实时荧光定量PCR在医疗领域的应用

检验之星

一、感染性疾病的诊断

1. 用于各种感染性疾病的早期诊断

PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。从理论上来说只要样品中有一个病原体存在，PCR仪器就可以检测到。与病原体抗体检测方法比较具有早期、快速诊断等优点。定量PCR成功的解决了“窗口期”问题，可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。定量PCR研究资料表明，病原体数量与感染性疾病病情的轻重程度、传染性及治疗效果均有相关性。

2. 病原体含量分析

1）疗效考评         

2）指导制定感染性疾病的合理治疗方案

3）了解感染性疾病病人用药后病情的变化情况

3. 病毒性疾病中病毒的耐药性变异株的测定，为疾病的治疗进行指导

4. HLA分型，取代传统电泳方法

二、遗传病诊断

遗传性疾病根据其遗传方式分为单基因遗传病和多基因遗传病。因此，在诊断遗传性疾病时又分为等位基因检测、多基因遗传病的突变检测和基因表达异常所致遗传病检测。如：

1. 地中海贫血
基因的突变和缺失均会引起各种珠蛋白的表达不平衡，用荧光定量PCR检测各种珠蛋白基因表达差异，是地中海贫血诊断的有效手段。

2. 应用于胚胎植入前遗传疾病的诊断

三、肿瘤检测

1. 肿瘤相关基因表达的检测

包括：癌基因、抗癌基因、肿瘤转移基因和转移抑制基因。

例如：乳腺癌与12种肿瘤基因相关，包括：mam、PTP、mamB、CEA、CK19、VEGF、erbB2、mucl、c-myc、p9、vim、Ki67

2. 肿瘤标志物的检测

如：癌胚抗原、标志性酶、同工酶、抗体、激素、细胞因子和受体的检测。端粒酶基因是今年最新发现的肿瘤的标志物。

3. 肿瘤耐药基因的检测（MDR）

在急性白血病MDRI基因表达的研究中，发现初始组的MDR表达水平为0.22±0.01，缓解组为0.25±0.07，而难治复发组0.44±0.07。

在大肠癌MDR基因组表达的研究中，发现化疗MDR的表达0.5，化疗中0.50-0.97，而高分化腺高于中、低分化腺癌。

4. 与肿瘤相关的病毒基因

例如：HBV病毒与肝癌的发病有一定的相关性，EB病毒与鼻咽癌的发病有一定的关系等。

四、药物及医疗相关

1. 新药的开发研究      

2. 超早期感染的用药和治疗研究与开发

3. 新临床诊断及检验试剂的开发           

4. 个人基因型与药物疗效之间的关系

5. 药物疗效的研究

五、与疾病相关

1. 新的预后指标的研究   

2. 合理用药的研究     

3. 建立病原体分子诊断标准

4. 疾病的发病监控研究

5. 研究ELISA方法的漏检率

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不错，如果再详细一点就更好了

检验之星

分子诊断正吸引着越来越多的国内外企业进入。珀金埃尔默、Life Technologies等跨国体外诊断企业，通过并购或合资的方式深度开发国内分子诊断市场。达安基因、科华生物等国内企业也在上市之后进一步加大市场扩张步伐。业内人士表示，国内分子诊断市场增长空间仍然很大，预计后续将有更多企业加入竞争行列。
　　近年来，分子诊断在国内市场迅速崛起。2010年我国体外诊断市场规模为20.7亿美元（约合136.8亿元），其中5%的份额为新兴的分子诊断占据。虽然目前国内分子诊断的比重并不大，但其年均增长速度是全球的2倍，是国内体外诊断中发展最快的领域。
　　最快的体外诊断子领域
　　分子诊断亦是全球体外诊断市场中发展最为迅速的一部分，其占体外诊断的比例已经从1995年的2%增长到了2009的10%，年增长速度达到10%以上。
　　在新兴市场上，分子诊断的增长速度更是令投资者侧目，其中，中国的分子诊断市场年增长速度达到20%以上，为全球的2倍。市场预计，到2015年，新兴市场国家（主要是拉丁美洲和环太平洋地区）将会是分子诊断产品市场增长的主要动力区。
　　“正是因为看到了新兴市场在分子诊断领域的强劲增势，公司目前正致力于开发新兴市场尤其是中国市场的分析诊断。”珀金埃尔默诊断事业部副总裁张晟表示，随着老年人口的增加，医疗模式的转变，社会市场对分子诊断的需求不断增加，分子诊断市场面临前所未有的发展机遇。
　　当前，用于感染类疾病治疗的产品是分子诊断的主要组成部分，约占全部市场的50%;其次是血液筛查，占比约为11%。市场预计，分子诊断技术将会大范围应用到肿瘤个性化治疗、昂贵药物治疗监测、药物代谢基因组学等，POC检测、法医、人群健康筛查与体检、重大疾病预警与诊断、公众分子基因档案建立等方面的应用成为未来的发展趋势。
　　在感染类疾病治疗的分子诊断市场中，人类免疫缺陷病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）、沙眼衣原体（CT）和奈瑟球菌（NG）检测占据主要份额。然而，感染类疾病分子诊断市场格局已经确立，市场竞争异常激烈，对于新的市场竞争者来说机会较少。而人类乳头瘤病毒（HPV）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 （MRSA）检测的分子诊断产品市场则呈快速增长趋势。
　　血液筛查成为国内分子诊断中最受关注的领域，核酸筛查技术更是其中的香饽饽。目前我国血液筛查需求以每年15%以上的速度增长。上海浩源生物技术总监杨国翠告诉记者，政府相关部门十分重视血液核酸筛查项目，卫生部在2010年下半年开始启动采用核酸技术检测所有捐献血液的工作，预计到2015年底可以达到80%的覆盖，从而更好地确保入库血液的质量和安全。
布局国内赢取先发优势
　　正是看到国内血液筛查蓬勃而起的市场机会，跨国体外诊断企业珀金埃尔默于11月22日在上海召开的媒体见面会上宣布，已完成对上海浩源生物科技这家在国内血液筛查市场上具有领导地位的中国公司的收购，交易涉及金额为现金3800万美元。
　　张晟表示，浩源生物是国内首家成果研制出“三合一”血液筛查试剂，在国内分子诊断领域居于领先地位的企业，其目前拥有授权专利7项，已经申请的专利 4 项。此次收购扩展了珀金埃尔默在分子诊断市场的产品系列，提升了公司在血液核酸检测筛查市场的竞争力和在不断增长的中国分子诊断市场的整体竞争优势。
　　事实上，“强强联合”也是企业面临趋于激烈的市场竞争环境下的必然选择。今年年初，另一家跨国体外诊断企业Life Technologies公司宣布与达安基因签订合作协议，在中国成立体外诊断技术合资企业Life-达安诊断。其发展目标正是致力于分子诊断试剂的研发，为癌症、传染性疾病和遗传疾病的体外诊断分析提供支持。
　　业内人士表示，国内分子诊断领域正在崛起，不少外资企业已经看准了国内这块新兴市场的发展机遇，拓展步伐明显加快。在合力做大国内市场的同时，外资企业也能赢取先发优势，营造更有利于自身的市场竞争环境。
　　国内相关企业自然也不会放过这块市场蛋糕。据了解，国内在分子诊断领域做得比较好的企业包括达安基因、上海浩源生物、博奥生物、科华生物、匹基生物、厦门艾德、联合基因、福州泰普、广州益善、江苏为真等。达安基因、科华生物等企业自上市后，开拓这片市场的进程也明显加速。
　　去年，科华生物获得国家食品药品监督管理局颁发的《药品GMP证书》，认证范围包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1型）核酸检测试剂盒（PCR-荧光法），意味着科华生物在分子诊断领域又迈进了一大步;今年年初，达安基因与LifeTechnologies公司宣布成立合资公司，进一步深耕国内分子诊断市场;今年7月，深圳华大基因研究院和宁夏医科大学总医院成功签署战略合作协议，表示将推动分子诊断新技术的研究、开发与应用。
　　业内专家表示，分子诊断领域是一个非常新的、具有挑战性的领域，市场竞争将不断加剧。对于正在崛起中的国内分子诊断产业，亟需政府有关部门及相关政策的关注和支持。此外，分子诊断作为医学检测的核心领域，产业集群化可以提高分子诊断产业的深度，并实现产业链的延伸，产业集群的发展模式应该受到更多关注和重视。