看这里！一文搞清新冠病毒核酸检测、抗体检测和抗原检测的区别与联系

新型冠状病毒核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，目前使用最广泛的是实时荧光定量RT-PCR法。使用RT-PCR法检测位于新冠病毒N基因和ORF1ab基因上的两个靶标，以此确认是否为新冠核酸检测阳性。观看下方视频，更好地了解新型冠状病毒核酸检测。

1、核酸检测的原理

以新型冠状病毒独特的基因序列为检测靶标，通过PCR扩增，使我们选择的这段靶标序列指数级增加，每一个扩增出来的序列，都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，累积的荧光信号就越强。而没有新型冠状病毒的样本中，由于没有靶基因扩增，因此就检测不到荧光信号增强。所以，核酸检测，其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有新型冠状病毒核酸。

2、核酸检测的样本类型

鼻拭子、咽拭子、痰液、支气管或肺泡灌洗液等。

3、核酸检测的步骤

以咽拭子为例。

（1）取样：用咽拭子擦拭咽后壁及双侧咽扁桃体处各5~10次，不断旋转拭子；

（2）留样：将拭子头浸入细胞保存液中，折断尾部后立即旋紧管盖；

（3）保存：将样本管放入密封袋中及时送检，送检过程需要严格的运输环境（2~8℃保存）。

（4）核酸提取：将病毒灭活后的样本进行核酸提取，用于后续检测，可以采用自动化的设备，如核酸提取仪等。

（5）上机检测：荧光PCR核酸检测，将提取物进行荧光PCR扩增反应，需要70~80分钟。

4、核酸检测存在的问题

（1）由于采样不当、标本保存不当、采用不同类型的标本以及使用不同厂家试剂，均有可能造成核酸检测结果“假阴性”而出现漏诊；

（2）对检测设备或平台要求较高。高灵敏度的PCR仪价格不菲，且对实验室的洁净度和操作人员的技能要求也较高；

（3）核酸检测耗时较长。完成一个PCR的检测通常需要4~6个小时，但考虑到样本运输、样本大量积压的情况，通常最快24小时才可以报告核酸检测结果。

在新型冠状病毒感染之后，人体会产生两种不同的特异性抗体：一种是感染后快速产生的IgM抗体，可作为早期感染指标；另一种是IgG抗体，产生较晚、但维持时间长，在康复期甚至疾病痊愈后都可以被检测到，是感染和既往感染的重要指标。

血清学检测最大的优势在于方便快捷，检测时间较短，能够有效突破核酸检测对人员、场所的限制，缩短检测用时。观看下方视频，更好地了解新型冠状病毒抗体检测。

1、抗体检测的原理

使用检测试纸开展新冠抗体的检测。检测试纸包括五个功能块，分别是样品垫（加样区），结合垫（含有胶体金标记的新冠病毒抗原、胶体金标记的鼠IgG），检测线（含有识别IgM/IgG的抗体），质控线（含有质控抗体），吸水垫（提供样品的流向动力）。

抗体检测采用胶体金免疫技术，在结合垫处喷涂胶体金标记的重组新型冠状病毒抗原和胶体金标记的鼠IgG；硝酸纤维素膜上包被检测线（M线/G线）和质控线（C线）。【M线包被有鼠抗人IgM抗体，G线包被有鼠抗人IgG抗体，C线包被有羊抗鼠IgG抗体】

样品加在样品垫上后，样品逐渐往吸水垫方向流动；在结合垫位置，如果样品中有新冠病毒抗体IgM/IgG，就会与胶体金标记的新冠病毒抗原结合后继续往检测线方向流动；在检测线的位置，由于固定着识别新冠病毒IgM/IgG的抗体，会将金标新冠抗原-新冠病毒抗体IgM/IgG的复合物固定下来，从而显示一条“红线”。而胶体金标记的鼠IgG则会继续流动到质控线上，被质控线上的羊抗鼠IgG抗体特异的识别结合后固定在质控线位置，从而显示“红线”。

注：结合垫中的标记抗体亦可是其他种属来源。

2、抗体检测的样本类型

血液，包括血清、血浆和全血。

3、抗体检测的步骤

（1）打开抗体检测卡铝箔袋，将检测卡取出并水平放置于桌面上；

（2）用移液器吸取血清/血浆/全血样本滴加至检测卡加样处，再吸取缓冲液滴加至检测卡加样孔中；

（3）等待15分钟，判读检测结果。

4、抗体检测存在的问题

（1）假阳性：个别患者血液中含有类风湿因子、异嗜性抗体、自身抗体以及药物和肿瘤细胞等，易造成试验的交叉反应，因此偶现假阳性的结果；

（2）假阴性：由于血清抗体检测方法存在一定的窗口期以及检测试剂盒的灵敏度不同会出现假阴性的结果。

抗体检测可用作对新冠病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测，不能单独作为诊断指标用于筛查。联合使用血清抗体检测与核酸检测，有助于提高疾病的检出率，尽可能地找出确诊患者，更有利于疫情控制。

新型冠状病毒抗原检测可直接检测出人体样本中是否含有新型冠状病毒，诊断快速、准确、对设备和人员要求低，采用双抗夹心法，使用两种抗原特异性抗体去识别和结合一个靶点抗原的不同表位，则可以大大降低交叉反应的几率，从而有效提高特异性。观看下方视频，更好地了解新型冠状病毒抗原检测。

1、抗原检测的原理

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)有四种主要的结构蛋白：刺突蛋白（Spike protein，S蛋白），核衣壳蛋白（Nucleocapsid，N蛋白），膜蛋白（Membrane protein，M蛋白），包膜蛋白（Envelope protein，E蛋白）。S蛋白是冠状病毒非常重要的表面蛋白，与病毒的传染能力密切相关，S蛋白包含S1、S2和受体结合域（RBD）。N蛋白在冠状病毒中含量丰富，是一种高度免疫原性蛋白，参与基因组复制和细胞信号通路调节。S蛋白和N蛋白是新冠免疫检测试剂盒关键原材料，对新冠病毒的诊断和排查具有重要价值。

在病毒感染人体后，刺激浆细胞产生特异性抗体。依据双抗夹心ELISA原理，样本滴加在样品垫上，通过液相层析依次通过结合垫，硝酸纤维素膜上的检测线（T线）和质控线（C线）。结合垫内含有胶体金标记的抗原特异性抗体，可以与样本中的抗原（病毒蛋白）发生结合，当液流到达检测线（T线）时，固定在这条线上的第二种抗原特异性抗体再次与抗原结合，将会呈现阳性结果。质控线（C线）包被IgG抗体，可以与结合垫中的抗体结合，用于判断层析过程是否顺利和检测是否有效。

2、抗原检测的样本类型

口咽拭子、鼻咽拭子、痰液、血清和血浆等。

3、抗原检测的步骤

（1）将处理后的样本滴加到样本处理管中；

（2）将取样拭子放到样本处理管中，搅拌管液并挤压管壁，使样本充分洗脱至处理液中；

（3）取出检测卡，向加样孔中滴加样本溶液；

（4）等待15分钟，判读检测结果。

4、抗原检测存在的问题

（1）假阴性：抗原检测需要更高的敏感性。由于新型冠状病毒主要侵犯肺泡等下呼吸道，所以从鼻咽、口咽等上呼吸道取样，不一定能取到病原体，或者取样中所含病毒数量较少，这些因素均可造成漏检；

（2）制备工艺繁琐耗时：研发抗原试剂盒需要先将重组抗原制备出来，再打到小鼠体内制备单克隆抗体，耗时大约两三个月，如果制备出的抗体性能不好还需要重新制备。

新型冠状病毒核酸/抗体/抗原检测各有侧重，不能相互替代，多种检测方法联合应用，互为补充，将分子生物和免疫水平检测相结合，发挥各自优势，提高灵敏度与特异性，可有效缩短检测窗口期，提高阳性检出率，为各种可能的风险人群提供多重保障。

小编之前分享过《#高清#新冠家庭自检产品视频集》，重点分享了几款分子自检和抗原自检市售产品的高清视频，感兴趣的伙伴们可以点击下图回放。