临床基因扩增实验室是进行PCR项目检测的实验场所,根据《临床基因扩增检验实验室管理办法》,原则上应当设置以下区域:试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的,各区域无论是在空间上还是在使用中,应当始终处于完全的分隔状态,不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能,区域可适当合并。例如使用实时荧光pcr仪,扩增区、扩增产物分析区可合并;采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪,则标本制备区、 扩增区、扩增产物分析区可合并。 按照管理办法,实验过程中用到的仪器不仅需要编号管理,还应按照一定的操作SOP和维护SOP进行管理,本文为大家分享常用仪器的使用和维护办法。 1.PCR扩增仪: 1.1 PCR仪应放在临床基因扩增实验室的第三区,房间整体压强为负压,以防止扩增产物污染前两个区; 1.2仪器应放置在水平台上;工作室需设置空调,保证仪器散热;以防温度过高损害仪器; 1.3接稳压电源:尤其是(扩增仪)半导体升温降温的设备;若经常出现故障,则仪器的使用寿命会减少; 1.4注意事项:每次实验时,最好能将扩增仪内的孔位全部放置样品管,若样品管少时可用空管代替,以保证实验的一致性和重复性。 1.5维护:应定期使用电子测温仪校准温度,定期清洁热盖和反应孔。定期联系厂家工程师进行测评,保证仪器正常运行。
2.核酸提取仪 2.1核酸提取仪应放置在临床基因扩增实验室的第二区 2.2仪器应放置水平台上,电源电压须与仪器要求电压相一致,并连接可靠的地线。仪器远离水源、明火及腐蚀性物质; 2.3每次使用后注意清洁,使用(75%)乙醇擦拭,紫外消毒;市面上关于核酸提取仪的种类繁多,可咨询厂家注意相关事项。
3.移液器(连续可调) 3.1根据所需取液量选择相应的移液器及吸头,基因扩增实验室要求使用带滤芯的吸头,防止交叉污染 3.2吸嘴浸入液体深度要合适;吸取液体时应缓慢匀速吸取,将吸嘴预洗多次再用;避免液体溅到移液器头上;打出液体后拇指不应松开按钮,将吸液嘴压掉后再将拇指松开,避免液体回吸。 3.3在调整取液量的旋钮时,不要用力过猛,并应注意计数器显示的数值不要超过其可调范围; 3.4连续可调式移液器不可在无吸头时使用,吸头有液体时不可平放或倒置; 3.5使用了酸或腐蚀蒸汽的溶液后,最好拆下套筒,用蒸馏水清晰活塞及密封圈 连续可调式移液器在取样加样过程中应注意移液嘴不能触及其他物品,以免被污染;移液嘴盒(架子)、废液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理,以方便操作过程、避免污染为原则。 3.6连续可调式移液器在使用完毕后应置于移液器架上,远离潮湿及腐蚀性物质。 3.7加样器应根据使用频率进行维护
4.高速冷冻离心机 4.1离心机应放置在水平坚固的地板或平台上,并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动 4.2待离心机完全停止转动时打开机盖,取出离心样品,用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁,待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖 4.3如果转头和盖子有可见的腐蚀或磨损的痕迹,则应立即停止使用;转头应定期清洗和消毒。擦拭离心机腔时动作要轻,以免损坏机腔内温度感应器。
实验室内仪器使用,均需要应做好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。
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