检验分析技术随着各项科技的进步而飞速发展,越来越多的项目可以进行仪器自动化检测,伴随而来的是致使实际人工参与整个检测过程的程度降低,对整个实验过程的质量监测也相对松弛。正是因为仪器自动化程度越来越高,那么检验师对数据结果及检验过程需要更细致地关注、分析和把握。仪器自动化检测大多数情况下得出的是单一的数据结果,而这个结果是否真实反应标本本身的实际情况却有待论证,分析整个反应过程才是保障结果客观性和真实性的重要环节。比如在酶学检测以及免疫学检测等方面就会经常遇到检验数据结果不能真实反应标本实际情况的问题。 图a 图b 在此,我们再回顾一遍免疫比浊法检测的后带与前带现象及其对检测结果的影响。如图 c 所示,抗原抗体结合反应时,当抗体过量时称为前带,抗原过量时称为后带。我们进行免疫比浊检测时一般选在免疫反应的前带,随着检测抗原的浓度不断上升,免疫复合物的生成逐渐增加,通过吸光度增加的变化可计算出抗原的含量。当标本中的抗原浓度过高时,超过了试剂抗体的结合浓度,导至生成的免疫复合物再次解离而减少,导至结果假性减低。因此,使检测的比浊区间落在免疫反应的前带是保证该方法检验结果准确的基础。对于本案例中患 者血清标本的稀释,其作用就是避免后带现象出现。 图c 既已发现本实验室检测系统存在上述潜在的问题,该如何解决呢?本实验室使用的急诊生化仪是一款开放的系统,我们采用的是开放试剂,因此整个实验反应的各种状况需设定好 自动补救措施或者预警提示。因该仪器检测 SAA 时吸样量极少的缘故,设置自动减少吸样 量达到稀释的目的无法实施。那么,设置一个预警提示,传到 LIS 系统,检测人员再手工稀 释复测,也是一个避免假性偏低结果发布的有效措施。关键在于如何设置使得仪器区分前带 与非前带现象。仔细分析两种反应曲线(图 a,图 b)可发现,反应终点吸光度检测是在设定 的一段时间窗内(蓝色双竖线内)多点获得吸光度值,计算平均值。而设置仪器自动区分曲 线a与b的关键特征在于检测终点区间免疫复合物的生成速率差异。当反应终点处于前带时, 如图 d,B 点的吸光值减去 A 点的吸光值再除以该区间段的反应时长即为这段区间的平均免 疫复合物生成速率,此时速率应为正值;当反应终点移动到后带区间,如图 d 中 B1、A1 之 间的检测区,速率值为负值。因此我们可以发挥主动性,设定检测终点区的平均速率值大于 0 时结果为可靠的,小于或者等于 0 时禁止仪器传送数据结果到 LIS 系统,这样提示检验工 作者进行手工稀释复检。执行此规则后,明显减低不留意间所错误发布的假性偏低结果。 图d 从这个案例中,我们可以发现,仪器自动化检验对于检验工作效率的提高有很积极的意义,但是对于仪器传送的单一的、“冰冷的”数据,检验师应更要注意到该数据产生的始与 终,甄别数据的真实性,不忽视仪器自动化检验的过程,科学严谨地设置仪器数据传送规则, 严防不可靠、不准确的数据传入 LIS 系统,误导临床诊疗。 参考资料 [1]王兰兰, 许化溪. 临床免疫学检验[M]. 人民卫生出版社. [2]前带及参数设置流程详解, 日立诊断学术部. |