2019新型冠状病毒抗原/抗体检测试剂注册技术审评要点（试行）

本要点旨在指导注册申请人对2019新型冠状病毒抗原/抗体检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。

本要点是对2019新型冠状病毒抗原/抗体检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。

本审评要点适用于2019新型冠状病毒抗原/抗体检测试剂，试剂用于对血清、血浆、全血、咽拭子、肺泡灌洗液、痰液或其他呼吸道分泌物等样本中的2019新型冠状病毒抗原/抗体进行体外定性检测。本审评要点适用于进行首次注册申报的产品。

二、性能评估

企业应提交在符合质量管理体系的生产环境下生产的试剂盒进行的所有性能评估验证的研究资料，包括具体研究方法、实验方案、实验数据、统计分析等详细资料。建议着重对以下分析性能进行研究。

1. 样本采集和处理

（1）研究样本采集时间点的选择：是否受病程、临床症状、用药情况等因素的影响。

（2）针对拭子样本，研究对采样拭子及样本保存液（采样液）等的要求：对采样拭子的材质要求（包括对拭子头和拭子杆的要求）、保存容器要求，保存液（采样液等）成分、浓度、使用量的要求等。

（3）针对血液样本，研究适用的抗凝剂。

2.最低检测限

（1）最低检测限的确定

抗体检测：建议选取特定滴度的特异性抗体阳性样本梯度稀释进行最低检测限确定，每个梯度的稀释液重复3～5份，每份稀释液重复检测不少于20次，将具有90%～95%阳性检出率的抗体水平作为最低检测限，抗体滴度应采用适宜的方法进行确认。

抗原检测：建议对病毒进行梯度稀释后研究确定最低检测限，每个梯度的病毒稀释液重复3～5份，每份稀释液重复检测不少于20次，将具有90%～95%阳性检出率的病毒水平作为最低检测限，抗原浓度应采用适宜的方法进行确认。

抗原、IgM抗体、IgG抗体应分别选择不同来源具有代表性的3个临床样本或培养后病毒原液进行最低检测限的确定。

（2）最低检测限的验证

选择具有时间和区域特征性的至少3个病毒株或临床样本（与最低检测限确定不同样本）在最低检测限浓度水平进行验证，应达到90%～95%阳性检出率。

采用的稀释液应与适用样本类型的基质一致，可采用阴性样本进行稀释。抗原检测试剂应提供详细的病毒滴度的确定方法，同时应详细描述病毒样本的确认方法及验证结果。抗体检测试剂应提供详细的抗体类型和滴度的确认方法及验证结果。

3.不同区域病毒样本包容性的验证

提供具有时间和区域特征性的不同来源的患者真实临床样本进行验证，抗原、IgM抗体、IgG抗体检测试剂分别研究各10个不同患者样本，验证内容应包括最低检出限、重复性等，提供样本及浓度的确认方法、实验数据。

4. 分析特异性

（1）交叉反应验证（抗原、IgM抗体、IgG抗体检测试剂应分别验证）

①地方性人类冠状病毒（HKU1，OC43，NL63和229E）；

②H1N1（新型甲型H1N1流感病毒（2009）、季节性H1N1流感病毒）、H3N2、H5N1、H7N9，乙型流感Yamagata、Victoria，呼吸道合胞病毒，鼻病毒A、B、C组，腺病毒1、2、3、4、5、7、55型，肠病毒A、B、C、D组，EB病毒、麻疹病毒、人巨细胞病毒、轮状病毒、诺如病毒、腮腺炎病毒、水痘-带状疱疹病毒；

③肺炎支原体；

提供所有用于交叉反应验证的病原体、抗体等样本的来源、阴阳性、种属/型别和浓度/滴度确认等试验资料。抗原检测试剂建议在病毒等的医学相关水平进行交叉反应的验证，如病毒浓度为105 pfu/mL或更高；

④高浓度新型冠状病毒特异性IgG抗体与特异性IgM抗体的交叉反应验证；

⑤验证不少于20份正常人样本。

（2）内源/外源物质干扰

不同样本类型其潜在干扰物质可能不同，应根据具体采集的样本类型，选择适用的干扰物质进行研究。建议申请人在每种干扰物质的潜在最大浓度（“最差条件”）条件下进行评价，在病毒抗原、抗体临界阳性水平进行干扰试验验证。

表1 推荐用于干扰试验的物质

5. IgM抗体检测试剂：对至少5份含有病原体特异性IgM抗体的样本进行IgM破坏实验研究，方法为采用特定的化学制剂（如2－巯基乙醇或二硫苏糖醇）处理样本后，重新进行检测，IgM检测结果应为阴性。

6.精密度

企业应对精密度指标，如标准差或变异系数等的评价标准做出合理要求。模拟样本并不能体现临床样本可能带来的所有变异因素，因此精密度评价中应同时包含若干临床样本。针对本类产品的精密度评价主要包括以下要求。

（1）对可能影响检测精密度的主要变量进行验证，应对检测时间、分析仪、操作者、地点、检测轮次等要素进行相关的验证。

（2）设定合理的精密度评价周期，例如：为期至少20天或5天的检测，具体方案可参考EP文件进行。从而对批内/批间、日内/日间以及不同操作者之间的精密度进行综合评价。

（3）用于精密度评价的临床样本应至少包含3个水平：阴性样本、临界阳性样本、（中或强）阳性样本，并根据产品特性设定适当的精密度要求。

①阴性样本：待测物浓度低于最低检测限或为零浓度，阴性检出率应为100%（n≥20）。

②临界阳性样本：待测物浓度略高于试剂盒的最低检测限，阳性检出率应≥95%（n≥20）。

③中/强阳性样本：待测物浓度呈中度到强阳性，阳性检出率为100%且CV≤15%（n≥20）。

7.钩状（HOOK）效应研究。

8.提供企业参考品验证资料：根据主要原材料研究资料中的企业参考品设置情况，采用三批产品对企业参考品进行检验并提供详细的实验数据。

9.其他需注意问题

如使用仪器进行结果判读的产品，应提供产品说明书【适用机型】项中所列的所有型号仪器的性能评估资料。

10.适用的样本类型

如产品适用于血清和血浆，可采用同源比对验证样本的可比性。

如产品适用于全血，可采用该样本类型进行全性能评估，亦可至少进行最低检测限、不同区域病毒样本的包容性和精密度研究，同时进行同源比对试验。

应提供符合产品技术要求的、在具有相应医疗器械检验资质和承检范围的医疗器械检验机构进行的产品检验报告，应提供连续3个生产批次样品的检验合格报告。

该项目尚无国家参考品，应使用企业参考品进行注册检验，如发布应急用国家参考品，应采用国家参考品进行注册检测。

提交对申报试剂阴性/灰区/阳性等结果判断的阳性判断值（cut-off,CO）确定的研究资料，包括具体的试验方案、人群及受试者样本选择、评价标准、统计学分析和研究数据等。建立阳性判断值使用的样本来源的选择应考虑到不同的地理区域、不同的感染阶段和生理状态等因素的影响。另外，明确不同的样本类型是否有差异，如有差异应分别确定。

如适用,可采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式来选择确定合理的阳性判断值；如结果存在灰区（equivocal zone），应明确灰区建立的基础。如采用其他方法对阳性判断值进行确认研究，应说明这种方法的合理性。

五、主要原材料研究资料

此产品的主要原材料包括抗原、抗体、质控品、参考品等。应提供主要原材料的选择与来源、制备过程、质量标准等相关研究资料。如主要原材料为企业自制，应提供其详细制备过程；如主要原材料源于外购，应提供资料包括：选择该原材料的依据及对比筛选试验资料、供应商提供的质量标准、出厂检验报告，以及该原材料到货后的质量检验资料，供应商应固定，不得随意更换。申请人应对各主要原材料均明确质量控制标准。

1. 新型冠状病毒特异的抗原、抗体

病原体特异的抗原、抗体是该类产品的关键原材料。由于新