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[技术] 动物模型 | 新生大鼠缺血缺氧性脑损伤模型构建及评价

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发表于 2022-12-5 13:25 | 显示全部楼层 |阅读模式

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围生期缺血缺氧性脑损伤(neonatalhypoxic—ischemicbrain damage,HIBD) 是指围生期中的胎儿或新生儿由于各种原因引起的脑组织血液供给的减少或暂停而引起的一种疾病。如果不经积极治疗,患儿的死亡率高,存活者常遗留下或轻或重的神经系统后遗症,给家庭和社会带来了沉重的负担。在缺氧缺血性脑损伤的研究中,建立合适的缺氧缺血性脑损伤动物模型十分重要。现将目前国内外学者建立的 HIBD 大鼠模型的各种方法总结如下。

新生鼠HIBD模型的建立


方法1 :结扎一侧新生 7 d 大鼠的颈总动脉,在含氧 8% 的环境中将缺氧与缺血相结合。

模型评价:该模型的最大不足是无法较好的模拟宫内复杂的宫内环境,不能理想地再现由于胎盘宫内不全或脐带伊苏或母体原因造成的胎儿缺血缺氧是的临床病理生理多样性与复杂性。

方法2 :新生大鼠颈部正中切口,分离一侧颈总动脉并进行阻断,在恢复血供 60 ~ 90 min 后放入氧浓度为 8% 的缺氧环境 2 h 制作新生大鼠缺血缺氧性模型,该方法可用于研究高压氧对新生大鼠脑 HIBD 后转化生长因子 β 表达的影响。

模型评价:该方法能较好地模拟窘迫后脑损伤后的病理表现,同时该模型具有易复制、成功率高、价格低、容易批量研究等优点。但其最大的不足在于无法较好地模拟宫内复杂的环境。

钳夹结扎孕鼠HIBD模型的建立


方法1 :钳夹孕鼠双侧子宫动脉 30 min,研究子宫胎盘缺血对胎鼠体重及神经系统发育造成的不良影响。通过钳夹孕 21 d 的 Wistar 大鼠的双侧子宫动、静脉,用以研究宫内窘迫胎鼠脑组织与肝组织氧自由基的损伤。

模型评价:此种方法造成新生大鼠左侧脑组织缺氧缺血性脑损伤病理学评分较高,并且早产新生大鼠全脑组织呈缺氧缺血性病理学改变。可用胎鼠制作胎儿宫内窘迫动物模型,因鼠在缺氧缺血后可以存活很长时间所以更适合长期研究,但胎鼠在子宫内是靠子宫和卵巢的血管共同摄取养分,建模时中如果单结扎子宫的血管,靠在子宫上段的胎鼠就会缺血缺氧不充分,不能很好的模拟临床宫内窘迫后脑损伤状况,可能人为造成实验结果的偏差。

方法2 :利用妊娠 20 d 大鼠,钳夹进入每个胎盘的血管共 15 min,制成宫内窘迫胎鼠模型,在无菌环境条件下,剖开腹部,用止血钳完全阻断子宫体、子宫角的动脉血管,造成乳鼠急性脑缺氧缺血,致使脑部发生病理改变以及存活乳鼠行为的变化。

模型评价:结扎临产大鼠子宫,可造成乳鼠急性脑缺氧缺血动物模型,此法操作简单、快速,脑缺氧缺血彻底,乳鼠脑部病理改变明显,存活的乳鼠出现程度不同的神经麻痹疾病症状。

方法3:钳夹妊娠 17 d 的雌性大鼠双侧子宫及卵巢动脉半小时,钳夹过程中不断更换覆盖于暴露在腹腔外的胎盘上温生理盐水纱布,保持温度37°C,建立简便、可靠的大鼠宫内发育迟缓模型。

模型评价:此模型的优点是操作方法简单、胎鼠死亡率低,成功率较高等。同时阻断子宫与卵巢血管是一种更为科学合理的复制缺血缺氧性脑损伤动物模型的方法。充分模拟宫内窘迫造成的缺血缺氧性脑损伤,实验证实,此模型是模仿临床围生期胎儿窘迫较为理想的动物模型。与其他方法相比,此模型可以在临床表现及脑部病理改变上达到一致。

小结


围生期大部分损伤是从子宫内就已经开始的,所以复制与人类宫内缺血缺氧性脑损伤环境相类似的动物模型是上述研究的一个重要条件。近些年围生期缺血缺氧性脑损伤研究进展得益于各种动物模型的广泛应用,其中大鼠围生期缺血缺氧性脑损伤模型最为常用,但每种模型都有各自的优缺点,选择最适当的动物模型有助于更好地进行实验性研究。

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