义翘神州重组抗体表达服务介绍及常见问题解析

xiaoqin

作为领先的重组抗体表达专家，义翘神州一直致力于生产高质量的重组抗体，以满足早期药物发现和临床前研究的需求。我们拥有自主优化的哺乳动物表达平台，并开发了多种独家试剂，以提高重组抗体在293和CHO细胞中的表达水平。除了表达全长抗体外，义翘神州还可以生产不同类型的重组抗体，包括Fab、scFv、sdAb/VHH、Fc融合蛋白、嵌合抗体和双特异性抗体等。

义翘神州提供灵活且价格划算的定制重组抗体生产服务，可以从抗体 (或VH/VL) 序列信息、杂交瘤细胞或cDNA开始，最终交付高纯度和低内毒素水平的重组抗体，并附上详细的QC数据。

重组抗体表达服务常见问题解析

1.如何提高抗体的稳定性？

优化洗脱条件，可以从高的PH逐渐降低；纯化的样品要及时中和，甚至一边纯化一边中和；纯化实验过程中样品低温制备和保存；添加蛋白保护剂比如甘油、吐温；抗体浓度较高时需要及时稀释，避免高浓度聚沉的风险。

2.如果用哺乳体系进行表达的话，选择293或cho有什么区别？

CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞，是目前表达外源蛋白最多最成功的细胞之一。该细胞属于成纤维细胞，是一种非分泌型细胞，自身很少分泌内源蛋白，因此有利于目的蛋白的纯化分离；相较于其他细胞类型，CHO细胞是治疗性蛋白生产的主要宿主细胞的原因如下：

（1）能在化学成分限定和无血清悬浮培养中稳定生长，

（2）该细胞基因组信息明确，在人类致病病毒应答方面表现出合理的安全性，

（3）能够表达与人相似的翻译后修饰。

此外，CHO细胞表达系统的最重要优势之一是能够容易的得到基因改造的细胞。然而，因为糖基化模式与人类不完全相同，导至CHO细胞产生的重组蛋白在某些时候仍然表现出免疫原性。

HEK293细胞是真核蛋白表达常用的细胞之一，它具有以下优势： 更快的生长速度，更高的生长密度、转染效率高，表达后修饰更接近人体蛋白的结构，可能会有潜在的人病毒污染。

3.义翘神州表达重组抗体服务的优势是什么？

(1)>99%成功率：多年的工艺优化和生产经验可确保高成功率。

(2)高表达通量：>1000+抗体/周

(3)交付周期短：从基因序列到纯化抗体最快10天内完成。

(4)规模化的生产能力：灵活的生产规模，范围从μg到g级。

(5)多种抗体形式：scFv、Fab、VHH、嵌合抗体、双特异性抗体、Fc融合蛋白或全长IgG、IgM、IgA和IgE抗体。

(6)哺乳动物细胞表达平台：优化的高效表达载体、优化的自主产权培养基和专有的转染试剂。

4.重组抗体的载体如何选择？

重组抗体表达载体和细胞最好是配套的，比如293T细胞对应PCDNA3.1载体，有EBNA改造的细胞对应有Orip复制起点的载体，还有就标准细胞株和标准质粒，例如Thermo的293F对应PCDNA3.4载体等。

5.如何提高重组抗体的产量？

选择高表达系统，制备无内毒素、高超螺旋质粒，细胞状态要好，时间允许可以表达优化，延长表达时间，提高纯化得率。

6.表达的重组抗体是否具有活性？

真核表达系统较原核表达的优势就是活性较好，理论上大部分都是有活性的，但是不同的样品稳定性不一样，需要以实际实验结果为准。

7.是否能高通量筛选重组抗体？

可以做高通量抗体表达及筛选，利用深孔板震荡仪培养，一次可以做大量的表达，可以通过ELISA效价检测筛选，可以通过微量纯化获得20-50ug抗体。

来源：https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-antibody-production-service