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当你遇到这样的反应曲线(生化仪)

2018-3-9 00:00| 编辑: 纳兰烙烙| 查看: 3719| 评论: 0|来源: 检验频道

摘要: 当你遇到如下反应曲线,检验老师们,敢直接发报告吗?一般老师会选择重新复查,如果复查后还会出现报警呢?打电话给仪器厂家硬件工程师。。。。。打电话给仪器厂家应用工程师。。。。打电话给试剂厂家工程师。。。。 ...

当你遇到如下反应曲线,检验老师们,敢直接发报告吗?一般老师会选择重新复查,如果复查后还会出现报警呢?


打电话给仪器厂家硬件工程师。。。。。

打电话给仪器厂家应用工程师。。。。

打电话给试剂厂家工程师。。。。

累心啊。。。。

。。。


今天,小编给您讲解下发生报警的根源,以及解决方法。


首先通过反应曲线,我们可以得到如下信息:


  1.  项目:AMY(淀粉酶),分析方法为速率法A,(大部分酶类检测都是采用速率法,但SOD等酶除外),如分不清楚速率法A、两点速率法、两点终点法,请参考文章【生化反应曲线解析2速率法】【生化反应曲线解析1终点法


  2. 之所以称之为异常反应曲线,是因为发生数据报警F(F为日立生化仪线性报警符号,且只有速率法A才会发生线性报警,在这里,一定要和试剂盒说明书的线性范围区分开,这是两个概念,近期会推送一篇文章,“试剂盒说明书解析”,敬请关注),为了更好、深入的理解,所以先科普下线性报警。

      

        线性报警:通过速率法A测酶活性,在反应刚开始时有一段延迟期,在该时期内,血清中的待测酶(如AMY)刚与试剂中AMY的底物接触,AMY催化底物生成产物较少,吸光度的变化不明显。待反应进行一段时间后,反应进入线性期(也称为零级反应期),此时底物浓度处于过量状态,在此阶段产物的增加达到一个最大的稳定状态,即单位时间内产物的生成量是恒定的,此时的反应速度与底物浓度无关,只与酶活性有关,通过检测这段时间的产物生成速度来计算出酶的活性。如下图

      

 

如果在设置的测光区域内(如案例AMY的反应曲线,测光点22-29),反应曲线不成线性,所测结果是不准确的,就需要查找原因了,日立生化仪线性报警的设置及检测方法如下:


线性报警设置(日立7180全自动生化分析仪 Utility---System---Alarmsetting):


以AMY为例,讲解下为什么会发生线性报警:


AMY,测光点22-29(共8个测光点),判断条件为30%(如果测光点≥9个,则判断条件为10%),判断规则如下:


前三个测光点吸光度变化速度(测光点22,23,24,通过最小二乘法计算变化速度)减去  最后三个点吸光度变化速度(测光点27,28,29),除以总吸光度变化速度(测光点22-29),乘以100%,如果超过30%,在数据后面会有报警符号F(参考AMY反应曲线)。

如果测光点≥9个,用前四个测光点(和后四个测光点)进行计算,超出界限,数据报警符号为W。


当遇到类似反应曲线,查找问题思路如下


  1. 查看当日质控和校准的反应曲线

    查看质控是否在控,是否有数据报警,因为质控和校准品成分相对血清比较简单,干扰物质少,且一般认为校准品的反应曲线是标准反应曲线(保证正常的情况下)。


  2. 查看其他速率法项目是否有类似报警

    如果其他速率法项目测标本时也出现大量线性报警,这时首先排查生化仪硬件问题,具体如下

    a、搅拌棒:如果搅拌棒故障,搅拌不充分,底物与酶不能充分结合,增加延迟期,有可能在设置的测光区域,没有达到线性期,这时酶催化底物的速度会不恒定,很多速率法检测项目有可能出现线性报警。

    b、光源灯:如果光源灯超过使用期限,发光有可能不稳定,且大部分速率法项目测定波长为340nm或405nm,偏于紫外光谱区,最为敏感,所以要检查光源灯。日立7180生化仪光源灯的判断标准是340nm下吸光度小于19000.

    c、水浴槽:如果仪器没有定期保养,即使换水时添加抗菌剂,但长时间不保养,反应槽也会脏,长期处于37度环境,有可能会滋生细菌。仪器测光时,如果有异物或细菌代谢产生的气泡正好在光路上,部分速率法的反应曲线有可能出现跳点,这时也会有线性报警。

    d、试剂仓:很多试剂储存条件是冷藏,如果试剂仓故障,有可能导至试剂成分中有偶联反应的工具酶活性降低,进而影响反应速度,测定时有可能出现线性报警。


  3. 查看发生报警项目出现线性报警的比例(其他项目基本无线性报警)

    a、如果AMY项目,好多标本出现线性报警,那么要查看AMY试剂有效期以及开瓶有效期,确认试剂是否过了有效期,有些标本量小的医院需要特别注意,一瓶试剂在生化仪试剂仓长时间放置,有可能导至试剂劣化,一般在试剂说明书会标注该项目的开瓶有效期。

    b、如果AMY项目,仅个别标本出现问题,则查看标本状态,是否发生溶血,是否黄疸或乳糜血,咨询病人用药情况,进一步查找原因。


所以,检验科工作,很辛苦(要值夜班),很危险(血清的危险性,仪器的危险性),很操心(要为病人的错误测定结果担责任),很严谨(审核报告单,需要专业的检验知识,临床知识)所以赶快打开你的手机,关注“检验科”公众号,这里有你想要的文章,这里能为你解决你想要解决的问题。(感觉这广告植入有点俗套哈),最后希望这篇文章能够给大家带来帮助,大家有问题也可以留言。

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