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纳兰烙烙

编者按：

小编最近在阅读药源性疾病，发现肝脏类的血清标志物很少在市场上出现，这是一个不错的研发项目，现在分享给大家。

节选《药源性肝损伤潜在血清生物标志物的研究进展》

                              

肝脏是药物作用的主要靶器官，在药物代谢方面 起着极其重要的作用。临床上由药物导至的肝损伤（DILI） 是诱发肝脏疾病的主 要因素之一，也是药物研发过程中存在的主要问 题 。因此，早期预测药源性肝损伤可减少研发损耗 及人类患肝脏疾病的概率。

肝细胞损伤相关的血清生物标志物

1.1 微小RNA（microRNA，miRNA）

microRNA是一类起源于肝脏的内源性小分子非编 码单链RNA，长约19-24 个核苷酸，在生理和病理过 程中均具有重要作用。

2008年 等发现了循环血液中microRNA的存在，为其作为非侵入性生物标志物奠定了基础。研究表明，microRNA在免疫、肝细胞分化及癌症中均发挥重要作用。近年的研究显示microRNA具有传统生物标志物无法比拟的优势，如较高的敏感性和特异性、个体差异小以及具备区分肝损伤和肝外损伤的能力等。

微小RNA-122对肝损伤和肝外损伤（如脑损伤和肌肉损伤）较传统指标更具特异性，且与肝脏组织病理学改变有良好的相关性。目前，循环微小RNA-122 已经用于临床各种肝脏疾病的诊断研究，包括肝细胞癌、乙型肝炎、肝硬化以及酒精性和化学性肝脏疾病等。

肝细胞损伤相关的血清生物标志物

1.2 α-谷胱甘肽-S 转移酶（α-glutathione-S-transfer-ase，α-GST）

α-GST 是肝脏药物代谢Ⅱ相反应中重要的药物代谢转移酶，可以催化Ⅰ相代谢产物与谷胱甘肽结合而起到解毒作用。α-GST主要存在于肝小叶中心细胞，相对分子质量小，更易透过受损伤的细胞膜，对肝损伤更加敏感。且α-GST在红细胞中不表达，不受溶血影响，其测量更加准确。此外，像肌肉坏死等因素并不能引起α-GST的变化，因此，α-GST预测DILI比ALT 特异性更高。到目前为止，α-GST的检测方法已经建立并被少数临床机构用于肝癌患者的检测。

肝细胞损伤相关的血清生物标志物

1.3　嘌呤核苷磷酸化酶（purine nucleoside phospho- rylase，PNP）

PNP是嘌呤补救途径的一个关键酶，能可逆地催 化核苷磷酸分解为相对应的基团及Ｌ-脱氧核糖磷酸 盐，参与ATP的降解。在细胞坏死时释放到血液中。

ALT主要存在于肝细胞中，PNP主要位于肝窦内皮细 胞和枯否细胞中，因此在未出现ALT 活性变化的情况 下，PNP的活性改变有可能成为肝非实质性细胞损伤 的可靠标志。

有研究表明，在肝脏缺血再灌注损 伤过程中，PNP活性增强，奠定了其作为肝损伤生物 标志物的基础。

但也有研究显示，PNP的改变是 不连续的，且无法有效反映临床患者的肝损伤。因 此，将其作为ＤＩＬＩ 的标志物还需要进一步的验证.

肝细胞损伤相关的血清生物标志物

1.4 谷氨酸脱氢酶（ glutamate dehydrogenase， GLDH）

GLDH是一个线粒体酶，其分布多局限于肝脏的 中央小叶，参与氨基酸的氧化及尿素的产生。血液中 GLDH 的活性基本来自于肝脏。因其敏感性高，且不 易受药物影响，因此能准确反映肝损伤。

GLDH活性不受吡哆醛-５′-磷酸药物（如异烟 肼）的抑制以及年龄和性别的影响，并且和ALT 升高有极强的相关性，对于肝损伤的预测更具潜 能。

研究发现，肌肉损伤并不影响 GLDH,肯定了其作为DILI潜在标志物的可靠性。

的研究显示与ALT相似， GLDH在肝 细胞坏死后释放到血液循环中。 GLDH的半衰期短， 能迅速降低，可以反映肝损伤的预后，使其与ALT相 比更有潜力。

但在APAP过量时， GLDH与APAP的 代谢产物共价结合而使其活性被抑制，从而低估肝损 伤的严重性。

另外， GLDH对翻译后修饰比较敏感， 如肝损伤机制中酪氨酸的硝化作用或蛋白质氧化，均 能引起其失活或被抑制 。

同时， GLDH是一个典型 的变构酶，很多变构酶激活剂和抑制剂能影响其催化 活性。因此在预测DILI 时应排除酶自身变构性质的 改变或变构调节剂的干扰 。

肝胆管损伤相关的血清生物标志物

Ｔ-激肽原，是一种大鼠特异性急性时相蛋白，主 要在肝脏中表达。肝损伤时在血液和尿液中都有升 高，并且呈时间-剂量依赖性关系，其升高和靶器官中 相关基因的表达及组织病理学变化都有良好的相关 性，其改变可以反映肝损伤的起始及损伤程度。

研 究表明血液中的Ｔ-激肽原更适合作DILI标志物， 因为尿液中Ｔ-激肽原出现时间较晚。

研究 发现，与传统肝毒性评价指标相比，Ｔ-激肽原增加明 显，也更灵敏。

Ｔ-激肽原 可以作为一个敏感而非特异的炎性反应和组织损伤 标志物。目前Ｔ-激肽原的研究仅限于大鼠而未见人 类相关的研究报道，因此，Ｔ-激肽原在临床上的应用 还需要进一步验证。

肝脏整体功能评价相关的血清生物标志物

对氧磷酶（PON-1）是一种抗氧化 酶，广泛分布于肝、肾、肠和脑组织中，以肝脏和血液 中活性最高。

在有机磷酸盐解毒及低密度脂蛋白 抗氧化过程中起重要作 用，肝损伤时血液中的PON-1活性变化明显。与其他 漏出酶不同，PON-1是和高密度脂蛋白 结合起来释放到血液循环中。

结 果表明在肝损伤的早期微粒体PON-1的活性已经受 到明显抑制，并随着脂质过氧化和肝损伤程度的加重 而进一步降低。由此预测PON-1 可以作为DILI 的早 期生物标志物。