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[分享] 重组核酸酶的典型应用

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发表于 2021-7-5 15:46 | 显示全部楼层 |阅读模式

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重组核酸酶的典型应用
应用 1:RSN 用于蛋白样品的制备——降低大肠杆菌裂解液的粘度

核酸酶的加入能快速水解核酸,导至粘度降低,从而减少工艺时间而提高蛋白质产量。

1.1 实验设计
两个 1mL 大肠杆菌培养液离心收集细胞并重悬于 40μL 的 50mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液,含有 6%SDS,600mM
β-me 和 25U 的核酸酶,相当于 25U/mL 终浓度。所有样品在 4℃温育 5 分钟,然后以 10000 x g 离心 1 分钟。
1.2 Results

1.2 实验结果
样品不含核酸酶(A,B)保持高粘度,离心后,上清液和颗粒之间没有明确的界限。然而,含核酸酶的样品(C,
D)显示粘度大幅度降低。(见图一)
图一 大肠杆菌裂解液:A,B 不加 RSN;C,D 加入 25U/mL RSN


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