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新型冠状病毒感染的肺炎患者的标本采集和实验室诊断

2020-2-5 00:00| 编辑: 小桔灯网| 查看: 1922| 评论: 0|来源: 上海市公共卫生临床中心

摘要: 2020年1月28日世界卫生组织(WHO)发布了专门针对中国2019-nCoV肺炎的临床指南。关于样本的采集和实验室检测方面有以下说明:1尽量在启动抗生素治疗前采集血培养标本用于检测细菌性肺炎和脓毒症的病原体;但不能为了 ...


2020年1月28日世界卫生组织(WHO)发布了专门针对中国2019-nCoV肺炎的临床指南。关于样本的采集和实验室检测方面有以下说明:

1

尽量在启动抗生素治疗前采集血培养标本用于检测细菌性肺炎和脓毒症的病原体;但不能为了采集血培养标本而延迟应有的抗生素治疗。


2

同时采集上呼吸道(鼻咽和口咽)和下呼吸道(痰,吸取的分泌物,或支气管肺泡灌洗液)的标本,通过RT-PCR进行病毒学检测。对于机械通气的患者可选择仅收集下呼吸道样本。


3

仅在没有RT-PCR条件时才建议血清学诊断。


4

对确诊的住院患者重复收集上呼吸道或下呼吸道样本以证实病毒清除。标本的采集频率至少每2-4天收集一次,但每天不超过一次。患者出现两个连续的、至少间隔24小时的阴性结果(若同时收集上呼吸道和下呼吸道样本,需均为阴性),可以看作是临床治愈。

中华医学会检验分会发布了2019新型冠状病毒肺炎临床实验室检测的生物安全防护指南(试行第一版),在实验室标本采集及检测中,需要遵守以下生物安全防护规范:

1

生物安全防护分为以下级别:

一级生物安全防护:医用外科口罩、乳胶手套、工作服,加手卫生,可戴医用防护帽。

二级生物安全防护:医用防护口罩或N95口罩、乳胶手套、工作服外隔离衣、医用防护帽,加手卫生。酌情(比如有喷溅风险)可加护目镜。

三级生物安全防护:医用防护口罩或N95、单或双层乳胶手套(条件许可,可以不同颜色)、面屏、护目镜、工作服外防护服、单或双层医用防护帽,加手卫生。必要时双层口罩(外医用防护口罩,内N95)。

特殊防护:比如患者剧烈咳嗽且没有呼吸道屏障时,在三级防护的基础上,可以双层防护服、双层口罩(外医用防护口罩,内N95)、全面型呼吸防护器、三层乳胶手套、双层医用防护帽等。

防护用品包括:医用外科口罩(YY0469-2011)、医用防护口罩(GB19083-2010)、N95(美国NIOSH42CF R84-1995)(下文行文包括KN95[GB2626-2019])、全面型呼吸防护器、防护服、隔离衣、工作服、乳胶手套、医用防护帽、护目镜、防护面具或防护面屏(下文简称面屏)、鞋套和防水高靴。


2

标本采集中的安全防护:

① 对于一般发热患者采集者须二级生物安全防护。

② 对于疑似患者就地隔离采样。不建议检验人员进入隔离区采集标本,尽量减少患者、人员流动。采集者须三级生物安全防护。进行血常规、CRP不开盖的检测时,实验室人员至少二级生物安全防护,进行核酸检测必须三级生物安全防护。标本按接触确诊患者的标准处理。

③ 对于确诊病例,采集者须三级生物安全防护。要求患者佩戴口罩或其他呼吸屏障,避开患者咳嗽、呼吸道诊疗操作等时刻。采集过程须兼顾安全和目标。在能够达成目标的情况下,尽量减少接触、尽量避免气溶胶和飞沫产生、尽量缩短在床旁的持续时间。患者自主完成采集时,如咳痰、粪便标本,医师或护士交代完医嘱后即行回避。实验室接收和处理标本应进行三级生物安全防护,手工检测的项目要在生物安全柜中进行。

如果相应医疗机构同时处理一般患者,则疑似或确诊患者的标本要有特殊标识(下文用XG代指)。


3

标本检验中的安全防护:

① 共同原则

如果操作过程不必打开试管塞(比如真空采血管的帽),则二级生物安全防护。如果操作过程须打开试管塞,或可能产生气溶胶,或可能接触标本本身,则三级生物安全防护。

② 高风险

1)直接接触XG标本本身;

2)XG标本核酸扩增试验时的处理、扩增,

3)疑似、确诊患者呼吸道分泌物涂片、培养时的操作;

以上须三级生物安全防护、生物安全柜操作。

直接接触XG标本本身时,如果佩戴双层手套,可及时更换。如果有喷溅,须尽快更换。

核酸检测实验室符合《关于医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测有关要求的通知》(国卫办医函[2020]53号)的要求。核酸扩增前,可以对标本先行消毒。包括56℃孵育30min,加蛋白酶K。黏液痰加胰蛋白酶或4%NaOH操作时,避免气溶胶。保持环境有效负压(如果具备条件),及时稀释、排除气溶胶。

分泌物涂片须在安全柜内涂布。涂布后须紫外照射30min。

标本培养相关操作(液化、振荡、涂布、划线等)须在安全柜内完成。看培养皿生长,建议在安全柜内进行。

③ 低风险

非XG标本,XG标本明确不开塞、不产生气溶胶等,采用二级生物安全防护。

④ 风险不确定

自动血细胞分析仪、自动凝血分析仪、自动化学检测仪、自动免疫学检测仪等检测XG标本的过程中,有产生气溶胶的风险。此时产生喷溅、气溶胶的时间、剧烈程度不确定。对于确诊患者XG标本,建议三级生物安全防护。疑似患者XG标本,可以二级生物安全防护,或在此基础上适度加强。

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