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[讨论] 酶校准品对血清酶测定标准化的影响

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发表于 2019-9-29 09:22:49 | 显示全部楼层 |阅读模式

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目前,用于血清酶定量测定的方法通常以测定酶的活性为主,即酶的催化反应速率。由于不同实验室使用的酶校准品不同以及酶蛋白本身的生物特点及其对催化反应条件要求的特殊性,使不同实验室的测定结果间存在较大的差异,可比性较其他检测项目差距大。血清酶测定是临床化学重要的常规工作,检测结果对疾病的诊断及治疗监测有着很大的参考价值。伴随基础研究的深入,人源酶制品特别是源于基因工程的酶制品,其线性度和稳定性都有了很大提高,酶参考品(referencemateria1)和酶校准品fcalibrator)的大量成功制备为其在临床实验室中的应用奠定了基础。
本次试验结果通过酶校准品的应用,探讨血清酶活性测定时准确度的溯源性,比较不同酶校准品使前后测定结果间的离散程度,为进一步开展血清酶定量测定标准化工作提供实验数据。
1材料
不同酶校准品(RocheRandox)各1支
仪器使用TBA120全自动生化分析仪
试剂使用九强公司生产的金斯尔试剂
2试验方法
不用校准品,用给定的系数(K值)计算酶活性:3个水平的质控品样本3支,按照现行操作规程要求进行室内质控测定,分别测定3个水平的质控品样本,每个样本做双份测定,记录检验结果。
Roche酶校准品1支输入酶校准品的标示值,进行定标。分别测定3个水平的质控品样本,每个样本做双份测定,记录检验结果。
Randox酶校准品1支输入酶校准品的标示值,进行定标。分别测定3个水平的质控品样本,每个样本做双份测定,记录检验结果。
1.jpg 2.jpg
3结果
分别对3个水平的质控品使用Roche校准品后,使用Randox校准品后,使用给定系数(K值)进行测定结果进行比较
使用酶标准品后其结果的均值与质控品给出标示值间的相对偏倚≤6%的项目有ALT、AST、AMY和LD,表明这4种检测项目具有较好的溯源性。
ALP、GGT、和CK使用酶标准品后检测结果均值与质控品给出标示值间的相对值偏倚在10%~20%,提示3种酶实验室测定结果的可溯源性较差。
而使用K值的结果除ALT、AST外,其它项目均偏倚10%一20%。
4讨论
目前,多数临床实验室在测定血清酶活性时不用校准品,而是根据仪器系统特性,用给定的系数(K值)计算酶活性。虽然,一些学术团体(如国际临床化学联合会,IFCC)也已推出了血清酶活性测定的推荐方法及试剂配方,但众多生产厂家生产的试剂间仍不可避免地存在着差别(如底物浓度,缓冲液组成、PH及浓度,辅酶纯度及浓度),这些因素在不同程度上影响到用K值计算出的酶活性结果。本次试验结果表明,在应用校准品后,多数测定结果的变异系数(CV%)得到不同程度的改善,ALT由10%~44%下降至8%一42%,LD由16%一39%下降至8%一11%(表46o因此,正确应用酶校准品,除可提高测定的准确性外,还可以提高实验室间测定结果的一致性。
酶学标准物或参考物是血清酶活性测定标准化过程中必要的条件之一,为由仪器、试剂和校准品组成的分析系统提供了准确度溯源的依据,同时,也使由于不同系统间差别造成的测定结果的不一致性得到改善。
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