最简单行为学实验→小鼠旷场实验（Open Field Test, OFT）流程

生物科研实验室

一、实验原理
小鼠天生具有趋触性（thigmotaxis），在新开阔环境中会因恐惧而沿边缘区域活动（“安全区”），但探索本能又促使其尝试进入中央区域。焦虑水平高的小鼠倾向于减少中央区活动，增加边缘停留时间；抑郁状态则表现为自发活动总距离和直立次数显著降低。OFT通过量化这些行为，评估运动能力、焦虑及探索动机。
二、实验设备准备
旷场箱体：

尺寸：40 cm × 40 cm × 40 cm（小鼠专用）。
材质：黑色或白色磨砂亚克力（避免反光），底部与动物毛色对比鲜明（如白鼠用黑箱）。
区域划分：软件自动将底部划分为16宫格（12个外周格 + 4个中央格，中央区占比25%）。
记录系统：

摄像头：固定于箱体正上方，覆盖全场。
分析软件：推荐VisuTrack或SuperMaze（自动追踪轨迹、计算指标）。
环境控制：

光照：弱光（20–50 lux），避免强光引起焦虑。
温度/湿度：22 ± 1℃，45–55%。
隔音：保持环境安静，减少人为干扰。
三、实验操作流程
动物准备：

提前3小时将小鼠移入实验室适应环境，减少新异应激。
实验前3天每日抚摸小鼠1–2分钟，降低非特异性应激。
筛选：剔除自发活动显著低于同批平均水平的小鼠。
箱体清洁：

用75%乙醇彻底擦拭箱底及侧壁，清除粪便、尿液及气味，晾干5–10分钟。
放置动物：

背向实验者，轻柔抓取小鼠置于旷场中央区域，迅速离开。
避免目光接触
，减少人为应激。
行为记录：

录制时长：5–10分钟（常用5分钟）。
软件自动分析：全程记录运动轨迹，生成热图及指标数据。
结束处理：

取出小鼠放回饲养笼，酒精清洁箱体，待挥发后测试下一只。
关键注意事项
动物一致性：

同批次小鼠性别、周龄一致（避免激素水平干扰）。
实验时间固定（上午9:00–11:00最佳），符合昼夜节律。
实验顺序：

OFT对动物影响小，需先于其他行为实验（如强迫游泳、水迷宫）进行。
干扰控制：

实验者远离箱体，避免声音或动作干扰。
每次测试后彻底清洁箱体，防止气味残留。
参数标准化：

中央区定义为总面积的25%（如40×40 cm箱体中20×20 cm）。
剔除异常数据（如跌倒、过度理毛）。