1.TGA组织的新冠检测产品上市后评估概述 澳大利亚被公认为世界上药品管理严格、市场准入难度较高的国家之一。新冠检测产品在澳大利亚合法上市销售前需要在澳大利亚药品管理局（英文：Therapeutic Goods Administration，简称TGA）的进行登记注册。截止至12月14日，列入澳大利亚治疗药物登记册（ARTG）的新冠检测产品有101种，分为三大类：澳大利亚卫生部已聘请多尔蒂传染病与免疫研究所对上述获证的新冠病毒POCT检测产品进行上市后的临床性能评估，以更加清楚这些产品在新冠病毒的管理中可能发挥的作用，以告知用户产品最佳用途。现已公开13种产品的测试结果。研发结果表明多数检测试剂的总体灵敏度低于制造商使用说明书中声称的值。然而，如果分析仅包括在COVID-19相关症状出现后14天以上采集的血清样本，有相当多的检测试剂临床灵敏度和特异性与使用说明书声称相当。2.新冠病毒抗体检测产品上市后评估测试方案介绍2.1试剂患者确诊进行RT-PCR检测的试剂为AusDiagnostics生产的COVID-19实时荧光PCR产品2.2样本来自于经RT-PCR检测鼻咽（NP）或口咽（OP）拭子或痰等呼吸道样本为阳性的COVID-19确诊患者的血清。为了评估抗体在COVID-19不同进程的变化规律，在症状出现后的多个时间点对患者进行取样。来自可能存在交叉反应的患者的血清，主要是非SARS-CoV-2的其它呼吸道病毒感染患者，包括季节性冠状病毒、其它急性感染患者（例如例如登革热、CMV、EBV）；来自COVID-19大流行前的2018年和2019年维多利亚州人群代表性血清。所有样本来源于皇家墨尔本医院、国家病毒学参考实验室，纳入研究的样本分为100ul/管进行保存。入组样本数量总计229例，其中137例阳性样本，36例非COVID-19其它感染病毒样本，56例为COVID-19流行前的样本。组别 | 特性 | 评估用途 | 总计（样本/患者） | 1 | RT-PCR检测结果为SARS-CoV-2阳性的患者样本 | 敏感性分析 | 137/91 | 2 | 其他非COVID-19感染患者的样本 | 特异性分析 | 36/36 | 3 | COVID-19大流行前的样本 | 特异性分析 | 56/56 |
在137例样本中，根据发病时间分类，发病天数14天以前和14天之后的样本总数接近。发病天数 | 样本数量（n） | 0-3 | 22 | 4-8 | 28 | 9-14 | 21 | 15-20 | 9 | 21-30 | 27 | >30 | 30 | 总数 | 137 |
2.3试验程序
快速检测产品测试：由接受过免疫层析检测培训的三名实验室研究技术人员在病理学系的临床试验研究实验室进行测试。检测完全按照试剂厂家说明书或是操作手册进行，试验结束时出现的任何微弱线均视为阳性结果。 ELSIA产品测试：由一位经验丰富的资深科学家在血清学实验室（VIDRL）进行EURIMUN EIA试验，该科学家在执行EIA试验方面具有丰富的经验。测试完全按照产品说明书进行，使用自动洗板机和光密度仪检测。病毒微量中和实验：微量中和分析是在墨尔本大学多尔蒂研究所的Subbarao实验室进行的内部分析。SARS-CoV-2病毒是从澳大利亚墨尔本一名患者的临床标本中分离出来，在Vero细胞中培养复制，然后与稀释的试验血清一起孵育。试验血清抑制病毒入侵和复制的能力报告为滴度，用Reed-Muench法计算，滴度大于40时视为阳性。该检测已通过一组SARS-CoV-2 PCR确诊患者的血清和一组2016年的代表性血清进行验证，通过受试者操作曲线（ROC）分析确定检测截止值为40。所有测试都是以盲法进行的，由另一名独立研究人员在对结论进行复核。从病历中检索临床和流行病学的详细资料。
2.4统计方法使用Graphpad Prism（8.4.2）进行统计分析，计算所有临床性能指标95%置信区间。临床灵敏度计算：每个血清学快速检测试剂的阳性结果数除以RT-PCR确诊COVID-19患者阳性样本数。 临床特异性计算：每个血清学快速检测试剂的阴性结果数除以非COVID-19患者（研究中入组2、3类病例）样本数。 阳性预测值计算（不考虑人群患病率）：COVID-19患者样本中血清学快速检测阳性样本数量占整个试验测试中所有患者样本阳性结果的比例。 阴性预测值计算（不考虑人群患病率）：非COVID-19患者样本中血清学快速检测阴性样本数量占整个试验测试中所有患者样本阴性结果的比例。
2.5伦理批准本研究经RMH人类研究伦理委员会（RMH HREC QA2020052）批准，该伦理批准允许在出院后进行前瞻性血清采集，从而能够对血清学分析的性能进行纵向评估。参与该项目的患者还提供了样本用于评估血浆和指尖全血的性能。3.新冠病毒抗体检测产品上市后评估测试结果3.1抗体检测产品的临床敏感性和特异性结果抗体检测产品的临床敏感性和特异性分为四个等级类别：第二类检出能力较弱，特异性较强的产品，检出能力较弱反应在临床敏感性与发病时间显著相关，当发病时间在14天后，临床敏感性提高10%~30%； 第三类产品检出能力较强，试剂中抗原与样本抗体结合能力弱，临床敏感性在50%左右，受发病时间影响较小，特异性符合要求； 第四类产品表现为检出能力有待提高，且试剂中抗原与样本抗体结合能力弱，整体临床敏感性在50%附近或以下。
3.2ELISA检测试剂对不同发病时间阳性样本的检出率使用欧蒙试剂检测了从167个患者采集的208份血清样本，总临床灵敏度为68.1%(95% CI58.8-76.5)，特异性为72.8% (95% CI 58.876.5)，随着发病时间的增加，检测信号值显著升高。3.3抗体检测产品在血清、血浆、全血样本上检测结果的符合率CTK公司Onsite IgM/IgG 试剂检测血清、血浆和全血样本的IgM符合率82.1% [70.8, 90.4]，IgG符合率88.1% [77.8, 94.7]。杭州微策VivaDiag IgM/IgG 试剂试剂检测血清、血浆和全血样本的IgM符合率86.4% [65.1, 97.1]，IgG符合率81.8% [59.7, 94.8]。 检测试剂 | CTK公司Onsite IgM/IgG 试剂 IgM | CTK公司Onsite IgM/IgG 试剂 IgG | 样本类型 | 血清 | 血浆 | 全血 | 符合率% | 血清 | 血浆 | 全血 | 符合率% | 阳性结果 | 49 | 51 | 51 | 82.1% [70.8, 90.4] | 50 | 52 | 43 | 88.1% [77.8, 94.7] | 73.10% | 76.10% | 76.10% | 74.60% | 77.60% | 64.20% | 检测试剂 | 杭州微策VivaDiag IgM/IgG 试剂 IgM | 杭州微策VivaDiag IgM/IgG 试剂 IgG | 样本类型 | 血清 | 血浆 | 全血 | 符合率% | 血清 | 血浆 | 全血 | 符合率% | 阳性结果 | 13 | 14 | 12 | 86.4% [65.1, 97.1] | 13 | 14 | 12 | 81.8% [59.7, 94.8] | 59.10% | 63.60% | 54.40% | 59.10% | 63.60% | 54.50% |
3.4抗体检测产品批间差异 以下3种抗体试剂检测所有共229例样本的批间一致性大于90%，这基本也是胶体金生产工艺能控制的批间差水平。杭州奥泰Alltest IgG/IgM快速检测试剂的批间一致性为IgM92.6% (95% CI: 88.4-95.6%); IgG 91.7% (95% CI: 87.4-94.9%)。广州万孚SARS-CoV-2抗体检测试剂的批间一致性为91.7%(95% CI: 87.3-94.9%)。青岛汉唐 SARS-CoV-2 IgM/IgG抗体快速试剂的批间一致性为IgM93.4 % (95% CI: 89.4-96.3%); IgG 96.1% (95% CI: 92.6-98.2%)4.结论作为研发人员，可借鉴TGA在上述评价中的方案，了解同类产品质量和可用的资源情况，对自研产品进行比对，确认科学合理的研发产品质量目标。
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