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[分享] 化学发光试剂中ProClin300使用注意事项

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发表于 2021-11-4 09:43 | 显示全部楼层 |阅读模式

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Proclin300是在体外诊断试剂中使用非常广泛的一种抑菌剂,主要活性成分是两种异噻唑啉酮的混合物,包含甲基氯异噻唑啉酮(5-Chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one, CMIT)和甲基异噻唑啉酮(2-Methyl-4-isothiazolin-3-one, MIT),含量比例为3:1,这种混合物的含量在3.0-3.6%。广泛应用于生化试剂、免疫试剂、凝血试剂、分子生物试剂、电泳液、PCR/DNA检测相关的缓冲剂、血细胞分析试剂、各种稀释液、缓冲液、清洗液等。

  PC300抑菌原理:两种主要活性成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分在与细胞膜接触几分钟后,立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性。目标酶处于细胞代谢KREBS 循环的中心位置, PC-300 抑菌剂作用KREBS 循环的四个不同位置(见左图):丙酮酸脱氢酶( pyruvate dehydrogenase),a -酮戊二酸脱氢酶( ketoglutarate dehydrogenase),琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和NADH 脱氢酶(NADH dehydrogenase)。从而抑制细胞生长代谢,大分子的合成,引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃,细胞不能合成日常代谢所需要的化合物。所有的细菌及真菌至少拥有部分KREBS 循环,所以牛莎PC-300 抑菌剂的适用范围非常广泛。
ProClin300配方是一个不含水、不含金属离子的配方,因此在化学发光试剂里面使用更加普遍,但有以下需要注意。

使用牛莎PC-300抑菌剂(等同于西格玛Proclin300)使用时的注意事项:
1、PC300抑菌剂本身就是双抑菌系统,在抑菌能力上会更优,同时具有快杀功能,适用范围广,所以也是优选选择使用的抑菌剂。
2、试剂PH>8.5时,不适合使用PC300,建议使用牛莎PC-950、牛莎BIT-10抑菌剂。
3、在浓缩缓冲液中,不适合使用高浓度的PC300,容易出现发黄,甚至会出现沉淀析出。在浓缩配方中,建议使用少量PC300,比如0.05%PC300,再以牛莎Pc-950、牛莎BND-10、牛莎BIT-10、牛莎GML-2等抑菌剂为主,后面这些防腐剂不会出现发黄的现象(具体配方不同,使用稍有区别)。
4、部分项目会出现单独使用PC300抑菌效果不理想的现象,这时单独提升PC300浓度,还不如添加第二种抑菌剂(比如牛莎BND-10)组合使用,多抑菌系统抑菌效果会更好,同时可以避免发黄现象发生。
5、PC300抑菌剂是一个不含水和金属离子的配方,在使用的时候注意核对COA文件,各指标含量是否明确,特别主要镁离子、铜离子等金属离子的含量是否超标(生化分析仪的检测可以是一个简易的方案)

  牛莎PC-300抑菌剂等同于西格玛Proclin300防腐剂,高效液相检测的主要活性成分一致,其他成分的含量也基本一致,同时抑菌能力的检测也基本一致,价格却只有西格玛的三分之一,在国内许多知名IVD企业使用,同时出口欧美。

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