颠覆性突破！新型HIV检测技术灵敏度提升40倍，早期感染无处遁形

在抗击HIV/AIDS的全球战役中，早期诊断始终是阻断传播、改善预后的关键一环。然而，当前检测手段正面临一个棘手困境：

• 核酸检测（PCR）：灵敏度高，但依赖昂贵设备和专业人员，无法在资源匮乏地区普及

• 快速诊断试纸条（RDT）：便捷廉价，但灵敏度不足，容易漏检急性感染期患者

HIV-1 p24抗原作为病毒核心蛋白，是早期感染的“哨兵”标志物。但它在急性感染期的浓度极低（可低至0.1 pg/mL以下），传统侧向层析免疫分析（LFIA）对其束手无策。

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研究亮点：ai-LAMP技术横空出世

2025年9月24日，普渡大学（Purdue University）魏尔登生物医学工程学院的研究团队在bioRxiv预印本平台发表了一项突破性成果。该研究由Jacqueline C. Linnes教授和Tamara L. Kinzer-Ursem教授共同指导，第一作者为Navaporn Sritong博士。

研究团队创新性地提出了抗体启动环介导等温扩增技术（antibody-initiated LAMP，简称ai-LAMP），巧妙地将抗原-抗体特异性识别与核酸高效扩增融为一体，实现了在简易试纸条上对蛋白质的超灵敏检测。

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技术原理：当抗体“牵手”DNA

1. 核心设计思路

研究人员设计了两类关键探针：

• 正向探针（47pF）：p24单克隆抗体47p + 部分DNA模板（112F）

• 反向探针（49pR）：p24单克隆抗体49p + 部分DNA模板（125R）

这两段DNA模板拥有6个核苷酸的互补重叠区，如同两块拼图，等待彼此靠近时完成拼接。

2. 工作原理四步走

• 第一步：抗原识别当样本中存在HIV-1 p24抗原时，两种抗体探针同时结合到抗原的不同表位上，将两段DNA模板拉近。

• 第二步：模板完成近距离下，6个核苷酸的互补重叠区促使两段DNA模板杂交，形成完整的193 bp LAMP扩增模板。

• 第三步：信号扩增加入LAMP反应体系后，Bst 2.0 DNA聚合酶在恒温66°C条件下启动扩增，50分钟内生成海量DNA拷贝。

• 第四步：试纸条显色扩增产物两端分别标记FITC和生物素，通过侧向层析试纸条上的抗FITC抗体捕获，金纳米粒子-链霉亲和素复合物显色，形成肉眼可见的检测线。

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关键发现：数据说话

1. 灵敏度实现质的飞跃

• 检测下限（LOD）：20 fM（相当于0.53 pg/mL或532 fg/mL）

• 动态范围：0.5 ~ 5×10⁵ pg/mL（跨越6个数量级）

• 灵敏度提升：相比现有HIV p24 LFIAs，灵敏度提高约40倍

作为对比，FDA批准的Determine™ HIV-1/2 Ag/Ab Combo试纸的LOD为25 pg/mL，ai-LAMP的灵敏度高出近50倍。