“异嗜性抗体干扰”造成的检验结果与临床不符，及其分析解决

一、前言

检验结果与临床不符的情况，在医疗工作中并不少见。遇到这种情况，部分临床医生可能不经调研直接认为是检验科水平不够，将责任推卸给检验科，完全不尝试与检验科一起，一步步将标本采集过程，检验科室内质控（复查），患者检查前是否有用药史，是否处于窗口期，检验方法学的局限，甚至可能是患者自身某些固有干扰导至这样的异常结果去排除各种可能性，找出真相！今天，通过几个病例，和大家分享下异嗜性抗体(HA)这个可能日常工作并不多见却更容易被大家忽视的影响因素。

二、病例分析

病例：近4个月来，61岁的林大伯每于饭后自感胸闷，结合几年前体检发现血压140/92mmHg偏高，未经治疗，女儿带老人去了省城医院就诊。查体：心电图检查、血液一般检查均可。因患者自诉于县城医院查体血浆B型钠尿肽（BNP）达3242pg/ml（BNP正常值<100pg/L），远远超出正常范围。故给予复查指标，结果为1753.5pg/ml。但患者临床未出现心衰症状。又予查各项心功能指标及凝血指标，除DD轻度增高，其它均正常；胸部影像学检查等也未见异常。数日患者行降压药治疗后，缓解出院。后医生查阅文献，认为是免疫检测中的异嗜性抗体干扰反应导至BNP假性增高，询问患者得知其田间劳动时有被老鼠噬咬出血史。后又采集林大伯血液，血浆经过处理去除HA，林大伯BNP正常。

此外，因为HA导至的误诊病例还有很多，例如一女性患者，查体人绒毛膜促性腺激素（HCG）数值极高，但未见妊娠迹象，医生最后考虑滋养层细胞肿瘤，不得已予患者行化疗方案。最后得知患者因输血史导至体内HA存在干扰了检验学反应。这样一个检验漏洞，不仅让病人白白遭受化疗的痛苦，更是提醒我们类似HA这样我们易忽视的干扰对检验结果的影响。再例如化学发光法检测促甲状腺激素结果假性增高，后将检测样本用 PEG 预处理，去除样本中可能存在的大分子蛋白质后再行检测，TSH 水平恢复正常等等例子，都提示异嗜性抗体需要我们去了解它的来源及影响方式，及处理方式。

三、异嗜性抗体的定义、来源及结合特性

HA 是由已知的或未知的抗原物质刺激人体产生的一类具有足够滴度、能与多个物种的免疫球蛋白发生相对弱的结合的多重特异性的免疫球蛋白。HA 的产生通常是由于人类直接接触到动物污染的食品、或者接种来源于动物血清或组织的疫苗产品，或输血后产生。在大多数情况下，直接接触宠物小鼠或实验室小鼠是导至人体产生 HA 的最常见原因。 据研究证实，在健康人群中，约3%～15%体内含HA。 HA一般无明确的免疫原，可与许多动物免疫球蛋白的 Fc 和 Fab 表位结合，而不与抗原结合位点结合，但其亲和力较弱。它的这一特性，决定了它在众多免疫学检测中的干扰机制。

四、HA的干扰机制（免疫方法学上的干扰）

1、HA 在夹心免疫法中的干扰机制

夹心免疫测定法中，HA 与试剂抗体（捕获抗体和标记抗体）的结合，可通过Fc-Fc和Fab-Fab 两种结合方式干扰测定。 在以Fc-Fc 的方式结合的机制中，HA 的 Fc 端结合到捕获抗体的 Fc 段上，而 HA 的 Fab 区域则结合到标记抗体的Fab区域上，导至假阳性结果。在以Fab-Fab 结合方式的机制可引起假阳性或假阴性的结果，如HA的Fab区域通过分别结合捕获抗体的Fab区域和标记抗体的Fab区域，阻挡捕获抗体和标记抗体与待测抗原的结合，从而导至假阴性。（如图1） 

2、HA 在竞争免疫法中的干扰机制（如图2）

3、3-位点免疫检测法中的干扰机制

五、受HA干扰的常见检测项目

通过刚刚对HA 干扰机制的分析，我们不难判断它会影响日常哪些项目的检测。即只要是目前检验科采用的以上几种免疫方法学检测的项目，都有可能受到HA的干扰。也就是免疫科室几乎所有项目都有可能被涉及到。例如生化免疫室常用的不论是雅培化学发光微粒子免疫检测法测定各项激素、心肌标志物等，还是罗氏的电化学发光法测定肿瘤标志物、乙肝两对半等，都有可能受到HA的干扰，这提示我们日常工作一定要对此多加留心。

六、HA干扰的消除措施

1、阻断法

最常用的方法要数第一种：对样本进行适当的预处理，即在样本中加入鼠IgG抗体和聚乙二醇( PEG) 以沉淀样本中的异嗜性抗体。（即采用鼠血清和 FEG 配制的试剂与患者血清 1∶ 1等量混合，4 ℃ 冰箱放置过夜以中和其中的HA）。当然现在市场上已有更加便利的商品化试剂——异嗜性抗体阻滞剂、阻断试剂盒或阻断试管，大家都可以尝试。

2、稀释法

如果样本 HA 浓度含量不是很高，且它所造成的干扰不是很大时，稀释法也可以减少它的干扰，但不能完全消除。

3、提取法

可以采用吸附在氟乙烯表面的鼠 Mc Ab，固相结合在琼脂糖凝胶柱上的蛋白G或者蛋白A去提取HA的方法、三氟乙酸沉淀法、巯基试剂法、阳离子交换剂和亲和层析等方法，均对消除 HA 有一定效果。

七、小结

HA是众多检验干扰中容易被大家忽视的项目之一。日常工作中遇到这种检验结果与临床严重不符的情况，我们可以往这个方向考虑，进而追究其鼠类接触史，输血史，疫苗接种史等。希望这篇总结能给广大检验同仁日常工作一些小的帮助。一切旨在更好地为病人服务！

八、参考文献（略）