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[分享] ivd体外诊断生化试剂盒原料中的生物缓冲剂有哪些?

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发表于 2020-1-10 14:05 | 显示全部楼层 |阅读模式

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双羟乙基甘氨酸
  Bicine是一种非常广泛的Buffer,用于酶反应缓冲液,电泳缓冲液,工作浓度从3-100mM。生物缓冲剂低温生化工作中推荐Buffer,用在制备稳定的底物溶液,用于血清鸟嘌呤酶测定。
【英文名】N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine
  【中文名】N,N-二羟乙基甘氨酸
  【简称】BICINE
  【CAS#】150-25-4
  【分子量】163.17
  【分子式】C6H13NO4
  【存储条件】室温,避光防潮
  【化学结构】
  
  【用途】Bicine是一种非常广泛的Buffer,用于酶反应缓冲液,电泳缓冲液,工作浓度从3-100mM。生物缓冲剂低温生化工作中推荐Buffer,用在制备稳定的底物溶液,用于血清鸟嘌呤酶测定。
【产品优势】纯度≥99%,水溶性好,工艺稳定,可保证产品外观为纯白色晶体粉末。
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 楼主| 发表于 2020-1-13 09:17 | 显示全部楼层
Tris缓冲剂
  经常配合使用,比如Tris-HCl,Tris-Gly,TAE,TBE等
  【英文名】Trometamol
  【中文名】三羟甲基氨基甲烷
  【简称】Tris
  【CAS#】77-86-1
  【分子量】121.135
  【分子式】C4H11NO3
  【存储条件】室温,避光防潮
  【外观】白色晶体粉末
  【分子结构】

  【用途】用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备;医药中间体;用于表面活性剂、硫化促进剂的制备;制备含Tris结构单元的水溶性高分子作为涂料分散剂;室内甲醛吸附材料的制备等。
  【产品优势】纯度≥99%,水溶性好,工艺稳定。
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 楼主| 发表于 2020-1-17 11:55 | 显示全部楼层
TAPS缓冲剂
【英文名】3-[Tris(hydroxymethyl)methylamino]-1-propanesulfonic acid
  【中文名】N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸
  【简称】TAPS
  【CAS#】29915-38-6
  【分子量】243.28
  【分子式】C7H17NO6S
  【存储条件】室温,避光防潮
  【化学结构】
  
  【用途】作为DNA筛分体系中常用的缓冲液体系,也可作为RNA样品的缓冲液成分,适用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究,在冷冻干燥过程中保护氧合血红蛋白氧化为高铁血红蛋白,也可作为毛细管区带电泳进行蛋白微量分析的背景电解质。
  【产品优势】纯度≥99%,水溶性好,工艺稳定,可保证产品外观为纯白色晶体粉末。
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 楼主| 发表于 2020-1-18 16:00 | 显示全部楼层
CAPS缓冲剂
【英文名】N-Cyclohexyl-3-aminopropanesulfonic acid
  【中文名】3-(环己胺)-1-丙磺酸
  【简称】CAPS
  【CAS#】1135-40-6
  【分子量】221.32
  【分子式】C9H19NO3S
  【存储条件】室温,避光防潮
  【化学结构】
  
  【用途】现在蛋白质的PVDF转膜已经不用Tris-gly、SDS、20%甲醇缓冲液,因为缓冲液中有甘氨酸,所以测序的时候很难区分甘氨酸是Buffer带进去还是蛋白质本身的,现在测序用的转膜缓冲液是10mM/1CAPS10%甲醇,CAPS电印记缓冲液中的甲醇浓度范围是0~20%,一般甲醇浓度高的缓冲液对低分子量蛋白质的转移效果好,而甲醇浓度低甚至不含甲醇的缓冲液则有利于高分子量蛋白的转移。
【产品优势】纯度≥99%,水溶性好,工艺稳定,可保证产品外观为纯白色晶体粉末。
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 楼主| 发表于 2020-5-20 11:10 | 显示全部楼层
血清中鸟嘌呤酶催化鸟嘌呤水解脱氨变成黄嘌呤,人体内此酶主要存在与肝组织,仅有少量存在于脑、肾;像脾、胰、心、肺、肌肉、红白细胞等均无或极微量。此酶主要存在与干细胞的胞浆中,故GD的测定被认为是肝细胞疾病的特异性诊断指标。
血清鸟嘌呤酶测定通常会用到Bicine缓冲剂和MOPSO缓冲剂。

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 楼主| 发表于 2020-5-21 14:08 | 显示全部楼层
Bicine缓冲液 的配制方法 1-2L
  (1)配0.1M溶液(A): Bicine 16.317g/去离子水 1,000ml
  (2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml
  (3)pH 5.1 1,000ml(A) 0ml(B) (A):(B)=5:0
  pH 7.8 1,000ml(A) 200ml(B) (A):(B)=5:1
  pH 8.2 1,000ml(A) 400ml(B) (A):(B)=5:2
  pH 8.6 1,000ml(A) 600ml(B) (A):(B)=5:3
  pH 10.4 1,000ml(A) 800ml(B) (A):(B)=5:4
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 楼主| 发表于 2020-7-31 10:58 | 显示全部楼层
EPPS缓冲液的配制方法
(1)配0.1M溶液(A): EPPS 25.233g/去离子水 1,000ml
(2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml
(3)pH 5.2  1,000ml(A) 0ml(B)      (A):(B)=5:0
    pH 7.3  1,000ml(A) 200ml(B)  (A):(B)=5:1
    pH 7.8  1,000ml(A) 400ml(B)  (A):(B)=5:2
    pH 8.2  1,000ml(A) 600ml(B)  (A):(B)=5:3
    pH 8.8  1,000ml(A) 800ml(B)  (A):(B)=5:4
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 楼主| 发表于 2020-8-5 09:05 | 显示全部楼层
配置缓冲液时,溶液中如果要去除钠离子,则可以用氢氧化钾代替氢氧化钠使用
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 楼主| 发表于 2020-8-7 17:28 | 显示全部楼层
需要注意的是,在配置缓冲液时,温度需要控制在20℃,按比例配置的是大致的pH,如果需要调整到特定的pH值,需要采用pH计来调整加入Bicine、EPPS或者氢氧化钠溶液的量。
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 楼主| 发表于 2020-8-12 14:55 | 显示全部楼层
HEPES即4-羟乙基哌嗪乙磺酸,其具有很多优点,对细胞无毒性作用,是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。根据实验的不同,HEPES buffer缓冲液的配制方法也有差异。通常有HEPES配合氢氧化钠NaOH,HEPES+盐,还有加入氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、葡聚糖等
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 楼主| 发表于 2020-8-14 17:11 | 显示全部楼层
HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸):属于两性离子生物缓冲剂,属于Good’s缓冲液,有效缓冲范围6.8~8.2,可广泛应用于多种生物化学反应,并在某些细胞培养基中用作缓冲试剂。其使用终浓度为10~50mmol/L,一般培养液内含20mmol/L即可达到缓冲能力。
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 楼主| 发表于 2020-9-7 17:20 | 显示全部楼层
HEPES即4-羟乙基哌嗪乙磺酸,无细胞毒性,HEPES缓冲液常用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作,以及生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
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 楼主| 发表于 2020-9-11 16:40 | 显示全部楼层
生物缓冲剂溶液的配置非常简单,只需要按厂家提供的比例配置就行,现配现用,方便迅速,而且可以节省大量的采购挑选时间,粉末保质期更长。要求非常高的可以借助pH计做小幅度比例调整。
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 楼主| 发表于 2020-9-15 11:41 | 显示全部楼层
如果需要使用的缓冲剂量不大,想节约时间的话也可以联系厂家订购即用型的生物缓冲液,直接根据所需要的的浓度以及pH值选择就行。
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 楼主| 发表于 2020-9-28 10:53 | 显示全部楼层
三羟甲基氨基甲烷Tris缓冲液应用越来越广泛,尤其是核酸DNA相关的研究实验中,比PBS磷酸盐缓冲液更有优势。
另一方面,Tris也是合成另一种生物缓冲剂TAPS的重要原料。
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 楼主| 发表于 2020-11-9 13:48 | 显示全部楼层
Tris三羟甲基氨基甲烷这种生物缓冲剂同时也是化工合成中的重要原料,市场需求量比很多缓冲剂要大。很多进出口的都是找贸易商,像产量比较大的厂家合作也是比较好的
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 楼主| 发表于 2021-8-25 17:29 | 显示全部楼层
三羟甲基氨基甲烷比较常见的就是用作Tris缓冲剂,也有很多客户是做环氧树脂、水性涂料一类的,还有就是防火材料、复合热力学材料等等
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