艾滋病检测技术与厂家盘点

人类获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）由人类免疫缺陷病毒（Human Immunodificidncy Virus ,HIV）引起，是一种危害性极大的传染病。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒，它把人体免疫系统中最重要的CD4T淋巴细胞作为主要攻击目标，大量破坏该细胞，使人体丧失免疫功能。因此，人体易于感染各种疾病，并可发生恶性肿瘤，病死率较高。HIV在人体内的潜伏期平均为8～9年，患艾滋病以前，可以没有任何症状地生活和工作多年。

HIV病毒电镜模式图

目前关于艾滋病的起源的多种假说，都认为艾滋病来源于猴子体内的猿免疫缺陷病毒，也就是SIV(Simian immunodeficiency virus)的一次变异。变异后的SIV具有了感染人的能力，成为了人免疫缺陷病毒HIV(Human immunodeficiency virus)。然后从非洲猴传染给非洲人，并随着贸易，黑奴等，被带往全世界。多种数据模拟以及流行病学研究推测这种变异最早发生在1910-1930年。2014年，有研究者在著名杂志Science上发表研究成果，将时间锁定在1920年。

1981年6月5日，美国疾病预防控制中心在《发病率与死亡率周刊》上登载了5例艾滋病病人的病例报告，这是世界上第一次有关艾滋病的正式记载。同年12月1日，第一个艾滋病病例正式确诊，世界卫生组织也将每年12月1日定为“世界艾滋病日”。1985年6月3日，一位阿根廷籍病人因严重肺部感染、呼吸衰竭被收入北京协和医院重症监护病房并很快死亡，后被证实死于艾滋病，这是我国第一次发现艾滋病病例。

近日国家卫生健康委员会召开例行新闻发布会，介绍我国艾滋病防治工作进展情况。据中国疾控中心、联合国艾滋病规划署、世界卫生组织联合评估，截至2018年年底，我国估计存活艾滋病感染者约125万。截至2018年9月底，全国报告存活感染者85.0万例，死亡26.2万例。估计新发感染者每年8万例左右。全人群感染率约为9.0/万，参照国际标准，与其他国家相比，我国艾滋病疫情处于低流行水平，但疫情分布不平衡。性传播是主要传播途径，2017年报告感染者中，异性传播为69.6%，男性同性传播为25.5%。

然而每年仍然有30%左右的感染者没有被发现，这些没有被发现的感染者还会在社会上继续传播，未来对于艾滋病的检测将持续扩大。艾滋病的实验室检测主要包括HIV抗体检测、HIV核酸检测、HIV基因型耐药性检测、CD4+和CD8+T淋巴细胞检测等。

2015年12月，中国疾病预防控制中心（CDC）发布《全国艾滋病检测技术规范》，这是自1997年以来该规范的第三次修订。规范对于HIV抗体检测、HIV-1新发感染检测、HIV-1抗原检测、HIV核酸检测、实验室检测策略、HIV-1基因型耐药性检测、CD4+和CD8+T淋巴细胞检测都作了具体规范。

HIV抗体检测是艾滋病检测技术中应用时间最长、方法成熟、操作简便、特异性和敏感性均较高的一类方法，可用于诊断、血液筛查、监测等，是为了确定个体感染状况、防止输血传播、了解不同人群感染率及其变化趋势等。抗体确证试验（免疫印迹试验、条带/线性免疫试验）是目前诊断的金标准，常用的筛查方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA）、明胶颗粒凝集试验（PA）、免疫渗滤试验、免疫层析试验等。

HIV-1p24抗原检测用于感染窗口期、HIV-1抗体不确定或HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。检测原理一般是抗体夹心法，包括酶联免疫吸附试验（ELISA法）、酶联荧光分析法（ELFA）、电化学发光法（ECLIA）、抗原抗体快速检测法等。

HIV核酸检测适用于婴儿感染早期诊断、HIV-1感染补充试验及急性期和晚期感染者的诊断、治疗效果监测、病程监控及预测、耐药性监测等。全球目前正式用于临床诊断HIV-1急性期感染的核酸检测试剂主要是美国FDA批准的Gen-Probe公司生产的Aptima HIV-1 RNA核酸定性检测试剂和欧盟批准的Abbott M2000HIV-1 RNA/DNA定性检测试剂。前者检测原理为转录介导等温扩增（TMA）和化学发光标记探针杂交检测，检测靶基因为HIV-1 LTR和多聚酶基因；后者检测原理为Taqman实时荧光PCR扩增检测，检测靶基因为多聚酶区整合酶基因。国内生产的核酸检测试剂原理主要是后者。

HIV-1基因型耐药性检测可作为制定抗病毒治疗方案的参考依据、作为制定母婴阻断和婴幼儿抗病毒治疗方案的参考依据、辅助临床医生分析治疗失败的原因，并制定补救治疗方案等。

常规HIV-1基因型耐药检测采用RT-PCR扩增和Sanger测序法获得相关基因片段的序列，通过与野生型和耐药毒株的序列比较，分析耐药相关基因突变，利用基因型耐药解释系统判断是否耐药以及耐药的程度。目前我国HIV-1基因型耐药检测采用商品化试剂盒和实验室自建（In-house）两种方法，商品化试剂盒生产厂家主要有美国Applied Biosystems、德国Bayer以及国内的达安基因。

CD4+T淋巴细胞检测可评价HIV感染者免疫状况、检测疾病进展、评估感染风险等，CD8+T淋巴细胞为抑制性/细胞毒性T细胞，HIV感染者CD8+T细胞数量增加，导至CD4/CD8比值下降。目前CD4+和CD8+T淋巴细胞计数的方法分为两大类，一类是应用流式细胞仪测定法，另一类是非流式细胞仪测定法。常用的淋巴细胞计数检测方法为自动检测方法，包括流式细胞仪（主要有双平台法和单平台法）和专门的细胞计数仪。

曾经导至3亿人死亡的天花病毒，如今早已灰飞烟灭，有“死神”之称的艾滋病也终将被人类攻克。