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干货贴:多重PCR六大技术概览和趋势汇总!

2021-8-18 00:00| 编辑: 归去来兮| 查看: 5143| 评论: 0|来源: IVD学习笔记

摘要: 多重 PCR (Multiplex polymerase chain reaction,MPCR) 是指通过一次 PCR 反应同时对多个靶标进行扩增,结合一定的检测手段对扩增产物进行检测从而实现对多个靶标进行诊断的技术。MPCR 具有高效率、高通量、低成本 ...

多重 PCR (Multiplex polymerase chain reaction,MPCR) 是指通过一次 PCR 反应同时对多个靶标进行扩增,结合一定的检测手段对扩增产物进行检测从而实现对多个靶标进行诊断的技术。MPCR 具有高效率、高通量、低成本的特性而被深入研究。

目前 MPCR 技术已被广泛应用于科学研究和疾病诊断等领域,文中从 MPCR 扩增与检测两方面概述了 MPCR 技术发展及其应用,讨论了 MPCR 技术的优点及存在的问题,并且提出将反应体系分隔成小液滴或结合管式对流 PCR (Capillary convective PCR,CCPCR) 技术的方式有望提高固相载体表面的扩增效率,从而开发出扩增效率高、一致性好、体系稳定、检测重数高的多重 PCR 技术。

传统的多重 PCR (Multiplex polymerase chainreaction,MPCR)是在普通 PCR 的基础上,在同一个反应体系中加入不同的引物对,针对不同的模板或同一模板的不同区域进行特异性的扩增,从而得到多个目的片段,结合一定的检测手段进而实现同时对多个靶标进行诊断的技术。自Chamberlain [1] 于 1988 年首次提出这个概念以来,MPCR 已经应用于许多领域,包括基因突变与缺失、基因分型与定量、遗传检测、伴药诊断等 [2-6] 。MPCR 所涵盖的范围广,能够同时对多个靶标进行检测,大幅提升检测效率的同时,还降低了检测成本。

随着科学技术的发展,MPCR 技术在扩增和检测方面已经取得了许多新的突破。在扩增方面,不再局限于在同一反应管中进行扩增,而是将不同的引物对和模板分散于相对独立的空间中进行扩增;在检测方面,不断有新的超多重检测技术的出现。文中从 MPCR 扩增与检测两方面概述了 MPCR 技术的发展及其应用,对影响 MPCR 扩增与检测效果的因素进行了总结,并对提高固相载体表面的扩增效率提出针对性策略。



01


多重荧光定量 PCR 技术


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