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[分享] 攻略CHO细胞&CHO细胞培养基

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发表于 2024-1-24 09:13 | 显示全部楼层 |阅读模式

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CHO细胞(Chinese Hamster Ovary cells)是一种来自中国仓鼠卵巢的细胞系,最初在20世纪60年代初期由Thomas T. Puck博士和Paul L. Hamerton博士分离和建立。CHO细胞因其易于培养、稳定性强、对蛋白质翻译后修饰的能力以及广泛的生物药物生产应用而备受青睐。
CHO细胞的特性:

来源: CHO细胞来自中国仓鼠(Chinese Hamster)的卵巢组织。

形态特征: CHO细胞呈椭圆形状,通常以单层形式生长。它们具有较大的细胞核和胞浆。

生长特性: CHO细胞生长迅速,对培养条件适应性强,且易于维护。

染色体数目: CHO细胞是二倍体(diploid)细胞系,其染色体数目为22对。

蛋白质翻译后修饰: CHO细胞对蛋白质翻译后修饰的执行能力较强,包括糖基化、磷酸化等,使其在生物药物生产中特别受欢迎。

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CHO细胞的应用:

生物药物生产: CHO细胞是最常用的生物药物生产细胞系之一。它们被广泛应用于生产蛋白质药物,如单克隆抗体(mAb)、重组蛋白、生长因子等。CHO细胞对翻译后修饰的能力使得其生产的蛋白质更接近人体内源性蛋白质。

疫苗生产: CHO细胞也被用于一些疫苗的生产,例如重组蛋白疫苗。

基因表达研究: CHO细胞广泛用于基因表达研究。研究人员通过将外源基因导入CHO细胞,可以研究基因功能、蛋白质表达和细胞信号通路等。

细胞工程和基因编辑: CHO细胞也是细胞工程和基因编辑的重要工具。利用CRISPR-Cas9等技术,可以在CHO细胞中实现基因敲除、敲入等操作,用于优化生产性能和产物质量。

病毒学研究: CHO细胞在病毒学研究中也被使用,例如用于了解病毒感染机制、病毒颗粒形成等方面的基础研究。

CHO细胞以其优越的生物药物生产能力和生物相容性,在生物医学研究和制药工业中发挥着关键的作用。其应用领域涵盖了药物生产、基因表达研究、基因编辑、病毒学研究等多个方面。
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CHO细胞培养基是专门为中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)的培养而设计的一种培养液。培养基的成分直接影响着细胞的生长、健康和实验的可重复性。以下是一般性的CHO细胞培养基的组成和在科研及生产中的应用:
CHO细胞培养基的组成:

基础培养基: CHO细胞培养基通常包含一些基础培养基,如DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)或Ham's F-12等。这些基础培养基提供了细胞生长所需的基本营养成分。

氨基酸和蛋白质: CHO细胞培养基中会添加必需的氨基酸,以支持蛋白质合成和细胞生长。

维生素: 含有维生素,保证细胞对于生长和代谢所需的维生素。

无血清添加剂: 有时会使用无血清培养基,或添加血清替代物,以减少细胞培养中血清相关的变量,并提高对培养条件的控制。

能量源: CHO细胞培养基中包含葡萄糖等能量源,以供细胞进行代谢。

抗生素和抗真菌剂: 为了防止细胞培养过程中的细菌或真菌污染,通常添加抗生素,如青霉素-链霉素。

缓冲剂: 用于维持培养液的酸碱平衡。通常使用HEPES或二氧化碳气氛控制来调节pH。

CHO细胞培养基的应用:

药物生产: CHO细胞培养基被广泛用于生物药物生产,特别是蛋白质药物,如单克隆抗体(mAb)、重组蛋白等。CHO细胞的稳定性和对蛋白质翻译后修饰的能力使其成为药物生产的理想细胞系。

疫苗生产: CHO细胞也用于一些疫苗的制备,包括重组蛋白疫苗。

基因表达研究: CHO细胞培养基在基因表达研究中扮演重要角色,通过导入外源基因,研究人员可以探究基因功能、蛋白质表达和细胞信号通路等。

基因编辑和细胞工程: CHO细胞也是细胞工程和基因编辑的重要工具。利用CRISPR-Cas9等技术,可以在CHO细胞中实现基因敲除、敲入等操作,用于优化生产性能和产物质量。

CHO细胞培养基在科研和生产中的应用为药物生产、基因表达研究、基因编辑等领域提供了一个可靠的平台。CHO细胞作为工业制药领域的主力细胞系,已成为制备生物药物的关键工具之一。
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CHO细胞在生物药物生产中的应用:

单克隆抗体生产: CHO细胞是最常用的单克隆抗体(mAb)生产细胞系之一。由于CHO细胞对蛋白质翻译后修饰的能力,尤其是糖基化和其他翻译后修饰的相似性,使得通过CHO细胞生产的单克隆抗体更接近于人体内源性的抗体。

重组蛋白生产: CHO细胞也广泛用于生产其他种类的重组蛋白,如生长因子、细胞因子、酶等。这些重组蛋白在生物药物研究和治疗中有着广泛的应用。

蛋白质药物生产: CHO细胞被用于制备多种类型的蛋白质药物,包括抗体药物、融合蛋白、抗体-drug conjugates(ADCs)等。CHO细胞的高产性和稳定性使其成为制备这些药物的理想选择。

生物制剂生产: 除了抗体和蛋白质药物,CHO细胞还用于生产其他类型的生物制剂,如重组糖蛋白等。

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CHO细胞在疫苗生产中的应用:

病毒疫苗生产: CHO细胞被用于制备一些病毒疫苗,其中最突出的例子之一是HPV病毒疫苗(人乳头瘤病毒疫苗)。CHO细胞能够支持HPV病毒样粒子(VLPs)的生产,这些VLPs在疫苗中起到诱导免疫反应的作用。

蛋白质亚单位疫苗生产: CHO细胞也可以用于生产一些蛋白质亚单位疫苗,其中的病原体蛋白质片段或亚单位通过CHO细胞表达并用于疫苗制备。

重组疫苗生产: 一些重组疫苗,如含有细胞因子或生长因子的疫苗,也可以通过CHO细胞表达和生产。

CHO细胞在生物药物和疫苗生产中的应用得到了广泛认可,其优越的生长特性、对蛋白质翻译后修饰的能力,以及可伸缩性较好的生产工艺,使得CHO细胞成为生物制药工业中的主要工具之一。

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