心型脂肪酸结合蛋白在诊断急性心肌梗死中的临床意义

临床医师

  丁柳美1，唐钧1，倪培华2
                                        1．复旦大学附属金山医院检验科；2．上海交通大学医学院附属瑞金医院检验系

       摘要：目的  探讨血清心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值。方法  采用双抗体夹心酶联免疫法测定78例AMI、52例不稳定性心绞痛(UA)、65例稳定性心绞痛(SA)患者及70名健康对照者血清H-FABP水平，同时测定心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶质量(CK-MB mass)并作比较。测定32例发病至采血间隔2 h以内以及46例间隔2 h以上的AMI患者的H-FABP水平，并与cTnI 比较，分析其诊断价值。结果  AMI组H-FABP、CK-MB mass、cTnI 浓度分别为(78．12±23．78)ug/L、(9．48±2．68)ug/L、(10．12±3．45)ng/mL，明显高于UA组[(18．67±7．45)ug/L、(0．56±0．11)ug/L、(0．21±0．12)ng／mL]、SA组[(2．98±1．65)ug/L、(0．22±0．08)ug/L、(0．08±0．06)ng/mL]和对照组[(2．32±1．12)ug/L、(0．20±0．09)ug/L、<0．022 ng/mL](P<0．05)；UA组H-FABP、CK-MB mass、cTnI 浓度明显高于SA组和对照组(P<0．05)；而SA组和对照组之间H-FABP、CK-MB mass、cTnI 浓度均无差异(P>0．05)。H-FABP灵敏度为84．89％、特异性为98．8％、准确率为85．89％、阳性预测值为93．24％、阴性预测值为75．14％，均高于CK-MB mass(50．11％、89．12％、78．54％、80．12％、50．78％)和cTnI(60．22％、93．23％、80．34％、86．45％、60．56％)。在发病2 h内采血的32例AMI患者中，H-FABP阳性率(65．63％)明显高于cTnI 阳性率(18．75％)(P<0．05)；在发病2 h以后采血的46例AMI患者中，H-FABP阳性率(97．83％)与cTnI 阳性率(89．13％)比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论 H-FABP在诊断AMI具有较高的灵敏度和特异性，可作为AMI的标志物，具有临床应用价值。
       关键词：心型脂肪酸结合蛋白；心肌肌钙蛋白I；肌酸激酶同工酶质量；急性心肌梗死

       急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)发生后迅速明确诊断、尽早治疗是降低死亡率改善预后的关键。目前心肌标志物是诊断AMI 重要的生化指标，但现在常用的心肌标志物释放入血的时间较晚。因此，作为AMI的早期诊断指标并不理想，而心型脂肪酸结合蛋白(heart type fatty acid—binging protein，H-FABP)是一组多源性的小分子细胞内蛋白质，其广泛分布于哺乳动物的肝、脂肪、心、脑、小肠等细胞中。当心肌缺血导致心肌细胞坏死，H-FABP从心肌细胞释放入血，使外周血H-FABP升高，特异性较高。我们拟通过检测AMI患者的H-FABP和肌酸激酶同工酶质量(CK-MB mass)、心肌肌钙蛋白I(cardial troponin I，cTnI)，探讨H-FABP在AMI 临床早期诊断中的价值。

材料和方法

一、对象

       收集上海交通大学医学院附属瑞金医院2009年9月至2010年11月心血管内科收治的78例急性心肌梗死(AMI)患者，男47例，女31例，年龄57～76岁，以世界卫生组织(WHO)AMI 诊断标准确诊。不稳定性心绞痛(unstable angina，UA)患者52例，男31例，女21例，年龄52—73岁；稳定性心绞痛(stable angina，SA)患者65例，男39例，女26例，年龄56—74岁。健康对照组为上海交通大学医学院附属瑞金医院健康体检职工，共70名，其中男39名、女31名，年龄57—73岁，排除心、脑、肺、肝、肾等器官疾病，无糖尿病及高血压。各组在性别、年龄方面差异均无统计学意义(P>0．05)。

二、样本采集

       78例AMI患者接诊后10 min内采血，其中发病至采血间隔2 h以内共有32例，超过2 h者46例；SA组和uA组均为人院次日晨空腹采血；对照组为体检当13空腹采血。采集血液4 mL，放置分离胶促凝管中，3 500 r／min(离心半径15 cm)离心15 min，取血清检测。

三、方法

       H-FABP测定采用双抗体夹心酶联免疫法，试剂盒由荷兰Hycult Biteehmology公司生产，严格按照试剂盒说明书操作。CK-MB mass测定采用酶免疫分析法，试剂由德灵公司提供，严格按照试剂盒说明书操作。cTnI 测定采用化学发光免疫分析法，试剂由美国Abbott公司提供，严格按照试剂盒说明书操作。正常参考范围：H-FABP为0—7．22ug/L，cTnI为0～0．022 ng/mL；阳性判断标准：H-FABP>7．22ug/L，cTnI>0．022 ng/mL。

四、统计学方法

       数据采用SAS 8e统计软件进行处理，计量数据均以±s表示，多组比较采用方差分析，组间比较采用最小显著差异(LSD)检验，计数资料的组间比较采用X2检验，P<0．05表示差异有统计学意义。

结果

一、H-FABP、CK-MB mass在不同组患者中的水平比较

       AMI 组H-FABP、CK-MB mass、cTnI 浓度明显高于UA组、SA组和对照组(P<0．05)；UA组H-FABP、CK-MB mass、cTnI 浓度高于SA组和对照组(P<0．05)；SA组H-FABP、CK-MB mass、cTnI 浓度与对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)，见表1。

二、H-FABP、cTnI、CK-MB mass检测性能指标比较

       H-FABP灵敏度、特异性、准确率、阳性预测值和阴性预测值高于CK-MB mass和cTnI(P<0．05)，见表2。

三、AMI患者早期H-FABP与cTnI 的阳性率比较

       在发病2 h内采血的32例AMI患者中，H-FABP阳性21例(65．63％)、cTnI 阳性6例(18．75％)，二者比较差异有统计学意义(P<0．05)；在发病2 h后采血的46例AMI患者中，H-FABP阳性45例(97．83％)、cTnI 阳性41例(89．13％)，二者比较差异无统计学意义(P>0．05)。

讨论

       心脑血管疾病是一种严重威胁人类生命健康的疾病，心肌损伤是由炎症、缺血、缺氧等因素导致心肌细胞发生水肿等病理改变，进而引起一系列心功能异常的病理过程。而许多心脏疾病的早期，尚无临床表现时就己经发生心肌损伤的病理变化。而且不同程度的心肌损伤，对心脏疾病的诊断及预后的判断有较大影响。心肌损伤标志物是由于缺血、感染、损伤等原因引起心肌细胞损伤、膜的通透性增加或细胞结构发生改变而出现于血液中反映心肌受损情况的生物化学指标。
       自1972年发现FABP以来，FABP已有小肠型(intestine type fatty acid-binding protein，I-FABP)、心型(H-FABP)、肝脏型(liver type fattyacid-binding protein，L-FABP)、肾脏型(kidney type fatty acid-binding protein，K-FABP)等不同的类型。不同型FABP的序列有较大的同源性，其中H-FABP是一种特异地大量存在于心肌组织中的可溶性细胞质蛋白，约占心脏全部可溶性蛋白的4％～8％。人H-FABP由132个氨基酸残基组成，其能与长链脂肪酸、视黄酸、某些有机阴离子等疏水性配体发生特异性结合，使脂肪酸在线粒体中氧化分解，为心肌收缩提供能量。
       随着人们对健康要求的增加，对健康意识水平的提高，往往在疾病的早期马上到医院就诊，AMI患者早期诊断对患者的后续治疗有着非常重要的意义。临床应用的检测指标如cTnI、CK-MB等，在AMI发病后的早期阳性率不高，在发病后4 h以上才有诊断价值。肌红蛋白(myoglobin，Mb)是目前早期诊断AMI的心肌标志物，虽出现较早，但特异性较差，尤其易受骨骼肌损伤的影响。本研究结果显示AMI 组H-FABP浓度明显高于UA组、SA组和对照组(P<0．05)；另外在AMI患者早期(2 h内)心肌缺血、缺氧、坏死时血清H-FABP浓度即可升高，其在外周血中升高的时间明显早于传统心肌标志物cTnI。从发病至采血间隔2 h内的32例AMI患者中H-FABP阳性21例(65．63％)，而cTnI 只有6例阳性(18．75％)，二者比较差异有统计学意义(P<0．05)。由此表明对于AMI早期，H-FABP的检测非常有意义。另外从发病至采血间隔2 h以上的46例AMI患者中，H-FABP阳性45例(97．83％)、cTnI 阳性41例(89．13％)，二者比较差异无统计学意义(P>0．05)。分析其原因，可能是发病至采血时间较长，cTnI 随着时间推移逐渐释放至外周血。由此可见H-FABP早期检测有助于临床对AMI患者的早期诊断，具有明显的临床价值。AMI患者早期确诊对于尽早治疗和治疗方案的选择具有重要意义。
       本研究结果还显示，H-FABP灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值均明显高于CK-MB mass和cTnI(P<0．05)。说明H-FABP是心肌损伤灵敏的指标，尤其在早期AMI诊断中具有较高的灵敏度和良好的特异性，优于传统心肌标志物cTnI。鉴于H-FABP在灵敏度、早期诊断特异性、检测时间窗等多方面的综合优势，具备了Wisconsin医学会推荐的理想心肌标志物应具备的标准，对AMI患者的早期诊断和治疗有着较高的临床价值，具有很好的应用前景。