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专家共识 | 新型冠状病毒肺炎病毒核酸检测专家共识(2020)

2020-6-27| 编辑: 班木芙兰| 查看: 796| 评论: 0|来源: 中华医学杂志

摘要: 突发新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)肺炎疫情以来,感染病例快速上升。随着疫情的发展和防控力度加大,全国各地乃至境外均有病例报道,及时对急重症及疑似患者进行诊断需要快速有效的方法,病毒 ...



突发新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)肺炎疫情以来,感染病例快速上升。随着疫情的发展和防控力度加大,全国各地乃至境外均有病例报道[1,2,3,4],及时对急重症及疑似患者进行诊断需要快速有效的方法,病毒核酸检测可为诊断提供直接证据[5,6]。核酸检测过程中因对病原体的传染途径和致病力尚未完全明确,工作人员在核酸检测过程中存在较大的感染风险。此外,因为2019-nCoV基因结构与一般RNA差别较大,因此检验流程、检验质量和生物安全均需要有一定的指导。本共识在参阅国家卫生健康委员会相关文件、查阅文献、咨询重疫区相关专家的基础上进行编写,以对实验室检测工作提出有指导性的建议,本共识适用于从事2019-nCoV核酸检测的所有实验室。


适用范围


适用于2019-nCoV核酸检测,如采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测等。


工作程序


一、标本采集


(一)标本采集人员


采集人员必须经过院感管理部门或上级管理部门举办的生物安全培训,并考核合格。标本采集人员应按三级防护配备防护用品,包括工作服、防护服、一次性工作帽、医用防护口罩(N95)、外科口罩、护目镜、面罩、双层手套、防水靴和鞋套[7,8]。配备防止病原微生物扩散和感染的设施,如处理感染性废弃物的垃圾桶、处理紧急意外事件的药具和具备一定的通风条件等。


(二)受检人群


新型冠状病毒肺炎疑似病例、确诊病例或与上述二者有密切接触史者[9]。


(三)标本采集及包装


轻症患者、高度疑似患者或有密切接触史者,标本采集优选顺序为鼻咽拭子、口咽拭子、痰液,为提高阳性率,可同时采集1份鼻咽拭子和1份口咽拭子于同一标本采集管中;为观察疗效和控制传染源,可对确诊患者的粪便和血液进行检测。


1.鼻咽拭子:


标本采集管先贴好条形码,尽可能采集患者发病3 d内的鼻咽拭子标本。以拭子测量鼻尖到耳垂的距离并用手指做标记,将拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子深入距离最少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半,使拭子在鼻内停留15~30 s,轻轻旋转3~5次,迅速将拭子放入装有2 ml裂解液(与核酸提取试剂盒中裂解液相同)的标本采集管或含RNA酶抑制剂的细胞保存液中,插入拭子后在靠近顶端处折断无菌拭子杆,旋紧管盖并用封口膜封闭[10]。


2.口咽拭子:


标本采集管先贴好条形码。尽可能采集发病3 d内患者的咽拭子标本。宜用无菌植绒拭子采样,适度用力拭抹咽后壁部位,应避免触及舌部;迅速将无菌拭子放入用于采集鼻咽拭子的采集管中,在靠近顶端处折断无菌拭子杆,旋紧管盖并用封口膜封闭[10]。


3.痰液:


标本采集管先贴好条形码。收集痰液标本时不宜开放气道收集标本。收集深部咳嗽痰液于一次性无菌旋盖采样杯中,采样杯中装入2 ml蛋白酶K(1g/L)[11]。收集痰液后旋紧杯盖并用封口膜封口,尽可能30 min内送检。如果需长距离运输标本时不宜先添加蛋白酶K。


4.肺泡灌洗液(BALF):

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