临床血液学检验中常用的抗凝剂有以下3种:
1.枸橼酸钠(柠檬酸钠):枸橼酸能与血液中的钙离子结合形成螯合物,从而阻止血液凝固。市售枸橼酸钠多含2分子结晶水,相对分子质量为294.12,常用浓度为109mmol/L( 32 g/L)。枸橼酸钠与血液的比例多采用1:9( V:V),常用于凝血象和红细胞沉降率测定(魏氏法血沉测定时抗凝剂为1:4,即抗凝剂0.4 ml加血1.6 ml)。
2.乙二胺四乙酸二钾:抗凝机制与枸橼酸钠相同。全血细胞分析用EDTA-K2,1.5-2.2mg可阻止1ml血液凝固。由于其影响血小板聚集及凝血因子检测,故不适合做凝血象和血小板功能检查。
3.肝素:是一种含有硫酸基团的黏多糖相对分子质量为15000,与抗凝血酶III( AT-III)结合,促进其对凝血因子II、V、VII、X和凝血酶活性的抑制,抑制血小板聚集从而达到抗凝。通常用肝素钠盐或锂盐粉剂(125U =1 mg) 配成1g/L 肝素水溶液,即每毫升含肝素1mg。取0.5ml置小瓶中,37-50℃烘干后,能抗凝5 ml 血液。适用于红细胞比容测定,不适合凝血象和血液学一般检查,因其可使白细胞聚集,并使血涂片染色后产生蓝色背景。
血常规检测推荐使用的抗凝剂为EDTA-K2
向血液中加入抗凝剂,血细胞为了适应新的环境会在血液中产生一个平衡反应。未按要求刻度采血、质量较差的真空采血管或微量采血管会延长血细胞的抗凝反应时间。血液的抗凝反应会暂时使血细胞收缩,因而不能维持血细胞接近自然状态。
向血液中添加外来物质,可诱导细胞产生包括膨胀和收缩的应答反应。血液抗凝剂用于采集新鲜血液标本并置于采血管内时使用,形成血浆。此反应是渗透性的变化。水会从细胞内渗透到细胞外的高渗透浓度环境。这个过程也许只需要1到2分钟。
经过不长的时间,细胞会对细胞外过量的阳离子做出应答,向细胞内部泵送钾离子。绝大部分标本会在采血后的一个非常短的时间内迅速恢复他们的自然状态特征,从而可以很容易的被VCS技术检测;另外一部分标本会需要20到30分钟,这取决于标本本身。在此达到平衡稳定时间的期间,水份会随阳离子进入细胞内导致细胞膨胀。当细胞膜内外达到离子平衡,细胞大小稳定,接近其原始大小。增加抗凝剂的浓度(过量抗凝)会增加细胞的收缩反应,延长达到平衡稳定的时间。