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20重!这种微流控芯片可以一次检测超多重靶标

2023-6-1 16:39| 编辑: mango524| 查看: 819| 评论: 0|来源: IVD从业者网

摘要: 本文提出一款一体化式离心微系统,可对 1 mL 样品进行 20 重疾病检测。芯片由两个单元组成:一个 3D 打印的溶液加载盒和一个离心芯片。


本文提出一款一体化式离心微系统,可对 1 mL 样品进行 20 重疾病检测。芯片由两个单元组成:一个 3D 打印的溶液加载盒和一个离心芯片。

超多重 PCR 检测见 30min实现30重扩增的甜甜圈PCR(附视频)

样品进到结果出可在 1 h 内完成,其检测下限为  

图 1

如图 2 所示,直径 130 mm 的芯片集成两个样本单元。每个单元由固相 DNA 提取部分和多重 LAMP 检测部分组成。

四个注液腔(用于样品溶液、洗涤溶液、洗脱溶液和 LAMP 混合物)与 3D 打印的样品装载盒相连。

图案层在厚 3 mm 的 PMMA 上采用铣床雕刻而成。

图 2

用于核酸提取的珠床通道与注样孔相连。一个延迟腔放置在洗涤腔后,以使得样品液先加载,然后是洗涤液。废液腔中含有吸水垫用于吸收 1ml 样品和洗涤液。

芯片实物如图 3 所示。

图 3

对于将溶液自动加载到设备中,3D 打印制造的墨盒有样品溶液、洗涤溶液、洗脱溶液和 LAMP 鸡尾酒的空间。

由 3D 打印而成的样品装载盒包含 样品腔、洗涤腔、洗脱腔和 LAMP 试剂腔。其中,用于大体积样品溶液 1 ml, 洗液 50 ul, 洗脱液 50 ul, LAMP 试剂 50 ul。

图 4 样品盒顶视图

样品盒尺寸 长 3.0 cm宽 2.6 cm, 高 1.7 cm。腔室设计中毛细力大于重力以防止溶液渗出。

图 5 样品盒底视图

因洗液(70% 乙醇)的润湿性非常高,使得洗液在转速运行之前会从腔室内泄漏。

因此,如图 6 所示,洗涤腔设计为一种特定的双腔结构。洗涤液最初停留在上腔室中,然后轻轻移动到下腔室以减少向下的压力。

图 6

样品盒与芯片匹配如图 7 所示。

图 7

如图 8 所示,对于紫外线可见吸光度检测,采用黄色的 570nm 和红色的 650nm LED,并通过光纤定位到 LAMP 反应腔。

采用滤光片和非球面透镜分别消除激发光的干扰和减少光学像差。

图 8

片上流体流动如图 9 所。

图 9

图 9 所示对应的流体按序流动旋转协议如图 10 所示。

图 10


参考文献
Point-of-care genetic analysis for multiplex pathogenic bacteria on a fully integrated centrifugal microdevice with a large-volume sample. 
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