【CFDA核查失败案例】论IVD临床试验血样收集重要性

    一、前言

       2016年7月，国家食品药品监督管理总局《关于开展医疗器械临床试验监督抽查工作的通告》（2016年第98号），2016年7月，总局组织开展了第一批医疗器械临床试验监督抽查。其中查出的一个问题就是：

     四川迈克生物科技股份有限公司的乙型肝炎病毒e抗原测定试剂盒（化学发光法）（受理号：准 15-2788）在四川大学华西第二医院开展的临床试验中，临床试验方案规定试验样本类型为350例血清，而实验室实际检测样本类型为血浆，临床试验报告中样本类型为血清。

     可能是操作人员没搞清楚血浆与血清的区别，也可能是血样收集马马虎虎。这次检查结果一公布，导至了后续一大批的诊断试剂临床注册撤回，也可能是都具有同样的问题吧。

     在体外诊断试剂（IVD）临床试验中，我们的工作人员经常会根据产品要求来收集血样，包括血浆，全血，血清。这些血样之间有什么区别？如何能够合理的收集？本文从小编实际工作的角度讲解一下。

       一、全血、血清、血浆定义

      1.1全血

       全血，医学术语。将人体内血液采集到采血袋内所形成的混合物称为全血，即包括血细胞和血浆的所有成分。

     1.2血清

       血清：血液凝固析出的淡黄色透明液体。如：将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。

     1.3血浆

       血浆：离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，是血液除去血细胞后的成分，其组成绝大部分是水，其次是各种血浆蛋白。

         二、全血、血清、血浆区分

        2.1通过检测项目区分

             比如那些检测项目是血清，哪些检测项目是血浆，跟检验科工作人员反复确认。

        2.2通过采血管盖子颜色来区分           

         真空采血管颜色及用途的国际分类：

1. 黄头管：内含惰性分离胶、促凝剂，制备标本为血清。惰性分离胶的比重大于血清而小于血凝块，离心后胶体移动至采血管中间，隔离血块和血清，便于直接上机和标本的保存，并保证了一些敏感指标的稳定性（如血糖、电解质、酶类等），提高了检测结果的准确性。黄头管用于临床生化、免疫、内分泌、放射免疫、PCR等检测实验。采血量3~10ml。

2. 红头管：制备标本均为血清，红头管和黄头管的区别是它不含分离胶。用于临床生化、免疫、内分泌、放射免疫、PCR等检测实验。内壁处理，防止血细胞附壁。采血量为3-5ml。

3. 紫色管：内含EDTA-K2(K3)抗凝剂，制备标本为全血。用于血液常规、血型鉴定、交叉配血等实验。内壁处理。采血量为2ml,5ml。

4. 绿头管 ：内含肝素钠（钾 锂）抗凝剂，制备标本为血浆，全血。用于血浆生化实验、血液流变学实验，内壁处理。采血量为3-5ml。

5. 蓝头管 ：内含0.105或0.129摩尔（相当于3.2%或3.8%）柠檬酸钠抗凝剂0.2ml，0.3ml，制备标本为血浆。用于血凝固实验，凝血因子的检测实验。内壁处理，防止血小板的聚集和粘附。定量采血，采血量为1.8ml ,2.7ml。

6. 黑头管 ：内含0.129摩尔（相当于3.8%）柠檬酸钠抗凝剂0.5ml ,0.6ml ,制备标本为全血。用于血细胞沉降率实验。内壁处理，防止血细胞粘附。定量采血，采血量为1.6ml ，2.4ml.。

7. 灰头管 ：内含抗凝剂和防止血糖降解的氟化钠，制备标本为血浆。用于血糖、糖耐量实验。 定量采血，采血量2-3ml，采血后立即送检。

8. 草绿色管 ：内含肝素锂和分离胶，制备标本为血浆。用于快速血浆生化实验。定量采血，采血量为3-5ml。

     三、溶血样本的区分

          溶血，即血液中红细胞因为内外界各种原因破裂，血红蛋白逸出，导至血浆由淡黄色变为血红色， 取的血清颜色发红也是溶血现象。               

          如何避免溶血：

1）采血时定位进针不准、针尖在血管中探来探去造成血肿等而发生溶血。要一针见血。

2）血标本在运输过程中（或离心前）过度振荡或储存不当。

3）血样的保存，禁制骤冷！不要直接丢-20℃-80℃之类的。

4）尽量不要收集注射器推到最后的血，也不要使劲挤压注射器。

       在血样收集过程中，能够区分全血、血浆、血清，能够保证不溶血，试验开展起来才能顺顺利利。