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简简单单“采血管”

2024-3-29 12:28| 编辑: 小桔灯网| 查看: 437| 评论: 0|来源: 分子庄园

摘要: 一般内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,利用的是血液自然凝固的原理,待血清析出后即可离心检测。2、促凝管快速血清管,橘红色头盖,采血管内添加了能激活纤维蛋白酶的促凝剂,可使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多 ...

一般内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,利用的是血液自然凝固的原理,待血清析出后即可离心检测。

 

2、促凝管


快速血清管,橘红色头盖,采血管内添加了能激活纤维蛋白酶的促凝剂,可使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块。

一般采血后静置5min血液即凝固,适用于急诊血清系列化试验。


3、惰性分离胶促凝管


金黄色头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂,此种分离胶在离心后可将血液中液体成分(血清)和固体成分(血细胞)彻底分离并完全积聚在试管中央形成屏障,并且48h内保持稳定。


采血后要立即颠倒混匀,静置30min后离心,因其价格偏贵,常用于甲状腺功能、肿瘤标志物、PCR及激素水平检测。


4、肝素抗凝管


绿色头盖,采血管内添加有肝素,肝素能阻止凝血酶的形成及血小板的聚集。适用于红细胞脆性试验,血气分析,红细胞压积试验,血沉及普能生化测定,不适于做血凝试验。

当检测标本中的钠离子时不能使用肝素钠管,肝素会引起白细胞聚集,也不能用于白细胞计数,同时因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。


肝素是含有大量硫酸基团的粘多糖硫酸酯,带有有强大负电荷,能中和DNA聚合酶中的辅助因子Mg²⁺,不适用于分子检测。


5、惰性分离胶肝素管


浅绿色头盖,在惰性分离胶管内加入肝素锂抗凝剂,可达到快速分离血浆的目的,是电解质检测的最佳选择,也可用于常规血浆生化测定和 ICU 等急诊血浆生化检测。

血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持48小时稳定。


6、EDTA抗凝管


紫色头盖,乙二胺四乙酸及其盐是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液标本中钙离子,将钙从反应位点移去,阻滞和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液标本凝固。

适用于一般血液学检验,不适用于凝血试验及血小板功能检查,亦不适用于钙离子,钾离子,钠离子,铁离子,碱性磷酸酶,肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。


​EDTA有二钠、二钾和三钾盐,因EDTA二钾盐比二钠盐溶解度大,与血液混合后溶解更快。


7、枸橼酸钠凝血试验管


蓝色头盖,枸橼酸钠主要通过与血样中钙离子螯合而起抗凝作用,适用于凝血实验。

抗凝剂与血比例为1:9,要保证足够准确的采血量,才能确保检验结果的可靠性,同时采血后要立即颠倒混匀以免凝固。


8、枸橼酸钠血沉试验管


黑色头盖,血沉试验要求的枸橼酸钠浓度是3.2%(相当于0.109mol/L),抗凝剂与血液的比例为 1:4。

与凝血实验类似,要保证准确的采血量,采血后立即颠倒混匀以免凝固。


9、草酸钾/氟化钠血糖管


灰色头盖,氟化钠是一种弱效抗凝剂,一般常同草酸钾或乙碘酸钠合并使用,其比例为氟化钠1份,草酸钾3份,此混合物4mg可使1ml血液在23天内不凝固和抑制糖分解,是血糖测定的优良保存剂。

不能用于尿素酶法测定尿素,也不能用于碱性磷酸酶和淀粉酶的测定。


10、血铅检测管


黄褐色盖,含肝素(玻璃管)或EDTA·K2(塑料管)添加剂,适用于铅测定,经认证试管含铅量小于0.01μg/ml。采血后试管需颠倒混匀8次。


11、Streck管


主要用于液体活检项目的样本保存,跟一般EDTA管相比,Streck管里面有细胞稳定剂,能防止细胞裂解,释放降解循环游离DNA的酶。

采血后血浆分离之前的6h内, EDTA采血管和Streck cell-Free DNA管的ctDNA保存性能没有区别,48h后Streck采血管的保存性能更佳。


12、白色头盖采血管


含EDTA-K2和凝胶添加剂。

主要用于分子生物学方面的诊断,如乙肝、丙肝和HIV等的核酸检测筛查。


13、粉红色头盖采血管


含喷涂EDTA-K2添加剂,适用于全血细胞测定和免疫血液试验(ABO血型、Rh血型和抗体筛选)。

采血后试管需颠倒混匀8次。


二、抗凝剂


1、抗凝剂作用原理


凝血反应是通过凝血酶将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,从此形成纤维蛋白凝块,其中凝血酶是由凝血酶原在凝血因子和钙离子的作用下裂解产生,而螯合剂型抗凝剂通过与钙离子结合阻断凝血,肝素的作用机制较为复杂,其主要通过抑制凝血酶原转化为凝血酶达到抗凝作用。

2、乙二胺四乙酸(EDTA)


EDTA可以与任何形式的钙离子螯合来防止血液凝固起到抗凝作用。

钠盐和钾盐都是常用的不同形式,但是钾盐在血液中的溶解性更好而使用的更多,另外EDTA-K3在常温条件下的物理形态是液态,而EDTA-K2的特点是可以通过喷雾干燥法使其附着在采血管的内表面,因此不会对采集的血液样品产生稀释,因此二钾盐的形式在实际应用中更为广泛。相比肝素钠采血管,EDTA作为抗凝剂采集的血样在冻融后产生的凝块更少,全血中抗凝时效更长,这更有利于对于后续试验操作。

3、肝素

肝素是一种高硫酸糖胺聚糖,其主要由很多可被硫酸化的双糖基团组成,作为抗凝剂最常使用的盐是锂,钠,钾盐。

肝素能抑制凝血酶原转化为凝血酶,抑制纤维蛋白原纤维化,还有稳定血小板的作用。

肝素主要从猪牛羊等动物组织中分离得到,相比其他抗凝剂的成本更高;肝素只能起到延缓凝血过程而不能阻止凝血,在实际试验使用中发现,使用肝素钠作为抗凝剂的全血在常温10-12小时会逐渐出现凝血结块的现象。

4、草酸盐类

常用的主要有铵,锂,钾,钠等草酸盐形式,通常情况下草酸铵和草酸钾会以3:2比例混合使用,也被称为保罗海勒双草酸盐。

其作用机制是和钙离子结合形成不溶性的草酸钙从而起到抑制凝血的作用。


草酸盐作为抗凝剂会出现红细胞脱水(草酸钾)和膨胀(草酸铵)的缺点,相比肝素在全血样品中,会降低红细胞压积,造成血浆稀释效应,因此在测定样品的浓度时会出现误差,常使用保罗海勒双草酸盐的形式来减少红细胞变形对血浆浓度的影响。


草酸作为一种较强的有机酸,其盐形式会改变血浆的PH,这对于一些对于PH敏感的药物可能会造成稳定性问题,但是草酸盐对磷酸酶有抑制作用,可以降低磷酸基团的降解,有助于稳定对于磷酸酶敏感的药物。


5、柠檬酸盐类


通常使用的是3.2%或3.8%的柠檬酸钠二水化合物,主要通过螯合血液中的钙离子形成柠檬酸钙而起到抗凝的作用。

​柠檬酸盐在全血中可以起到缓冲剂作用,可能会改变全血的PH,对于PH敏感的药物要注意其稳定性。

相比草酸盐类具有更严重的红细胞萎缩现象,导至血浆被稀释,检测的药物浓度低于真实值。因此在使用3.2%或3.8%的柠檬酸钠的过程中,必须与全血严格按照比例混合,以免出现稀释效应。


6、氟化物类


氟化物是一种抗凝能力较弱的抗凝剂,主要使用的是氟化钠,通过结合钙离子形成氟化钙而起到抗凝的作用。

氟化钠具有强大的酶抑制作用,可以有效抑制磷酸酯酶和乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的活性,常被作为一种有效的稳定剂去使用,随着PH越低,抑制效果越好,在实际使用中,通常会结合草酸钾混合使用(氟化钠-草酸钾),这个组合可以确保有效的抗凝作用的同时,起到抑制更多酶的作用。


由于氟化钠的溶解性较差,通常会使用2%的氟化钠溶液添加进全血,这与柠檬酸钠一样,在使用时需严格按比例添加并考虑可能存在的稀释效应。

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