利用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)基本原理是根据三个原则: (1)淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说; (2)杂交瘤细胞保持双方亲代细胞特性化; (3)然后大量培养增殖,制备所需的McAb。 一、单克隆抗体的产生 1.动物体内诱生方法:目前McAb治疗用或体外诊断用的多数尚采用这一方法制备。先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不完全佐剂,一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔,l~2周后,无菌抽取腹水,离心取上清液即可。 2.体外培养法:这是实验室制备的方法。将杂交瘤细胞置培养瓶中培养,待培养液颜色改变或细胞过多开始死亡时,收集上清液,离心去掉碎片及细胞即可。另一种是杂交瘤细胞高密度培养法。 二、单克隆抗体的纯化及鉴定 目前常用的纯化方法有盐析、凝胶过滤、离子交换层析和辛酸提取等方法。 单克隆抗体性质鉴定方法如放免测定医学教*育网整理、补体介导溶血试验、ELISA、免疫酶、玫瑰花结形成试验等,最常用的为ELISA方法,一般先作定性试验,如阳性,进一步作定量检测。 单克隆抗体原理: 抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。 义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。 单克隆抗体定制服务介绍: 针对定制单克隆抗体,义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作,完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台,我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等,来选择最合适的技术平台。此外,义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术,确保最终鉴定到最佳的抗体,以满足研究、诊断和治疗领域等应用。 义翘神州单克隆抗体服务优势: ①先进的抗体发现技术 ②成熟的抗体开发平台 ③多种抗原类型 ④多种检测验证平台 ⑤完全定制化的实验方案 ⑥专业的解决方案 更多单克隆抗体服务推荐请参考:https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services
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