一 相关概念
根据取代基的不同,常用作化学发光标记物的吖啶取代物分为两类:吖啶酯(I)和吖啶磺酰胺(II)。它们的结构中都有共同的吖啶环。 它们的发光机理相同:在碱性H2O2溶液中,分子受到过氧化氢离子进攻时,生成不稳定的二氧乙烷,此二氧乙烷分解为CO2和电子激发态的N - 甲基吖啶酮,当其回到基态时发出光子。 二 反应原理 无需一个催化过程,也不需要增强剂,从而降低了背景发光,提高了信噪比,干扰作用少。一般采用原位进样和时间积分法测量信号。 三 反应过程 四 发展历程 第一代结构简单,和蛋白时需要EDC等偶联剂; 第二代在第一代基础上增加了活化好的羧基集团,可以直接偶联蛋白(国内); 第三代在前一代基础上改变侧链结构,增加发光效率,改变亲水性等; 第四代直接合成带有小分子抗原结构(如激素,多肽等)的复合物(国外)。 五 与其他主流化学发光区别
测量方式的区别 六 总结 从实际情况来看,各种化学发光方法学之间并无试剂性能上的明显差异;厂家可以根据市场情况与自身条件选择合适自己的体系方法。 |