什么是HEK293？HEK293 稳定细胞株开发服务介绍？

xiaoqin

    一、什么是HEK293

    HEK293细胞，又叫人胚胎肾细胞293，是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系，具有转染效率高，易于培养等特点。因此成为了广大研究者研究基因功能的一个强大工具。

    二、HEK293细胞系概览

    （注：以下细胞介绍中，HEK293细胞简称为293细胞）

    293T细胞：293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株，即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增，促进蛋白的表达。293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产，还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产，如腺病毒及其他哺乳动物病毒。

    293T/17细胞：293T细胞中共转染入pBND和pZAP质粒，获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外，还具有高转染性的特点。

    293H细胞：293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。另外，该细胞系贴附力好，而被用于噬菌斑检测等应用。

    293E细胞：293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系，该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV复制起点（oriP）的重组表达质粒，能够在H293E细胞中复制，并实现蛋白的高效表达。

    293F细胞：293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV-SPORT6-TAg.Neo质粒的转化细胞系，能够快速增殖，易转染，其能够用于慢病毒的生产。

    293S细胞：293S细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。

    293SGGD细胞：293SGGD细胞系则指的是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系，其主要用于糖基化工程研究中。

    三、HEK293细胞表达系统的优势

    1)转染效率高；

    2)2)可悬浮培养用于大规模表达；

    3)表达蛋白结构最接近其在人体内构象；

    4)HEK293细胞在培养体系中能够快速增长，高密度培养。

    5)HEK293细胞与神经元细胞一样，对外界微环境较为敏感，利用这一特点，可用于药物发现及细胞毒性测试。

    在HKE293细胞系培养的整个过程中，都需要对细胞进行浓度和活率检测，义翘神州将对外进行稳定细胞株开发服务，下面是简介：

    稳定细胞株开发服务简介

    稳定细胞株适用于各种研究应用，如重组蛋白和抗体生产、检测分析、基因编辑、功能性研究等等。义翘神州多年从事蛋白表达研究，具有大量稳定细胞株开发经验，能够有效提高稳定细胞株的生产能力，改善实验结果。我们整合所有的实验步骤，提供从基因序列到稳定株交付的一站式服务。

    稳定细胞株开发服务流程

    双方沟通确定实验需求及服务价格签订技术服务合同，收取预付款瞬转表达评估（CHO稳定株开发）稳定细胞株构建和筛选提供稳定细胞株蛋白大量表达和纯化（可选）交付产品并收取尾款

    HEK293稳定细胞株的开发：

    服务步骤及内容周期交付内容基因合成及密码子优化（可选）1-2周载体构建2-3周测序报告•克隆至表达载体

    •质粒测序

    •大量质粒制备瞬时表达评估2周评估报告•瞬时表达

    •ELISA及/或WB检测表达水平稳定细胞系的构建10-12周•鉴定报告

    •2管细胞（1x10^6细胞/管）•稳定转染及筛选

    •鉴定（qPCR及/或FACS）•亚克隆

    •鉴定（qPCR及/或FACS）

    •细胞建库大量表达及纯化（可选）2-3周•纯化蛋白

    •SDS-PAGE报告

    •CoA

来源：https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service