宫颈癌筛查方法的模式演变——HPV检测未来的发展趋势

木吉火丁

子宫颈癌是女性最常见的癌症之一，仅次于乳腺癌。全世界每年约有50万新发子宫颈癌病例，亚洲约38万，中国约15万例，全世界每年约23万妇女死于宫颈癌，亚洲约19万，中国约8万，尤其是中国中西部农村，由于缺乏资金和医疗技术，使广大妇女的身心健康和生命安全受到严重威胁。以往通用的子宫颈癌及癌前病变的诊断主要遵循“三阶梯式”诊断程序，即宫颈细胞学、阴道镜及组织病理学检查。宫颈细胞学检查是普遍应用的宫颈癌及癌前病变的筛查方法，但受其方法学所限，存在一定的漏诊和误诊率，无法大范围覆盖普及。随着科学的发展，子宫颈癌病因学研究确认了人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是宫颈癌发生的必要条件，研究表明从HPV感染到发展成为宫颈癌一般要经历10-20年的时间，因此通过HPV检测进而积极随访、治疗可以预防宫颈癌及癌前病变的发生，从而降低宫颈癌的发生率和死亡率。

为落实深化医药卫生体制改革重点工作任务，提高农村妇女宫颈癌和乳腺癌（以下简称“两癌”）的早诊早治率，降低“两癌”死亡率，提高广大农村妇女健康水平，逐步建立维护妇女健康的长效机制，国家卫生计生委、财政部、全国妇联继续实施农村妇女“两癌”检查项目，中国国家卫生计生委妇幼司组织制定了《农村妇女“两癌”检查项目管理方案》，于2014年启动HPV检测试点项目，在全国28个省（区、市）为54.6万35-64岁农村妇女采用HPV检测方法进行宫颈癌初筛试点。

2015年11月26日，国家食品药品监督管理总局（CFDA）发布《人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测及基因分型、试剂技术审查指导原则》，该指导原则旨在指导注册申请人对人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测及基因分型试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。此指导原则的发布，预示着中国HPV检测领域倾向于与国际接轨，从临床实际应用出发，注重临床验证数据，中国的HPV检测将更加规范化、专业化、国际化。

表1. 国内主要HPV产品CFDA注册情况一览

序号	公司名称	注册号	产品名称
1	雅培贸易(上海)有限公司	国食药监械(进)字2013第3403433号	人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒(荧光PCR法)
2	罗氏诊断产品(上海)有限公司	国械注进20143405904	人乳头状瘤病毒(HPV)检测试剂盒(PCR荧光法)
3	北京英硕力新柏科技有限公司	国食药监械(进)字2014第3402263号	人乳头状瘤病毒检测试剂盒(捕获杂交法)
4	北京英硕力金柏科技有限公司	国食药监械(进)字2012第3401532号	16/18型人乳头状瘤病毒分型检测试剂盒(酶切信号放大法)
5	深圳创强医疗器械有限公司	国食药监械(进)字2012第3404427号	人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
6	凯杰企业管理(上海)有限公司	国械注进20163404575	高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒（杂交捕获二代法）
7	豪洛捷医疗科技(北京)有限公司	国食药监械(进)字2014第3404844号	人乳头状瘤病毒16  18/45基因型检测试剂盒(捕获杂交法)
8	亚能生物技术(深圳)有限公司	国食药监械(准)字2014第3400590号	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国食药监械(准)字2014第3401228号	人乳头瘤病毒基因分型(23型)检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)
		国食药监械(准)字2014第3401227号	人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)
9	潮州凯普生物化学有限公司	国械注准20143402188	人乳头状瘤病毒(HPV)分型检测试剂盒(PCR+膜杂交法)
		国食药监械(准)字2012第3401448号	高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
		国械注准20153401700	人乳头瘤病毒(23个型)核酸分型检测试剂盒(荧光PCR法)
		国械注准20153401574	13种高危型人乳头状瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国械注准20143401891	37种人乳头状瘤病毒分型检测试剂盒(PCR+导流杂交法)
10	上海透景生命科技有限公司	国械注准20143402154	人乳头瘤病毒核酸检测与16/18分型试剂盒(荧光PCR法)
		国械注准20143402153	人乳头瘤病毒核酸检测与16/18/52/58/33分型试剂盒(荧光PCR法)
		国食药监械(准)字2014第3400847号	人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒(流式荧光杂交法)
		国食药监械(准)字2013第3400306号	高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(流式荧光杂交法)
11	上海之江生物科技股份有限公司	国械注准20153400078	人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型核酸测定试剂盒(荧光PCR法)
		国械注准20153400044	高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型核酸测定试剂盒(荧光PCR法)
		国械注准20143401826	人乳头瘤病毒(HPV)6型、11型核酸测定试剂盒(荧光PCR法)
12	中山大学达安基因股份有限公司	国食药监械(准)字2014第3400853号	人乳头瘤病毒(6/11型)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
		国食药监械(准)字2014第3400852号	人乳头瘤病毒(16/18型)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
		国食药监械(准)字2012第3401175号	人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)
		国食药监械(准)字2012第3400104号	高危型人乳头瘤病毒(8个型)核酸定量检测试剂盒(PCR荧光法)
13	泰普生物科学(中国)有限公司	国械注准20143401928	人乳头瘤病毒(HPV)6型、11型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国械注准20143401927	人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国食药监械(准)字2012第3401028号	人乳头瘤病毒(5个型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国食药监械(准)字2012第3401027号	人乳头瘤病毒(23个型)基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)
		国食药监械(准)字2012第3401026号	人乳头瘤病毒(13个型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国食药监械(准)字2012第3400695号	人乳头瘤病毒(6、11型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
14	广州安必平医药科技有限公司	国食药监械(准)字2013第3400476号	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
		国食药监械(准)字2013第3401900号	人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法）
15	北京华大吉比爱生物技术有限公司	国食药监械(准)字2013第3401067号	人乳头瘤病毒(16种型别)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国食药监械(准)字2013第3400984号	人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
16	上海复星长征医学科学有限公司	国食药监械(准)字2012第3401428号	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
17	北京康美天鸿生物科技有限公司	国食药监械(准)字2012第3401687号	14种高危人乳头瘤病毒核酸检测与16/18分型试剂盒(荧光PCR法)
		国食药监械(准)字2014第3401238号	人乳头瘤病毒14种型别检测与16/18分型检测试剂盒(荧光探针PCR法)
18	港龙生物技术(深圳)有限公司	国械注准20153401872	人乳头瘤病毒分型检测试剂盒(基因芯片法)
		国械注准20153401573	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)
		国食药监械(准)字2012第3400467号	低危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)
19	北京金菩嘉医疗科技有限公司	国食药监械(准)字2014第3400897号	人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒(表面等离子谐振法)
20	无锡市申瑞生物制品有限公司	国食药监械(准)字2014第3401512号	人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)
		国食药监械(准)字2014第3401511号	人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)
21	广州好芝生物科技有限公司	国食药监械(准)字2012第3401325号	人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)
22	凯杰生物工程(深圳)有限公司	国食药监械(准)字2013第3401127号	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(商品名：pgHPV  PCR Assay)
		国械注准20163401209	高危型人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测试剂盒(杂交捕获-化学发光法)
23	陕西阳光生物工程股份有限公司	国食药监械(准)字2012第3401606号	人乳头状瘤病毒(HPV)16型、18型、6B型、11型检测试剂盒(PCR-荧光偏振法)
24	江苏硕世生物科技有限公司	国械注准20153400364	人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒(荧光PCR法)
25	江苏默乐生物科技有限公司	国食药监械(准)字2014第3400587号	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
26	厦门安普利生物工程有限公司	国食药监械(准)字2014第3400483号	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
27	武汉百泰基因工程有限公司	国械注准20143402246	人乳头瘤病毒(6,11型)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
		国食药监械(准)字2012第3400952号	人乳头瘤病毒(16,18型)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
28	上海科华生物工程股份有限公司	国械注准20163401433	高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
		国食药监械(准)字2014第3401641号	人乳头瘤病毒(16型、18型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
29	湖南圣湘生物科技有限公司	国食药监械(准)字2013第3400618号	人乳头瘤病毒(16，18型)核酸检测试剂盒  (PCR-荧光探针法)
		国械注准20163401295	高危型人乳头瘤病毒核酸（分型）检测试剂盒  (PCR-荧光探针法)
		国械注准20163401304	15种高危型人乳头状瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
		国食药监械(准)字2013第3400617号	人乳头瘤病毒(6，11型)核酸检测试剂盒  (PCR-荧光探针法)
30	中生方政生物技术有限公司	国械注准20153400252	15种型别人乳头瘤病毒和16/18型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(恒温扩增-荧光法)
		国械注准20153400292	人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测试剂盒(恒温扩增-荧光法)
		国械注准20153400253	人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测试剂盒(恒温扩增-荧光法)
		国械注准20153402289	人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测及基因分型检测试剂盒（荧光PCR-熔解曲线法）
		国械注准20153402290	人乳头瘤病毒（HPV）高危型核酸检测试剂盒（荧光PCR-熔解曲线法）
		国械注准20153402288	人乳头瘤病毒（15种基因型）并16/18分型核酸检测试剂盒（恒温扩增-荧光法）
31	博奥生物集团有限公司	国械注准20153401059	人乳头瘤病毒(HPV)DNA  检测试剂盒(荧光PCR染料法)
		国械注准20153400158	人乳头瘤病毒(HPV)分型检测试剂盒(微阵列芯片法)
32	上海普洛麦格生物产品有限公司	国械注准20143401932	高危型人乳头瘤病毒(14个型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
33	珠海赛乐奇生物技术有限公司	国械注准20163400533	人乳头状瘤病毒基因分型检测试剂盒(基因芯片法)
34	艾康生物技术(杭州)有限公司	国械注准20143402229	人乳头瘤病毒(6型,11型)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)
		国食药监械(准)字2014第3401363号	人乳头瘤病毒基因分型(25型)检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)
		国食药监械(准)字2013第3401641号	人乳头瘤病毒(16型,18型)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)
35	深圳康美生物科技股份有限公司	国食药监械(准)字2014第3401238号	人乳头瘤病毒14种型别检测与16/18分型检测试剂盒(荧光探针PCR法)
36	科蒂亚(新乡)生物技术有限公司	国械注准20163401261	人乳头瘤病毒（HPV）E6/E7  mRNA检测试剂盒（支链DNA信号扩增法）
37	杭州德同生物技术有限公司	国食药监械(准)字2014第3401442号	人乳头状瘤病毒(HPV)核酸检测试剂盒(杂交捕获-化学发光法)(商品名：DH2)
		国食药监械(准)字2014第3401443号	人乳头状瘤病毒(HPV)核酸检测试剂盒(杂交捕获-化学发光法)(商品名：DH3)
38	宁波海尔施基因科技有限公司	国械注准20163400305	人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测及基因分型试剂盒(PCR毛细管电泳法)
39	广州和实生物技术有限公司	国械注准20163400763	高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
		国械注准20163400764	高危型人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
40	苏州天隆生物科技有限公司	国械注准20163401513	人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
41	北京博晖创新光电技术股份有限公司	国械注准20163401108	人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(生物芯片法)
42	苏州华益美生物科技有限公司	国械注准20163400768	中高危型人乳头瘤病毒(HPV)核酸分型检测试剂盒(PCR-荧光法)
		国械注准20163400767	低危型人乳头瘤病毒(HPV)核酸分型检测试剂盒(PCR-荧光法)

数据来源：CFDA，整理：小桔灯网

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目前，临床市场分析，美国HPV市场主要由Qiagen、Roche和Hologic三足鼎立；欧洲HPV市场除上述三大公司之外，还有BD和Cepheid等品牌；而中国HPV市场占有率比较高的除了Qiagen、Roche和Hologic等进口品牌之外，还包括凯普、亚能、透景、之江、德同、硕世等国产自主品牌。从产品特点上分析，进口品牌以新技术结合全自动检测系统为主，而国产自主品牌以传统PCR方法为主，需要一定的人工操作协助。从临床市场覆盖面分析，进口品牌由于其仪器和试剂成本较高，主要开发样本量较大的大三甲标杆医院，而国产品牌抢占了中小型及县级医院市场。2015年9月，国务院办公厅发布《关于推进分级诊疗制度建设的指导意见》（国办发〔2015〕70号），指出到2020年，基层首诊、双向转诊、急慢分治、上下联动的分级诊疗模式逐步形成，基本建立符合国情的分级诊疗制度。基层首诊作为分级诊疗的基础，鼓励常见病、多发病患者首先到基层医疗卫生机构就诊，到2017年，基层医疗卫生机构诊疗量占总诊疗量比例不低于65%，基层医疗卫生机构建设达标率不低于95%，这对基层医疗卫生机构的实验诊断能力提出了更高要求。随着分级诊疗制度的落实，中小型及县级医院的HPV市场将会有明显的上升。从筛查市场分析，为健全“两癌”防治工作体系和防控网络，显著增强全社会妇女“两癌”预防意识与能力，实现《中国妇女发展纲要（2011-2020）》的目标，“两癌”发生率处于较低水平，今后在筛查方面具有巨大的市场空间，其中主要包括国家“两癌”筛查项目和地方性的宫颈癌筛查项目。而符合大规模筛查需求的HPV检测产品，需要满足成本可控，操作简便，最好是单人份在短时间内即可出结果的产品，即POCT的HPV检测产品，而且此类产品同样适合临床应用开展。

POCT 是体外诊断器械（IVD）的一个细分行业，凭借便捷、快速的优势，实现在患者身边快速取得诊断结果。目前 POCT 产品已被广泛应用在医院、诊所及患者家中，能够进行绝大多数常规临床指标的检测。全球 POCT市场规模已超过 400 亿美元。在行业发展初期的 1980 至 1990 年代，欧美POCT 市场实现了近 30%的年均复合增速。近几年，血气、心脏标志物、肿瘤标志物、传染性疾病的检测等细分市场整体增速超过 15%。中国人口众多、医疗资源差异较大，是POCT潜在的巨大市场，尤其是对于市场量巨大的HPV市场，更是一片巨大的蓝海。2015年11月26日，国家食品药品监督管理总局（CFDA）发布《人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测及基因分型、试剂技术审查指导原则》提到适用的检测方法主要指基于核酸检测的分子生物学技术，现有HPV核酸检测技术主要包括杂交捕获法、酶切信号放大法、PCR-荧光探针法、转录介导的核酸扩增技术以及PCR-杂交法等。即HPV检测可以分为两大类：一、基于信号放大的方法，如杂交捕获法、酶切信号放大法，此类技术可以结合金标、干化学发光、荧光、化学发光、时间分辨荧光、量子点开发成POCT的产品；二、基于靶标扩增的方法，如PCR-荧光探针法、转录介导的核酸扩增技术以及PCR-杂交法等，此类技术可以结合微流控平台开发成POCT的产品。

HPV检测加入宫颈癌筛查策略，是宫颈癌筛查领域一项重要变化。我国于2014年5月18日在北京举行的“HPV和子宫颈癌筛查策略研讨会”，专家初步共识：中国人口众多、缺乏有力的细胞学阅片体系，对有经济能力的个体筛查，HPV和细胞学联合检测是最佳选择；对以人群为基础的筛查，HPV检测更适合于一线初筛，但依然有待我国检测方法及筛查数据证实。我国国土辽阔、人口众多，卫生经济资源分布不均一，细胞学和HPV联合检测短期内难以实现，HPV检测作为初筛更适合于中国现状，而POCT的HPV检测产品更适合于广大医疗机构及基层开展，是HPV检测未来的发展趋势。对HPV检测结果为阳性或HPV高危分型检测结果为非HPV16/18阳性应当进行细胞学检查，对高危型HPV阳性合并宫颈细胞学检查结果异常（ASCUS及以上）、HPV高危分型检测16/18型阳性或肉眼检查异常者进行阴道镜检查，对阴道镜检查结果异常/可疑者进行组织病理学检查，从而实现宫颈癌的全面防护。

来源：小桔灯网  作者：木吉君