细胞铺板总是铺不均匀?别急，方法来了！

生物科研实验室

你们在细胞铺板的过程中，是否也经常遇到铺板不均匀的困扰呢？今天一起探讨下这个常见问题。

一 细胞铺板不均匀可能会产生以下影响：
实验结果一致性：导至实验结果的一致性较差，难以进行可靠的比较和分析。

数据可信度：降低数据的可信度，可能影响研究的科学性和准确性。

细胞生长状态：影响细胞的生长和分布，部分区域细胞过于密集，而其他区域细胞过少。

代谢差异：造成不同区域细胞的代谢状态差异。

实验偏差：增加实验的偏差和误差。

形态观察：不利于对细胞形态和结构的观察。

统计分析：给后续的统计分析带来困难。

药物实验：在进行药物筛选等实验时，影响结果的准确性。
二 细胞培养板孔数的选择



流式一般用 6 孔，MTT 一般用 96 孔，细胞爬片一般用 24 孔等，具体需要根据你的实验目的来定。
三  常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量

四  铺板均匀小技巧

a 10cm dish



前前后后，"十"字法，轻柔且缓慢，10次重复即可，显微镜下观察是否均匀。



b 6孔板和35 cm dish，12孔板以及24孔板

也是“前前后后”这样操作，然后镜下观察是否摇匀，要是不满意继续谣。（备注：12孔和24孔板晃的可以比6孔板更剧烈一点，切记不要让培养基溅到盖子上）



c 48孔板

轻拍孔板边缘！加入200-500μL左右细胞悬液，左手或右手水平持板，沿着4条边 依次轻拍数下，不要拘泥于拍顺序和位置，以镜下均匀为准。





d 96孔板

把你要的细胞悬浮成100μL，使用移液枪，垂直于平板缓慢滴加到板中央即可，只要够垂直够居中，一般不需要摇晃或者拍板就可以非常均匀。