快速检测尿中微量白蛋白的高效液相色谱法

临床医师

近日，中南大学湘雅医学院医学检验系研究人员发表论文，旨在建立一种快速检测尿中微量白蛋白的高效液相色谱检测方法。研究指出，采用甲酸水溶液与乙腈为流动相的分子筛–高效液相色谱法能较其他方法检出更多的微量白蛋白，且快速，灵敏度高，适合临床常规测定。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。

采用新的流动相建立分子筛–高效液相色谱法测定人血清白蛋白标准液和尿液白蛋白，对该法进行方法学性能研究并分析56例糖尿病患者的尿液标本。

色谱柱AgilentZorbaxGF-250以0.1%甲酸水溶液与乙腈(85：15)为流动相，流速1mL/min，检测波长205nm时，人血清白蛋白标准液和尿液白蛋白均在1.7min出峰。在5～2000mg/L范围内线性关系良好(r2=0.9969);检测低限为2mg/L;批内和批间变异系数分别为3.98%和4.05%(20mg/L)、3.55%和3.60%(200mg/L)及4.65%和4.74%(2000mg/L);回收率分别为95.3%，98.1%和97.2%。56例糖尿病患者标本，高效液相色谱法能检出30例微量白蛋白尿，免疫散射比浊法检出15例，高效液相色谱法的检出率明显高于免疫散射比浊法(P<0.05)。

液相色谱和质谱连接，可以增加额外的分析能力，能够准确鉴定和定量像细胞和组织裂解液，血液，血浆，尿液和口腔液等复杂样品基质中的微量化合物。