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[分享] 免疫印迹自动化的临床应用现状与分析

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发表于 2013-12-8 08:01:55 | 显示全部楼层 |阅读模式

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1. 免疫印迹自动化的临床应用组成部分

       免疫印迹手工操作的缺点,如试验步骤多,受人为因素影响大等问题在目前的临床应用中暴露无疑,因此临床实验室对免疫印迹自动化操作的需求迅速提升。以欧蒙的EUROBlotMaster II自动化方案为例,一个完整的免疫印迹自动化处理过程包含以下三个部分:
       温育及清洗自动化-实现印迹法检测从样本稀释到温育结束前的全程自动化操作;
       数字化图像处理-实现印迹检测结果(以下简称膜条)的图像保存;
       标准化的结果判读软件-通过EUROLineScan软件实现膜条的结果自动判读和定制图文报告。

2. 印迹仪的临床应用

2.1 印迹仪支持的检测项目及杂项整合功能

       目前市场上大部分印迹仪都能支持临床常见的自身抗体、病原体、过敏原等项目的免疫印迹检测,如自免的ANA谱、肝抗原谱等。
       在临床应用中,只要具备相同反应条件与试剂即可实现不同检测项目的杂项整合,如ANA谱、肌炎谱及肝抗原谱可以在同一个检测程序同时完成操作,进一步提高工作效率。
       另外,EUROBlotMaster II 在设计方面考虑用户体验,可以实现相同反应条件,不同试剂的杂项整合,满足临床检验工作者的不同需求。

2.2 印迹仪检测的精确度

       免疫印迹检测的精确度主要体现在分液的精确度和操作控制的精确度(与试剂操作要求的密切配合,优于手工操作的准确度),大量的临床实验数据表明,印迹仪自动化操作能保证膜条结果批内批间一致、显带清晰、背景清白、重复性好,适合在临床操作大面积的应用。EUROBlotMaster II与市场上的普通印迹仪相比,在整体的检测精确度方面至少提高一倍,其实现方式主要基于稳定的移液技术及特殊的吸液处理(液泵形式吸液,有别于传统的真空泵吸液方式,维护更简单,吸液效率更高)。

3. 膜条的数字化图像处理系统

3.1 膜条成像现状

       临床实验室一般是通过手工粘贴膜条,普通扫描仪扫描的方式进行膜条图像的保存,此方法经济有效,能满足一次性处理标本量较少的实验室需求。但是仍然无法解决工作效率低、潜在的生物安全隐患等问题。

3.2 膜条全自动成像仪

       针对手工扫描仪的膜条成像带来的问题,欧蒙推出的印迹法自动成像仪EUROBlotCamera很好的解决了这些问题,该设备操作简单,1分钟内最多可进行50人份的膜条成像,是目前在膜条成像方面自动化程度最高的设备之一。其主要特点有:
       无需人工接触膜条---从印迹仪出来的膜槽直接进行成像操作,无需人工进行膜条转移,避免潜在的生物安全污染问题;
       自动固定温育槽位置,自动识别膜条类型,一次性高速成像,一次性自动结果判读,可兼容30/44/48/50的膜条试剂槽;
       有专用定标卡,半定量检测结果,不同实验室检测结果通用。

4. 印迹法结果判读软件

       目前大多数的膜条试剂厂家都配备了自己的判读软件,实现客观、标准化、定量的判读印迹法检测结果,由于过敏原的检测有国际半定量的EAST规则,因此用软件客观的判定过敏原检测半定量结果更加有必要。
       临床实验室使用最广泛的膜条判读软件EUROLineScan主要特点有:膜条自动识别,定量分析和记录结果;结果判读标准化;高速多通道分析功能。最多支持50个膜条同时进行图像分析与结果处理,同时实现每个数据自动化管理和电子存档,便于备份和查找;可以制作个性化的图文并茂报告单格式,且所有信息可整合入实验室LIS系统。

传统目测判读法与EUROLineScan软件分析法对比分析

       有研究表明,EUROLineScan软件分析法较目测判读法在操作上更简便和快速,结果更客观、重复率更高(软件分析法的结果重复性为99.75%),并可读取显色带具体的灰度值,同时具有能与LIS联机的特点,因此EUROLineScan软件分析法是免疫印迹法检测自身抗体结果判读更为有效可靠的办法。
       使用软件分析法的结果重复性明显优于操作人员使用目测判读法的结果重复性, 表明软件分析法客观性强、能克服不同操作者间对结果判断的主观性差异, 使不同操作者都能得到较为一致的检测结果。此外,软件分析法还提供条带灰度值,值的大小与患者体内的自身抗体浓度具有正相关关系,可以给临床医生提供更多更准确的实验结果信息。

5. 总结

       实验室自动化已经成为中国体外诊断领域的一个必然趋势,自动化设备可以提高实验室诊断的效率和准确度。虽然在印迹检测领域,印迹仪有不少品牌可以选择,但是能提供免疫印迹自动化整体解决方案的厂家却不多见,这些自动化的应用必须考虑到检测过程的精确度,检测结果膜条成像的便捷性,结果自动判读的准确性及标准化等因素,才能真正的带来检测效率及准确度的提升。
       作为世界血清诊断领域的领导者,经过多年的探索和完善,欧蒙公司针对免疫印迹检测实验的特点提供了一整套的免疫印迹检测自动化解决方案,从温育及清洗自动化,全自动的数字化图像处理,到标准化检测结果判读,真正意义上的提高了免疫印迹法检测的效率,树立了整个行业标准化操作的典范。

6. 展望

       免疫印迹检测行业下一个发展目标:实现真正意义上无人值守的全自动免疫印迹检测系统;目前欧蒙的全自动免疫印迹检测系统EUROBlotOne在中国市场已经推出,这是一款能实现免疫印迹检测的全自动加样、从样本稀释到温育清洗、全自动成像、结果判读等所有检测过程于一体的全自动免疫印迹检测封闭系统,彻底解放人工,是目前免疫印迹自动化设备中最先进的应用。

                                                                                     欧蒙医学诊断(中国)有限公司 供稿

                                                                            摘自定向点金《临床实验室》杂志2013年第十一期


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