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IVD产品经理系列—寻找特检项目(3)续篇

2017-10-25 00:00| 编辑: 小桔灯网| 查看: 2852| 评论: 0|来源: 小桔灯网 作者:纳兰烙烙

摘要: 小编昨天分享的是抗MICA抗体,全称人类白细胞抗原I类相关链A位点(MICA)抗体。今天将延续这个话题讲一讲MICA在临床应用那些事儿。 人类白细胞抗原I类相关链A位点(MICA)抗体检测临床所熟知的方法学有哪些呢?1、 ...

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小编昨天分享的是抗MICA抗体,全称人类白细胞抗原I类相关链A位点(MICA)抗体。今天将延续这个话题讲一讲MICA在临床应用那些事儿。


人类白细胞抗原I类相关链A位点(MICA)抗体检测临床所熟知的方法学有哪些呢?
1、微量淋巴细胞毒试验(microlymphocytotoxicitytest)
或称补体依赖的细胞毒试验(complement dependent cytotoxicity test,CDC)
2、PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)
3、序列特异性引物PCR(PCR-SSP)
4、PCR序列特异性寡核苷酸探针分型技术(PCR-SSO)
5、PCR单核苷酸序列分析(PCR-SBT)
6、基因芯片
7、流式细胞交叉配型技术(Flow-XM)
8、酶联免疫吸附实验(ELISA)
9、免疫磁珠液相芯片技术(Luminex)

微量淋巴毒实验

原理:淋巴细胞膜表面具有HLA抗原,而分型血清中含有抗特定HLA抗原的细胞毒抗体,该抗体与淋巴细胞膜上的相应的HLA抗原结合后在补体的参与下损伤细胞膜,经染料染色后,通过观察细胞是否被染色来判断待测细胞是否损伤或死亡,进而判断抗原、抗体反应的强度。

死细胞(%)
记分
意义
0~10
1
阴性
11~20

2
可疑阴性反应
21~40

4
可疑阳性反应
41~80

6
阳性反应
0~>80

8
强阳性反应

PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)

原理:将目的基因片段PCR扩增后,利用多种限制性内切酶对扩增产物进行酶切,不同的基因序列会产生不同的酶切产物,从而产生不同的电泳图谱。它以其简单、敏感、准确,无需同位素等优点成为目前较常用的HLA基因分型技术之一,但是无法分辨杂合子,且只能区分有限的多态性。


聚合酶链式反应序列特异引物分型技术(PCR-SSP)

原理: 设计特异性引物,利用引物3'端的特异性,直接扩增相应的HPA片段,PCR产物凝胶电泳以后,以紫外线透

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