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[分享] 无动物源性生物用酶的优点与发展方向

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发表于 2022-5-17 12:18 | 显示全部楼层 |阅读模式

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AOF生物药物的发展方向
无血清培养基、无蛋白培养基及其其它无动物源性原料将深入研发、推广和应用,以降低成本;在疫苗生产过程中,从政策上,限制或者禁止小牛血清的使用以此提高安全性;未来将加快我国非动物源性生物药物的研发,替代传统的第一代的动物源性的生物药物;无血浆重组蛋白替代血液制品,如重组凝血酶替代血浆提取凝血酶、重组白蛋白替代人血浆提取的白蛋白等。
疫苗抗体等生物制药生产中的胰蛋白酶的应用
疫苗抗体等生物制药的生产过程主要包括①接种②初期培养③贴壁阶段④收获细胞⑤扩培;其中胰蛋白酶在收获细胞时用来处理贴壁细胞。若收获的细胞用来再增殖,则需要加入胰蛋白酶抑制剂。
动物源性胰蛋白酶对细胞培养的影响以及重组胰蛋白酶在细胞培养中的使用优点
一是安全性
可能的病毒污染:目前,使用猪胰蛋白酶的疫苗生产企业要按照2010版药典规定检测可能的病毒含量,如猪细小病毒。
可能细菌、真菌、支原体污染:将影响细胞的生长和产品质量。
重组胰蛋白酶是基因工程重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
二是纯度
杂质:因为历史的原因,用于组织培养的胰蛋白酶活性定为1:250,其实,1:250的胰蛋白酶中90%以上为杂质。
杂质的成分主要为来源于胰腺的脂类、蛋白和核酸等,在胰蛋白酶处理细胞的过程中,可能会透过细胞膜,可能对细胞的生长形成影响,特别是在科研中,用细胞来鉴定一些活性物质的作用时,可能会影响真实效果的检测。
重组胰蛋白酶纯度高,比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
三是消化效果与活性相关
活性:虽然用于组织培养的胰蛋白酶活性定为1:250,实际上,其活性却不固定,有的可能不到1:250,有的却可以高达1:1000--1:2000。因此,如果都用常规的配制方法如:0.25%来配制的话,将会使胰蛋白酶消化液的活性相差5倍甚至10倍。
弊端:胰蛋白酶的活性直接影响细胞消化结果和消化后细胞的生长。
活性过低:细胞消化不好,细胞消化所需时间长;
活性过高:细胞消化太快(比如:不到30s),易于消化过度,其危害是:轻则影响细胞生长,重则细胞死亡。消化后转接细胞密度减小,规定时间内生长不起来。  
重组胰蛋白酶可按照活性单位投料,完全避免使用过程中过多或者过少投料。

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