1号通告）执行。

     医疗器械生产企业应当按照《医疗器械生产质量管理规范》的要求，建立供应商审核制度，对供应商进行审核和评价，确保所采购物品满足其产品生产的质量要求。

     不同的体外诊断试剂，其原材料不一样，可参照下文考虑相关的原材料。

*  核酸类检测试剂（包括核酸扩增试剂、测序试剂、PCR杂交试剂、荧光原位杂交试剂等）主要原材料包括引物、探针、各种酶及脱氧三磷酸核苷（dNTP）。

*  免疫类检测试剂（包括酶联免疫吸附法、化学发光法、时间分辨荧光法、胶体金法等所用的检测试剂）主要原材料包括各种天然抗原、重组抗原、单（多）克隆抗体及多肽类生物原料、标记用酶、固相载体（酶标板、微孔板、磁珠）、硝酸纤维素膜等。

*  抗体类检测试剂（如流式细胞仪配套用检测试剂、免疫组化类试剂、血型正定型类试剂等）主要原材料包括抗体、标记荧光素、酶标记的第二抗体、缓冲液等。

*  血型及组织配型相关检测试剂（包括血型反定型试剂、不规则抗体筛存试剂、凝聚肢试剂等）主要原材料包括红细胞、抗体、凝胶、玻璃珠、缓冲液等。

*  检测血清、检测菌液类试剂主要原材料包括菌种、动物、培养基。菌种应有明确的来源和菌种号。