7月20日,农业农村部官网消息,2021年以来,中国一共报告发生非洲猪瘟疫情11起,涉及8个省份,扑杀生猪2216头。非洲猪瘟疫情虽总体平稳,但防控形势依然复杂。 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染家猪或野猪引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,其发病率和死亡率可达100%。2018年8月,中国确诊首例非洲猪瘟,到今年8月份,非洲猪瘟进入中国就已经整三年。 当前非瘟病毒已经在中国定殖,病毒非常顽固,污染面比较广,所有的省份都发生过疫情。且最近出现了毒力变弱的新毒株,新毒株虽表现的病症轻,但是潜伏期长,短期发现也较为困难。非洲猪瘟防控形势依然复杂,任务依然艰巨! 目前非洲猪瘟没有疫苗和有效的治疗手段,主要通过实验室诊断方法对非洲猪瘟进行监控和控制。 实验室检测技术中,qPCR法是OIE推荐使用的非洲猪瘟常规诊断的重要工具,也是中国在现阶段非洲猪瘟流行情况下首选的检测技术。 翌圣精品,六大优势助力非洲猪瘟常规化诊断 翌圣生物作为深耕于上游生命科学领域酶制剂的供应商,长期为IVD公司提供高品质、高性价比的原料酶(含可冻干原料),积极应对非洲猪瘟疫情,配合客户一起开发出非洲猪瘟病毒检测解决方案。 Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211) 特异性强、灵敏度高、操作简便、兼容多重qPCR,能快速准确的检测出非洲猪瘟病毒。 3 copies/反应稳定检出,高灵敏度助力精准“拔牙” 使用ASFV引物探针,对ASFV单质粒 (终体系3 copies) 进行20个复孔的检测,比较各个品牌试剂的检出率,可以看到Yeasen产品的检出率更高。 图1. 各品牌试剂检出率测试 表1.各品牌试剂检出率统计结果 超强热稳定性 非洲猪瘟ASFV/ACT双质粒体系,在4℃、25℃和37℃下分别放置7天后,Ct值和荧光值不变化,性能稳定。 图2. 稳定性测试 重复性好,CV<1% 选取Yeasen 探针法qPCR Mix 4个不同批次做20次重复试验,对非洲猪瘟ASFV/ACT双质粒体系进行扩增,发现Ct值无明显差异,CV均小于1%。 图3. 重复性测试 50次冻融稳定 将Yeasen 探针法qPCR Mix反复冻融50次后,对非洲猪瘟ASFV/ACT双质粒样本进行扩增,发现Ct值和荧光值不变化,性能稳定。 图4. 50次冻融测试 血液杂质耐受性强 分别检测Yeasen 探针法qPCR Mix及各品牌qPCR试剂对血液样本中抑制物的耐受性,结果发现,对于EDTA、柠檬酸钠,Yeasen 探针法qPCR Mix显示有很高的耐受性,且可以耐0.5%的全血。 图5. 不同杂质及0.5%全血下各公司产品扩增曲线 多平台适用 分别使用Yeasen 探针法qPCR Mix在Bio-Rad CFX96、ABI Q5及Slan平台上对非洲猪瘟ASFV/ACT双质粒进行扩增,可以看到Yeasen qPCR Mix适配各种机型的仪器,且数据可靠稳定。 (a) Bio-Rad CFX96 Real-Time PCR System (b) ABI Q5 Real-Time PCR System (c) Slan Real-Time PCR System 图6 不同机型下的qPCR结果 翌圣探针法qPCR mix如此优秀,与其严格的质量管理密不可分。通常来说,品质优良的IVD试剂,需要在原料控制、生产管理、质检管控和仓储运输等几个环节严格把控,层层把关。 原料控制 原料是产品的源头,翌圣有着严格的原料质量管理标准,包括采购标准和保存标准,并且每批原料都会自检并留样保存。翌圣探针法qPCR mix的核心原料主要是高灵敏度热启动Taq酶,它采用经过基因改造的抗体修饰,可极大地提高扩增灵敏度和特异性。 生产管理 翌圣探针法qPCR mix严格按照IVD产品生产标准管理生产流程,从小样研发配制到规模化生产,稳定的生产工艺保证了批次间的稳定性,同时严格把控包装流程。qPCR mix中的原料 - 抗体法热启动酶生产时需要根据抗体纯度和DNA聚合酶的酶活,精准配比保证产品质量。 此外,IVD原料污染防控非常关键,原料有污染会造成假阳性、稳定性差等问题。翌圣武汉生产基地是一个UCF.ME®超洁净分子酶生产工厂,严格执行ISO 13485体系标准,全封闭式生产,独特纯化技术工艺,生产出的超洁净酶达到无宿主残留(HCD、HCR、HCP),无核酸酶残留(DNase free、RNase free),无蛋白酶残留,无微生物残留,无病原体、动物源、抗生素污染,超低内毒素残留,高比活,高纯度等质量标准。 质检管控 翌圣探针法qPCR mix的质量控制严格遵循“三重防护”:中间原料质检,成品自检留样、成品抽检管控。成品生产后的质控环节,主要在DNA扩增能力测试、灵敏度测试等方面,同时在不同批次的稳定性把控方面坚持质量问题“零容忍”。 仓储运输 遵循模块化仓储,冷链运输原则。 |